文摘
GATA-binding蛋白质的亚锌指转录因子与交互的六个成员国(GATA-1-6)叫脱氧核糖核酸(DNA)序列。这个序列中发现许多基因的监管区域,包括那些编码辅助2 (Th2)——如细胞因子、受体,粘附分子和酶,在支气管哮喘的发病机制可能是重要的。
GATA-3的表达,4和6进行外周血淋巴细胞和单核细胞和支气管活检从11个正常人和10 steroid-naive哮喘病人。
从哮喘受试者使用免疫印迹分析,t细胞表达水平的5倍GATA-3相比法线。共焦显微镜表明GATA-3表达核和细胞质。叫DNA结合复杂的包含GATA-3升高Th2细胞是由electrophorectic流动分析的转变。相比之下,单核细胞从正常和哮喘受试者表示GATA-4和6数量相等,但没有发现GATA-3。在支气管活检使用免疫组织化学,上皮细胞表达高水平的GATA-3, GATA-4和GATA-6蛋白质。比较西方滴支气管活检显示正常和哮喘受试者之间没有显著差异。
总之,在哮喘GATA-3 t细胞表达的增加可能是增强辅助2细胞因子在这个疾病。然而,一成不变的GATA-3 GATA-3表达在上皮细胞显示不同的角色在这些细胞与辅助2细胞因子的释放。最后,没有证据表明增加GATA-4的表达式和GATA-6哮喘。
这项工作是由Associazione / la Ricerca e la看台戴尔'Asma (ARCA,帕多瓦,意大利)、葛兰素(英国)皇家主管布朗普顿医院临床研究委员会和欧洲呼吸学会奖学金地铁站(g . Caramori)。188bet官网地址
哮喘的特征是慢性气道炎症,t淋巴球浸润,嗜酸性粒细胞和单核细胞/巨噬细胞,并与一些炎性蛋白的表达增加有关,包括细胞因子、酶、受体和粘附分子1。所涉及的分子途径诱导慢性细胞因子表达和招聘的航空公司和激活炎症细胞在哮喘不清楚。然而,有越来越多的认识到这些过程涉及增加炎症基因的转录,而这是由转录因子2。一些转录因子参与哮喘炎症包括核factor-κB3和激活蛋白14。
GATA转录因子家族包含锌指domain-containing蛋白质的一个家庭有六个成员(GATA-1-6)共享一个共同的脱氧核糖核酸(DNA)结合主题(a / T)叫(a / G)。微分叫家庭似乎是基因调控的控制,在一定程度上,通过表达具体叫蛋白质在不同的细胞类型和部分交互与其他转录因子(相声)。GATA-1和GATA-2蛋白质调节造血作用的发挥关键作用5。GATA-3是重要的在刺激的表达一些辅助2 (Th2)特异性细胞因子白介素(IL) 4、IL-5 IL-136,7在抑制辅助1 (Th1)细胞因子,interferon-γ8。GATA-4也被卷入的控制IL-5释放人类t细胞9。最近,GATA-4 5和6中确定nonhaematopoietic网站,包括胃肠道里的10- - - - - -13,这有一个共同的发育起源与肺。此外,GATA-5和6表达在不同的细胞类型在发展和成年小鼠肺11,13,14。GATA-6,独立或合作与甲状腺转录因子- 1,增强小鼠表面活性剂蛋白质转录14,15。此外,鼻病毒感染a - 549细胞的移植血管细胞粘附分子- 1的表达通过增加活动GATA转录因子家族的成员16。
为了确定GATA-responsive基因表达的网站,作者调查了GATA-3的表达,4和6蛋白外周静脉血液t细胞,单核细胞和正常和哮喘支气管活检的科目。
方法
病人
十个轻度到中度哮喘患者实现美国胸科学会标准哮喘17和11个年龄和sex-matched正常受试者招募(表1所示⇓)。所有哮喘患者表现出在一秒钟用力呼气量> 15%改善(FEV1)吸入200µg舒喘灵后,支气管高反应性(挑衅浓度导致FEV下降了20%1个人电脑20.醋甲胆碱< 8 mg·毫升−1)。所有哮喘患者过敏性所定义的两个或两个以上的积极的皮测试常见的过敏原。哮喘和哮喘病人所稳定没有接受吸入或口服皮质类固醇治疗≥1年,并只使用吸入β-adrenergic药物间歇性地突破的症状缓解。吸烟者或exsmokers > 5 pack-yrs FEV患者1< 75% pred被排除在外。所有正常受试者正常肺功能-皮测试常见的过敏原(除了一个主题),支气管高反应性不醋甲胆碱(电脑20.> 32毫克·毫升−1),不吸烟者。
