文摘gydF4y2Ba
这是假设缺氧可能抑制一氧化氮(NO)生产减少的可用性内皮没有合酶(NOS III)衬底。gydF4y2Ba
评估效果精氨酸在高海拔没有释放,11个学科被注入了精氨酸(0.5 g·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)在normoxia 30分钟,36小时后4350(缺氧)。l-citrulline和环鸟苷酸(cGMP)浓度测定调查没有合成和guanylyl环化酶分别活动。l-citrulline浓度、动脉氧饱和度(gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)、系统性血压、心率和急性高山病(AMS)分数测定静止15,输液开始后30 - 45分钟。gydF4y2Ba
结果表明,基线l-citrulline缺氧较低(p < 0.05)。精氨酸增加注入l-citrulline集中在这两个条件。然而,在缺氧l-citrulline浓度仍低于normoxia (p < 0.05)。在缺氧cGMP的浓度较低(p < 0.05)。在缺氧,gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba从输液开始后15分钟增加到45分钟(p < 0.05)。血压和心率没有受到精氨酸灌注的影响。gydF4y2Ba
受试者经历了AMS的症状出现了轻微的下降与精氨酸AMS得分。gydF4y2Ba
l-citrulline表明低氧诱导损伤的减少一氧化氮合酶III或精氨酸减少可用性。改善动脉氧饱和度的预处理与精氨酸可以归因于一个通气/灌注比率的提高。总的来说,这些结果符合一氧化氮产量减少缺氧引起,可以通过提供一氧化氮合酶辅被用物。gydF4y2Ba
暴露在高海拔低氧血原因,通常伴有急性高山病的临床表现(AMS)和可能导致肺动脉高压的发展和高海拔性肺水肿(HAPE)。有几个因素有罪:缺氧性肺血管收缩(HPV),保水性、渗透性变化gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。增加释放血管收缩剂,如内皮素、儿茶酚胺,在高海拔可能部分负责HPVgydF4y2Ba2gydF4y2Ba。然而,一氧化氮(NO)合成的损伤肺内皮细胞发生在肺高血压过程表明肺血管张力的增加可能有它的起源在下降endothelium-dependent放松gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。没有合成肺动脉内皮细胞内皮本构的行动没有合酶同种型(NOS III)阳离子氨基酸精氨酸(Arg)。没有生产的终端guanidino-nitrogen参数在转换到第三号l-citrulline反应,需要氧气分子和代数余子式。直接测量没有释放的血管内皮细胞需要一个不要找电极。然而,形成l-citrulline stochiometrically没有比短暂的不可能更容易测量。LagerwerfgydF4y2Baet al。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba曾表明,测定l-citrulline充实等离子体是一个有用的工具的评估gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba没有生产。因此,没有可以直接测量的释放l-citrulline浓度作为指数的合成。没有合成的NOS取决于基质的可用性gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。在正常的血管,底物的量是足够的转换速度最大。然而,添加参数导致肺动脉endothelium-dependent放松从Arg耗尽gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。慢性缺氧可能损害Arg的吸收到内皮或改变其可用性或新陈代谢。然而,参数缺乏似乎并不占的减少没有生产报告在内皮细胞暴露于短期缺氧gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。相比之下,Arg恢复endothelium-dependent放松肺循环的慢性缺氧大鼠gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,这表明细胞内参数的可用性是一个关键因素的规定没有在内皮细胞合成的速率。此外,在肺动脉高压、基底等离子体参数水平低于平均水平gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,支持的假设参数的相对缺乏池可能导致肺动脉高压的发病机制。因此,了解细胞内的代谢参数可能澄清的机制没有形成减少缺氧。另外,低氧张力抑制NOS活性的生化检测孤立NOS酶gydF4y2Ba12gydF4y2Ba和慢性缺氧不能中断信号通路的guanylyl环化酶(GC)gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。然而,慢性缺氧诱导的upregulation NOS蛋白表达和活动gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。因此,在长期缺氧,Arg的可用性似乎是较低的。探索急性缺氧暴露的假设与参数减少可用性和确认是否可以恢复在高海拔下降没有活动提供的前体,等离子体l-citrulline (l-cit)和环鸟苷酸(cGMP)浓度测定在人类在注入参数在海平面(normoxia)和36 h后暴露在海拔4350米(缺氧)。因此,在动脉氧饱和度(外生参数的影响gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)和AMS分数检查。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba
主题gydF4y2Ba
共有11名健康受试者男性(8)自愿参加这项研究的伦理委员会批准后医院内克尔(法国巴黎)。每个主题进行了体检,并充分了解实验过程。所有志愿者适度训练,海平面高山肺水肿本地人,没有经验。他们没有上呼吸道感染史≥4周之前的研究中,在实验前没有适应这种高度,不消耗任何长期药物治疗前或咖啡因Arg负载。他们的年龄和体重(均值±se) 27.8±1.5岁和73.0±2.8公斤,分别。gydF4y2Ba
研究设计gydF4y2Ba
所有的经历都是在两个条件:在海平面在第一周(博比尼医院法国,高度:60 m,气压761±5毫米汞柱),3周后在勃朗峰现场实验室(Vallot天文台高度:4350米,气压457±1毫米汞柱)。受试者的直升机运送夏蒙尼(高度:1035米)到4350年< 15分钟。在实验室温度保持不变在20°C在整个研究。响应参数注入确定海平面和36小时后到达4350米。在仰卧位休息1小时后,每个主题都有一个简短的塑料导管引入一个肘的静脉输液前15分钟开始。一剂Arg (l-arginine-chloride;Laboratoire威龙等Froment,马赛,法国)注入(0.5 g·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)。Arg稀释在250毫升5%的葡萄糖溶液和输液的持续时间是30分钟。每个剂量接种在早餐前在清晨。管理参数设计随着时间0 (gydF4y2BatgydF4y2Ba0gydF4y2Ba)。动脉氧饱和度(gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)、心率(HR)和懒散的收缩压和舒张压(分别SBP和菲律宾)是衡量一只耳朵脉搏血氧计(Biox II, Ohmeda Montreuil,法国)和一个自动血压计(Dinamap 1846 SX P Critikon Blanquefort,法国)。一个静脉血液样本收集的测量l-cit浓度和cGMP前药物浓度。然后15、30和45分钟开始输液后,在仰卧位休息(gydF4y2BatgydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2BatgydF4y2Ba30.gydF4y2Ba和gydF4y2BatgydF4y2Ba45gydF4y2Ba分别),gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba、人力资源和BP测量和血液被撤回。AMS的临床评估是由同一观察者使用路易斯湖得分的同时,血液采样。四个症状监测:头痛、肠胃难过、眩晕和无力。应对的四个项目被评为三点量表的得分为0表示没有症状,1:轻微的症状,2:中度症状,3:严重的症状。AMS得分是四项的得分的总和gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
色谱测量l-citrullinegydF4y2Ba
十毫升的血液抽样没有静脉停滞在塑料管l-cit和cGMP浓度测量含有乙二胺四乙酸(EDTA)。血液立即离心20分钟900×gydF4y2BaggydF4y2Ba在4°C。等离子小心地删除、冷冻和储存在液氮在30分钟进行后续分析。l-cit浓度测量,离子交换色谱法和茚三酮检测改编自斯洛克姆和卡明斯的技术gydF4y2Ba16gydF4y2Ba。等离子体是由降水与sulphosalicylic脱去蛋白质酸和离心机10000×gydF4y2BaggydF4y2Ba。添加上层清液是贝克曼Li-S缓冲区和注入氨基酸分析仪贝克曼6300(贝克曼仪器,Roisy、CDG、法国)校准通过分析已知浓度的校准标准。保留时间是用于氨基酸的识别和集成用于量化。gydF4y2Ba
环鸟苷酸等的测量gydF4y2Ba
没有刺激guanylyl环化酶产生cGMP,一个中间的endothelium-dependent放松血管。研究NO-cGMP通路,cGMP浓度测定免疫测定。核放射免疫检定法包cGMP的决心是改编自施泰纳的过程gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。增加灵敏度与琥珀酸酐通过succinylating样本,然后添加示踪是孵化22 h在4°C (kit beckman coulter Immunotech SA,马赛,法国)。未及环核苷酸(gydF4y2Ba如。gydF4y2BacGMP)在生物体液目前涉及到使用特定的抗体gydF4y2Ba125年gydF4y2BaI-labelled示踪剂。Femtomole水平时可以度量gydF4y2Ba125年gydF4y2BaI-labelled示踪剂和2′-O-derivatization程序使用。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
所有的数据都表示为±se。双向方差分析与重复措施进行对比海拔条件和跨时间的临床数据,gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba、心血管和血液样本数据。如果f值表示组之间的显著差异意味着,随时间变化的整体意义包括normoxia和缺氧条件评估使用配对t检验。使用最小二乘法进行线性回归。一个假定值< 0.05被认为是重要的。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
临床数据gydF4y2Ba