本研究通过皇家主管布朗普顿医院伦理委员会,地铁站和所有科目给他们的知情同意。
细胞培养
主要由支气管上皮细胞获得刷牙就像前面描述的那样18。A549细胞和BEAS-2B细胞也培养如前所述19。西尼格利亚人类Th1、Th2细胞获得f (Roche-Milano、米兰、意大利),随后用于免疫印迹,逆转录酶聚合酶链反应(rt - pcr)或电泳迁移率改变分析(EMSA)分析没有刺激。这些细胞以前被证明能够选择性地生产Th1、Th2细胞因子20.。
外周静脉血液单核细胞和t细胞分离
周围静脉血(100毫升)收集(08:00-09:00 h)为60毫升无菌注射器每个包含5毫升的100% ACD(右旋葡萄糖和柠檬酸钠盐的解决方案)。单核细胞被坚持孤立的塑料如前所述21并被刮收集的井。从外周血CD3 + t细胞分离单核细胞(PBMCs)的负选择锅t细胞使用商用设备根据制造商的指示(Miltenyi研究,Bisley,英国)。锅隔离设备用于实验包含CD16抗体和CD56(表达了对人类自然杀伤(NK)细胞,但不是t细胞),这也应该移除大部分的CD3 + NK细胞22。碳碳趋化因子Receptor-5积极(CCR5 +)细胞被进一步孤立从t细胞immunomagnetic珠子,随后分析了GATA-3表达蛋白免疫印迹。
免疫印迹分析
全细胞蛋白提取从t细胞,单核细胞和支气管活检如前所述3。至少20µg·莱恩−1受到全细胞蛋白的10%或12%钠十二烷基sulphate-polyacrylamide凝胶电泳,和转移到硝基过滤器(Hybond-Enhanced化学发光(ECL) Amersham法玛西亚生物技术,Amersham,英国)印迹。过滤器被封锁在室温下1 h在Tris-buffered盐水(TBS),渐变20 0.05%,脱脂奶粉5%。过滤器被孵化与鼠标或山羊反人类的GATA-3 (HG3-35, sc - 269), GATA-4 (C-20, sc - 1237), 6 (C-20, sc - 7244)抗体(圣克鲁斯生物技术、圣克鲁斯、钙、美国)在室温下1 h在TBS,渐变20 0.05%,脱脂奶粉的稀释1:50 0 5%。这些抗体对各自特定的人类叫蛋白质,不相互交叉作用。在TBS过滤器清洗三次,0.05%渐变20 (TBS-Tween)在孵化前45分钟在室温下与antimouse或antigoat抗体结合辣根过氧化物酶(1:4,000;TBS-Tween Dako、伊利、英国)和5%的脱脂奶粉。TBS-Tween三个洗后,可视化的immunocomplexes执行使用ECL作为推荐的制造商(Amersham法玛西亚生物技术)。作为内部控制,每个过滤器reprobed以反人类的肌动蛋白抗体(圣克鲁斯生物技术)。
的乐队,在可视化∼43 kDa(肌动蛋白),49 kDa (GATA-3), 55 kDa (GATA-4)或50 kDa (GATA-6)量化使用密度计和抓住它GelWorks软件(UVP,剑桥,英国)。各个波段的光密度值GATA-3巷,4,6表示为相应的肌动蛋白光密度值比相同的车道。
电泳迁移率改变分析和supershift化验
蛋白质提取使用记者从克隆Th1、Th2细胞裂解缓冲(Promega,南安普顿,英国)根据制造商的指示。蛋白质(10µg)从每个样本在4°C preincubated 30分钟在绑定缓冲(10毫米三羟甲基氨基甲烷盐酸,液pH值7.5,1毫米MgCl20.5毫米,乙二胺tetra-acetic酸(EDTA), 0.5毫米二硫苏糖醇(德勤),50 mM生理盐水、4%甘油,0.1µg·µL−1大马哈鱼精子DNA)。双链寡核苷酸编码叫共识DNA结合序列(5′cact作业者TGATAACAG AAAGTGATAACTCT -)(圣克鲁斯生物技术)和[γ-结束标签32P]腺苷三磷酸(ATP)和T4多核苷酸激酶。每个样本然后孵化50000 cpm的标记寡核苷酸40分钟在4°C的存在与否10倍过量的未标记的寡核苷酸。Protein-DNA复合物分离6%聚丙烯酰胺凝胶使用0.25×Tris-Borate-EDTA运行缓冲。在一些实验中,50µg蛋白质Th2细胞系的孵化与5µg antiGATA-3抗体(H-48,圣克鲁斯生物技术),4 h在4°C之前添加标记双链寡核苷酸。