只有四个学科经历了AMS的症状在天文台Vallot(分数> 2)。AMS得分的变化如图1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。受试者经历的症状AMS显示略有减少AMS分数与参数注入,意思是最小的分数Arg输液结束,但没有观察到显著的相关性被发现。15分钟后的输液,AMS分数检索的基线水平,而gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba保持高。在目前的研究中,实验在早上进行,这对应于最大时期AMS白天症状gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。最常见的症状是头痛。无标题有经验的临床症状的肺或脑水肿。gydF4y2Ba
![图1. -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/18/2/286/F1.medium.gif)
动脉氧饱和度(gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)和急性高山病的分数(AMS分数;□)在精氨酸注入海平面(•)和36 h后暴露在海拔4350米(▪)。值意味着±se;n = 11。精氨酸注入(0.5 g·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在30分钟)发生在仰卧位休息15分钟后,紧随其后的是15分钟的复苏。*:p < 0.05,明显不同于输液开始后15分钟(gydF4y2BatgydF4y2Ba15gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
物理数据gydF4y2Ba
年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba下降了20±2%从海平面到4350(图。1gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。在normoxia,gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba没有修改注入参数。在缺氧,gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba倾向于减少之前和在第一个15分钟的注入参数,然后从15-45最小值增加。gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba高了3.2±0.4%的gydF4y2BatgydF4y2Ba15gydF4y2Ba来gydF4y2BatgydF4y2Ba30.gydF4y2Ba和5.3±0.3%gydF4y2BatgydF4y2Ba15gydF4y2Ba来gydF4y2BatgydF4y2Ba45gydF4y2Ba(p < 0.05)。这种增长是平行于l-cit浓度但没有发现显著相关。SBP和菲律宾保持不变,海拔4350米(表1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。在两种情况下,SBP和菲律宾没有不同注入参数。人力资源增加了25±1% (p < 0.01)从海平面到4350(表1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。人力资源在不同参数注入在这两个条件。gydF4y2Ba
收缩压(SBP)、舒张压(菲律宾)血压和心率(HR)精氨酸注入在海平面和36 h后暴露在高度4350米gydF4y2Ba
静脉血浆gydF4y2Ba
l-cit和cGMP浓度图2和图3所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba分别。基线l-cit浓度下降从33.1±1.7µM·LgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在海平面28.5±2.1µM·LgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在4350 m (p < 0.05)。在这两个条件,l-cit浓度增加时参数注入从各自的基线46.2±2.5µM·LgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在海平面和36.3±3.2µM·LgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在4350 m (p < 0.05)。此外,浓度仍高于15分钟后恢复(gydF4y2BatgydF4y2Ba45gydF4y2Ba)。因此,在海平面l-cit浓度增加了49±1%,35±2%,海拔4350米gydF4y2BatgydF4y2Ba0gydF4y2Ba来gydF4y2BatgydF4y2Ba45gydF4y2Ba(p < 0.01)。然而,在缺氧l-cit浓度仍低于normoxia值22±1%在参数注入和恢复(p < 0.05)。cGMP浓度低于海平面4350米(p < 0.05)。在normoxia cGMP浓度从2.8±0.5 nM.L增加gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在gydF4y2BatgydF4y2Ba0gydF4y2Ba4.2±0.6 nM·LgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在gydF4y2BatgydF4y2Ba45gydF4y2Ba(53±6%,p < 0.05)。此外,环鸟苷酸浓度增加l-cit浓度增加呈正相关(r = 0.96, p < 0.05)(图4所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。在缺氧cGMP的浓度保持不变参数注入和相关性不显著。gydF4y2Ba
![图2. -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/18/2/286/F2.medium.gif)
l-citrulline血浆浓度在精氨酸注入海平面(•)和36 h后暴露在海拔4350米(▪)。值意味着±se;n = 11。精氨酸注入(0.5 g·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在30分钟)发生在仰卧位休息15分钟后,紧随其后的是15分钟的复苏。*:p < 0.05;* *:p < 0.01,明显不同于基线normoxia或缺氧。gydF4y2Ba
![图3. -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/18/2/286/F3.medium.gif)
环鸟苷3′,5′一磷酸(cGMP)血浆浓度在精氨酸注入海平面(•)和36 h后暴露在海拔4350米(▪)。值意味着±se;n = 10。精氨酸注入(0.5 g·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在30分钟)发生在仰卧位休息15分钟后,紧随其后的是15分钟的复苏。*:p < 0.05。gydF4y2Ba
![图4. -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/18/2/286/F4.medium.gif)
l-citrulline之间的关系(l-cit)和环鸟苷酸(cGMP)浓度10受试者在精氨酸注入海平面(•)和36 h后暴露在海拔4350米(□)。回归方程(cGMP) = 0.09 (l-cit)−0.38, r = 0.96 (p < 0.05),海平面(cGMP)在哪里cGMP浓度和[l-cit] l-cit浓度,不存在相关性,海拔4350米。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
呈现的结果显示,36小时的暴露在海拔4350 m,降低血浆l-cit和cGMP浓度。Arg注入normoxia l-cit浓度增加和缺氧,而注入参数只在normoxia cGMP增加。此外,参数注入倾向于增加gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在高海拔没有系统性影响。gydF4y2Ba
精氨酸的可用性gydF4y2Ba
胞内参数的可用性是一个关键因素的规定没有在内皮细胞合成的速率。内皮细胞的参数内容主要来自等离子membrane-dependent运输细胞外参数,但是也可以从l-cit合成gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。块gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba表明暴露于低氧导致显著减少Arg的运输,只有伴随着减少细胞内参数内容长期接触后缺氧。苏和块gydF4y2Ba21gydF4y2Ba表明,缺氧时间依赖性抑制参数的合成l-cit肺动脉内皮细胞。这些结果表明,低氧诱导l-cit浓度降低可能不是由于内皮细胞的能力回收l-cit既然Arg-NO路径代表了主要的代谢途径,它可以假定l-cit下降是造成的缺氧对参数的影响新陈代谢。然而,没有生产与l-cit Arg的转换率,取决于心脏血流量和动静脉的区别。在急性缺氧,心脏血流量增加和l-cit浓度减少表明l-cit浓度没有生产可能不相关。虽然,缺氧导致l-cit的转换,减少细胞内参数内容增加缺氧肺动脉内皮细胞gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。因此,缺乏细胞内参数似乎并不占生产下降,除非无法进入细胞内的Arg池NOS三世在缺氧。这是特别相关的内皮因为第三号膜相关,因此,membrane-related池参数可能对酶的活性至关重要。在正常的血管,底物的量是足够的转换速度最大。然而,添加参数导致肺动脉耗尽Arg endothelium-dependent放松gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。底物管理号恢复endothelium-dependent常在低氧诱导的肺动脉高压gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba24gydF4y2Ba。患者的肺动脉高压,参数减少了肺血管阻力和肺动脉的大小常是l-cit水平相关gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。此外,虽然NOS表达调节人乳头状瘤病毒的早期发展gydF4y2Ba25gydF4y2Ba、NOS活性并不增加NOS的底物酶是否限制gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba。因此,增加l-cit和外生参数的短期氧化效应在高海拔可能是由于肺血管、增强没有生产和增加参数可用性可以促进l-cit /不合成高海拔。Arg的血管效应可能是通过没有独立机制介导博士虽然碱性溶液的影响等参数可以诱导血管舒张,Arg盐酸溶液略酸,削弱影响博士的Arg充满了葡萄糖,碳水化合物的直接影响通气/灌注比率不应排除。然而,这种影响可能是没有独立以来高血糖症并不影响endothelium-dependent vasoreactivity在人类身上gydF4y2Ba28gydF4y2Ba。另外,营养缺乏可能没有导致浓度减少l-cit在36 h(缺氧和参数可用性很低由于广泛的蛋白结合。gydF4y2Ba