Fibreoptic支气管活检的支气管镜检查和处理
正常人和哮喘病人出席了支气管镜检查套件在塔利班h从午夜后禁食,用阿托品预处理(0.6毫克注射。)和咪达唑仑(5 - 10毫克注射。)。如前所述执行Fibreoptic支气管镜检查3。三个或四个支气管粘膜活检标本被从节段和下叶subsegmental航空公司的权利。支气管活检免疫组织化学是立即放置在ornithyl甲氨酰转移酶嵌入媒体,然后snap-frozen在异戊烷,与液氮预冷和存储在−70°C。支气管活检免疫印迹分析立即放置在冰和描述后进行处理。活检都冻的20分钟内集合。Five-micrometre部分被放在poly-l-lysine涂布显微镜载玻片(σ,普尔,英国),风干了30分钟然后包裹在铝箔和存储在免疫染色之前−70°C。支气管刷得到和细胞收集和存储如前所述18。
免疫组织化学为GATA-3 4和6的支气管活检
部分被固定用冷4%磷酸盐多聚甲醛溶液和洗多次与磷酸盐(PBS)。接受0.1%的部分在PBS皂素。内源性过氧化物酶活性被孵化的幻灯片在1%过氧化氢(H2O2)和PBS叠氮化钠0.02% 1 h,紧随其后的是洗在PBS。血清非特异性与阻塞标签被涂料(0.1米磷酸缓冲含有1%牛血清白蛋白(BSA)和10%正常猪血清)在室温下1 h。在PBS洗涤后,一夜之间被孵化的部分在4°C小鼠单克隆反人类的GATA-3抗体(圣克鲁斯生物技术)。或者,部分孵化了一只山羊多克隆反人类的GATA-4或GATA-6抗体(圣克鲁斯生物技术)。所有抗体都用于稀释1:10 0,与叫家族的其他成员也没有交叉作用。
消极的控制部分,正常老鼠或山羊免疫球蛋白(Dako)使用相同的蛋白质浓度主要抗体。与PBS隔夜孵化和反复洗涤步骤后,随后被孵化的部分与antimouse或antigoat生物素化的抗体(1:200稀释;在室温下Dako) 45分钟。进一步洗涤后,部分与avidin-horseradish孵化过氧化物酶(1:200稀释;在室温下Dako) 45分钟。幻灯片被孵化与chromogen-fast diaminobenzidine 5分钟,之后他们在苏木精复染色和安装在安装介质(Distrene 80,二丁基pthalate,二甲苯(DPX);BDH英国普尔)。从人类作为GATA-3积极控制,部分淋巴结。
量化
项阳性细胞是所有活组织检查部分,并根据是否存在分歧阳性细胞在气道上皮细胞或上皮下的深度175µm。只有在完整的上皮地区进行了计算。GATA-3、4和6蛋白,表达的阳性细胞数量的比例有核上皮细胞,在至少4个字段subepithelium×400放大。炎症细胞的阳性细胞的数量表示为每个字段。上皮细胞,一个字段定义为长度175µm和subepithelium字段定义为一个面积175µm2。至少有4个字段被计算为每个主题的上皮和subepithelium。一位有经验的观察者所有指控,没有意识到临床状态或部分的起源。
荧光免疫细胞化学GATA-3, 4, 6 t细胞和单核细胞中的蛋白质
t细胞(1×106·好−1)培养在24-well盘子37°C, 5%二氧化碳(有限公司2)和98%相对湿度(rH) 18 h·1毫升−1无菌罗斯威尔公园纪念研究所(RPMI) 1640(σ)添加胎牛血清(FCS)(10%)、苄青霉素(0.1 mg·毫升−1)、硫酸链霉素(0.1 mg·毫升−1)、谷酰胺。18 h后,细胞在每个被吸进1.5毫升塑胶管和微型离心机在4°C, 12000 rpm为2分钟。细胞颗粒在每个管与20µL resuspended汉克的平衡盐溶液(哈佛商学院)和用移液器吸取到一个无菌玻璃盖片内six-well板。
单核细胞(5×106·好−1)培养无菌盖玻片在每个好six-well板的37°C,在5%的股份有限公司2并在1毫升98% rH 24 h·−1无菌杜尔贝科修改鹰的介质(σ)含10% FCS,青霉素(0.1 mg·毫升−1)、硫酸链霉素(0.1 mg·毫升−1)、谷酰胺。
文化板块与t细胞或单核细胞被留在冰风干前缀90分钟和10分钟2%福尔马林/ PBS。10分钟的细胞膜被permeabilized 0.5%诺乃清洁剂P40 / PBS。非特异性结合被1 h在室温下以20%正常兔血清。洗后用PBS / 0.1% BSA,这些细胞被孵化1 h与鼠标或在室温下山羊反人类的GATA-3, 4, 6抗体(稀释1:10 0;圣克鲁斯生物技术)在PBS / 0.1% BSA。负控制,各自主要抗体没有补充道。与PBS / 0.1% BSA洗涤三次后,这些细胞被孵化与兔子antimouse 45分钟在室温(或antigoat)生物素化的二次抗体(稀释1:10 0;Dako)。与PBS / 0.1% BSA进一步洗涤后,这些细胞被孵化45分钟在室温下与链霉亲和素共轭FITC(稀释1:10 0;Dako)。 Finally, the cells were counterstained in haematoxylin and the cover glass mounted using citifluor and sealed with mounting medium (DPX; BDH). Slides were viewed using epifluorescence and confocal microscopy. Confocal scanning laser microscopy images were obtained with a Leica confocal microscope (Leica Microsystems, Milton Keynes, UK), equipped with a 488/514 nm dual band argon ion laser. An oil-immersion objective was used. Images were collected using a Leica confocal software analysis package (TCS-NT).
核糖核酸提取和反向transcriptase-polymerase GATA-3连锁反应
总核糖核酸(RNA)使用试剂盒提取核糖核酸(核糖核酸酶)后容易萃取设备制造商的指示(试剂盒,克劳利,英国)。rt - pcr进行如前所述23。引物对GATA-3 TCCAAGACGTCCATCCACCAC CGTGCCATCTCGCCGCCACAGT,给243个碱基对(bp)的产物。在Techne PCR进行多井thermocycler (Techne,剑桥,英国)在94°C的最初的1分钟,其次是34个周期94°C的变性30年代,退火30年代,在62°C和扩展30年代的72°C。最后扩展为5分钟在72°C(44为上皮细胞周期)。周期的数量确定后选择产品放大曲线的线性相位的连续采样周期越来越多的放大。产品的2%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色然后可视化拍照使用紫外发光。
统计分析
数据意味着±sem。区别正常与哮喘受试者评估Mann-Whitney紫外线测试,和一个值p < 0.05的统计学意义。
结果
淋巴细胞)
在t细胞的数量没有明显差异(27.9×106±13.4×106与26.3×106±10.5×106细胞;n = 10)或PBMCs (190.5×106±67.3×106与164.9×106±42.6×106细胞;n = 10)隔绝120毫升的外周静脉血液从正常和轻中度哮喘病人steroid-naive稳定。
免疫印迹分析孤立CD3 + t细胞从steroid-naive哮喘受试者显示GATA-3的五倍高表达,而正常的受试者(0.86±0.21与0.17±0.06;n = 8, p < 0.05)(图。1⇓)建议增加数量的Th2细胞的存在。共焦显微镜表明GATA-3存在于细胞质和细胞核的CD3 + t细胞与正常和轻度或中度steroid-naive哮喘受试者(图1 b和C⇓)。细胞的数量表达核GATA-3没有两个学科组之间的不同。作者无法检测GATA-4和GATA-6在t细胞通过免疫印迹或免疫细胞化学(数据没有显示)。使用趋化因子受体CCR5作为Th1细胞的标记24,GATA-3 CCR5 +和CCR5的表达,细胞从新鲜分离孤立的人类t细胞检查。(GATA-3明显升高在CCR5) - Th2-like细胞与CCR5 + (Th1-like)细胞(图。2⇓)。免疫印迹证实Th2细胞系中含有比Th1 GATA-3细胞系(图2 b⇓)和emsa证实GATA-3可以结合DNA(图2摄氏度⇓)。叫使用多余的未标记的寡核苷酸,它表明,减速带是特定的,和supershift实验antiGATA-3抗体显示包含GATA-3这个乐队。