通气/灌注比率gydF4y2Ba
第一道gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba证明不可能改善通气和灌注匹配,以及排泄和保留色散指数,建议改善气体交换,因为再分配的通风和血液流动。在高山肺水肿,吸入肺血流量的重新分配远离水肿的区域,提高了匹配的通风和灌注,减少alveolar-arterial氧气的区别gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba。因此,改进的gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba与参数表明,底物不可能是一个有用的辅助治疗高海拔肺动脉高压,与高山肺水肿的发病机制。或者,没有引起血管舒张支气管动脉normoxia和缺氧gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba和调节agonist-induced支气管狭窄gydF4y2Ba32gydF4y2Ba。的改善gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba可能是由于常没有对小血管的影响肺动脉从而增加灌注/通风率。然而,Arg-induced换气过度可能不会被排除。此外,受试者倾向于高山肺水肿有不兼容的肺循环由于多因子的机制,包括减少没有合成gydF4y2Ba33gydF4y2BaArg输液可以预防,至少在某种程度上,人乳头状瘤病毒的并发症。最初的下降gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba可能是由于下弯的位置在手术中,自躺平在床上提高胸腔内血容量和因此,肺动脉压力gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
Guanylyl环化酶gydF4y2Ba
在牛动脉环,损耗的组织参数与基底cGMP水平和减少损伤endothelium-dependent cGMP的形成gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。然而,基底guanylyl环化酶活性之间没有显著差异常氧和缺氧的肺gydF4y2Ba25gydF4y2Ba。cGMP,海拔4350米的减少假设参数内容较低,海拔4350米。然而,在缺氧l-cit和cGMP浓度变化之间不存在相关性,这表明cGMP代谢与海平面到36 h(暴露在高度4350米。相反,等离子体的非特异性cGMP水平的差异可以解释这些结果在缺氧。gydF4y2Ba
系统性的船gydF4y2Ba
管理参数导致的增加的浓度没有呼出的空气的浓度的增加相匹配gydF4y2Ba3gydF4y2Ba−gydF4y2Ba在等离子体gydF4y2Ba34gydF4y2Ba。Bode-BogergydF4y2Baet al。gydF4y2Ba35gydF4y2Ba显示参数在normoxia和Blitzer在健康人体内诱导血管舒张gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba36gydF4y2Ba表明NOS抑制增加系统性血管阻力和BP和减少心输出量在短期缺氧。然而,显示结果表明,参数注入没有与任何可测量的全身血液动力学的变化,表明NOS衬底的缺乏直接影响心脏和血管平滑肌的系统性血管。研究结果的差异可以解释为基线水平的SBP和菲律宾Bode-Boger (150/90gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba35gydF4y2Ba本研究和120/70)和失活的自由没有缺氧的高亲和性结合血红蛋白。此外,在Blitzer的协议gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba36gydF4y2Ba,分数的减少氧气呼吸缺氧引起的混合物和缺氧的持续时间小于当前的研究。gydF4y2Ba
结论gydF4y2Ba
在目前的研究中,精氨酸注入剂量避免全身血液动力学的影响使得对动脉氧饱和度的提高4350后通过静脉注射一氧化氮合成酶的底物用作定向代孕一氧化氮通路的变化。这种效应可能是由于变化的干扰,在流经肺循环和通风的增加一氧化氮的活动。潜在的机制来解释l-citrulline的减少4350包括:1)损伤的一氧化氮合酶活性在高海拔;2)减少一氧化氮底物的生物利用度;和3)增强l-citrulline的分解代谢。然而,在精氨酸改善注入表明,精氨酸可以保护内皮功能和消除病理组织缺氧的后果。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者感谢a老爷Dinh-Xuan编辑评论。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2000年8月18日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2001年3月26日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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