GATA-3蛋白表达在正常和哮喘受试者的t细胞。在t细胞)显示了GATA-3表达式隔绝哮喘与正常人相比。这些结果的图示说明增加GATA-3在t细胞/肌动蛋白比哮喘受试者如下所示。结果表示为均值±sem每组的8个主题。*:p < 0.05。b)共焦显微镜GATA-3本地化的t细胞从正常获得主题表明GATA-3局部细胞质和细胞核。c) t细胞从steroid-naive获得mild-asthmatic病人显示GATA-3群GATA-3阳性细胞染色这项工作。(内部比例尺大小= 10µm)。
)免疫印迹分析GATA-3表达式在新鲜分离人类碳碳趋化因子Receptor-5积极(CCR5 +)(辅助1 (Th1))和碳碳趋化因子Receptor-5负(CCR5)(辅助2 (Th2)) t细胞。b)免疫印迹分析显示增加表达人类Th2 GATA-3细胞系相比,Th1细胞线。c)总细胞蛋白质的电泳迁移率改变分析(10µg)提取人类Th1、Th2细胞线。证实了特异性减少过剩的预培养绑定的未标记的探针(XS-cold)。孵化的Th2蛋白5µg antiGATA-3抗体(αGATA-3 Ab)导致supershifting迟钝的乐队。未标记的探针是底部的凝胶。数字是代表三个实验。
单核细胞
用免疫印迹分析单核细胞,观察GATA-4和GATA-6蛋白质的存在,在正常人和哮喘病人(数据没有显示)。没有区别GATA-4和GATA-6蛋白质的表达两组之间的学科。人类单核细胞不表达GATA-3蛋白质(数据未显示)。这证实了免疫细胞化学,这说明存在GATA-4和GATA-6表达在正常和哮喘受试者(数据没有显示)。没有差别的表达式或本地化GATA-4或GATA-6组。共焦显微镜表明GATA-4蛋白染色主要局部细胞质(数据未显示)。
支气管活检
哮喘受试者活检显示增加染色强度为主要碱性蛋白(MBP)和CD3,与正常人相比。免疫组织化学染色(图3所示⇓)显示,大多数的细胞染色GATA-3支气管上皮细胞蛋白质,正常受试者和哮喘病人。然而,也有一些GATA-3阳性细胞固有层在正常和哮喘病人(图3所示⇓)。免疫印迹分析表明没有显著差异的表达GATA-3蛋白在正常人与哮喘病人支气管活检(0.44±0.092;n = 6,与0.52±0.09;n = 8)(图3所示⇓)。与之前的研究没有发现上皮细胞GATA-3信使核糖核酸(mRNA)25GATA-3蛋白质的,高水平的表达在支气管上皮细胞活检标本检测。因此,GATA-3 mRNA表达在人类支气管上皮细胞主要是使用rt - pcr检测。人类支气管上皮细胞的主要文化,随着人工培养的肺上皮细胞系(A549 BEAS-2BE),发现表达GATA-3 mRNA(图3所示⇓)。人类Th2细胞系作为积极的控制。
免疫组织化学和免疫印迹分析GATA蛋白表达在正常和哮喘支气管粘膜活检。上部面板显示GATA-3蛋白免疫组织化学染色正常的支气管粘膜活检(a)和哮喘(b)科目。箭头表示GATA-3积极浸润细胞。4和6 c) GATA-3的表达,蛋白质和肌动蛋白免疫印迹分析三个正常和三个哮喘支气管活检的科目。d)逆转录酶聚合酶链反应(rt - pcr)分析GATA-3信使核糖核酸(mRNA)表达在初级人类支气管上皮细胞(PHBEC)。特定的GATA-3 PCR产品中检测出PHBEC后44 PCR的周期。积极控制,GATA-3 mRNA表达人类辅助检测2 (Th2)细胞系,BEAS-2BE细胞和A549细胞后34 PCR的周期。结果是代表三个独立的实验。英国石油公司:碱基对。
免疫组织化学分析还表明,大部分的细胞染色GATA-4和GATA-6蛋白质支气管上皮细胞,在正常人和哮喘病人(数据没有显示)。然而,有一些GATA-4 GATA-6阳性细胞,代表主要是单核细胞/巨噬细胞固有层在正常人和哮喘病人。用免疫印迹分析,没有显著区别正常表达的主题和哮喘病人GATA-4 (2.5±0.5;n = 6,与2.1±0.6;n = 7)或GATA-6 (2.2±0.8;n = 6与1.9±0.3;n = 7)在支气管活检(图3所示⇑)。
讨论
没有发现显著差异PBMCs或t细胞数量的外周静脉血液的正常受试者和steroid-naive稳定的哮喘病人。这些t细胞表达GATA-3蛋白质,但不GATA-4或者GATA-6,既增加了在t细胞表达哮喘病人与正常人相比,Th2 GATA-3 DNA结合的增加与Th1细胞。这是在协议与以前的研究结果显示增加GATA-3 mRNA的表达在过敏性哮喘患者的支气管活检。在这项研究中,绝大多数(∼60 - 90%)GATA-3 mRNA表达细胞在哮喘气道CD3 + t细胞25。这可能反映了Th2细胞数量的增加,然而GATA-3表达CD3 + NK细胞的可能性,虽然不太可能,不能打折。
与先前的研究25,目前的研究发现,主要的细胞表达GATA-3支气管上皮细胞的正常受试者和哮喘病人。的能力来检测GATA-3蛋白质和mRNA在支气管上皮细胞可能是由于使用不同的技术(原位与信使rna PCR)。通常有一个好的相关性信使rna的存在证明了原位杂交和本地化的蛋白质。然而,有一些例子原位杂交没能证明特定的信使rna的存在对于一个给定的蛋白质,但随后蛋白质的存在是证明使用更敏感的技术,比如rt - pcr。例如,使用原位杂交哈米德et al。26无法证明IL-5信使rna的存在。然而最近的一项研究使用rt - pcr和免疫染色显示支气管上皮细胞持续表达IL-5信使rna和蛋白质27。这里给出的结果的基础上,作者假设GATA-3可能发挥重要作用在调节Th2-like细胞因子的生产在人类t细胞在哮喘,但GATA-3并不扮演重要的角色在这些基因的调节支气管上皮细胞。
有趣的是,在正常的主题和哮喘病人,t细胞不表达GATA-4和GATA-6蛋白质,而支气管上皮细胞表达GATA-3, 4和6的蛋白质。这表明微分GATA家族基因调控的可能是控制部分通过特异性的表达特定的叫蛋白质或与其他特异性相互作用的蛋白质。因此,GATA-3发现中扮演重要角色的分化Th2细胞与其他转录因子,如核转录因子的激活t细胞c / B28,c-Maf29日和STAT-630.。
单核细胞和支气管上皮细胞从正常和哮喘受试者表示等量的GATA-4 GATA-6蛋白质。这些细胞生产介质如粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm - csf),监管序列包含GATA-binding eotaxin-1和il - 10的网站。这表明,尽管GATA-4和GATA-6蛋白质可能是重要的在这些细胞,调节炎症基因表达他们不占这些介质在哮喘的微分表达式。同样地,尽管GATA-6平滑肌增殖的控制非常重要31日代理通过p21蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(p21CIP),这不是人类支气管上皮细胞的情况。
总之,t细胞与哮喘病人更多的GATA-3蛋白质表达与正常人相比,可能由于Th2细胞数量增加。相比之下,单核细胞不表达GATA-3,但表示GATA-4和GATA-6蛋白质。之间没有显著差异表达正常受试者和哮喘病人。支气管上皮细胞表达GATA-3, GATA-4 GATA-6蛋白质同样在正常受试者和哮喘病人。在哮喘GATA-3 t细胞表达的增加,但不是在支气管上皮细胞,包括增强Th2-like哮喘病人的t细胞中观察到的细胞因子。没有证据表明GATA-4表达的增加和GATA-6哮喘患者的气道。
GATA-3可能发挥重要的作用在调节辅助2细胞因子在t细胞在哮喘,但不是在上皮细胞。还需要进一步的研究来描述完全的角色叫蛋白质基因表达的调控t细胞,单核细胞和支气管上皮细胞在哮喘的发病机制及其可能的作用。目前,糖皮质激素的能力目标GATA-3行动是未知的;这可能确定GATA-3活动的抑制可能是糖皮质激素的抗炎性质32。
确认
作者感谢mc。Labastie,有用的和刺激的讨论和建议,西尼格利亚和f .请提供人类Th1、Th2细胞线。
- 收到了5月4日,2000年。
- 接受2001年4月25日。
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