摘要gydF4y2Ba
环孢素(Cs)A吸入肺受到其疏水性的限制。为了改善CsA的溶解性,研究了环糊精(CD)在干粉吸入剂形成中的适用性,以及吸入CsA/CD复合物的好处gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba是证明。gydF4y2Ba
采用高效液相色谱法测定了CDs对CsA的增溶作用。通过测定纤毛抑制活性和溶血来评估CDs的一些安全性。吸入CsA/CD复合物的疗效通过嗜酸性粒细胞浸润到主动致敏小鼠的支气管肺泡灌洗液中来评估。gydF4y2Ba
CDs明显改善了CsA的低溶解度。麦芽糖基α - CD的纤毛抑制和溶血活性在所有供试CD中最弱。单纯吸入CsA对变应原诱导的嗜酸性粒细胞增多有抑制作用。吸入含麦芽糖基- α - CD的CsA复合物(CsA的剂量大约是单独吸入CsA的9倍)也显著抑制了嗜酸性粒细胞的积累,与单独CsA相比,作用持续时间更长。gydF4y2Ba
因此,环孢素A的有效剂量可以通过与麦芽糖基- α -环糊精复合物的形成来降低,而吸入环孢素A作为麦芽糖基- α -环糊精复合物可以获得更大的治疗安全界限。gydF4y2Ba
环孢素(Cs)A已被证明对慢性重度激素依赖性哮喘患者具有临床益处gydF4y2Ba1gydF4y2Ba. 然而,由于全身副作用的存在,哮喘患者口服CsA治疗受到限制gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。为了避免这种风险,研究人员对动物的肺直接注射CsAgydF4y2Ba2gydF4y2Ba。一般来说,CsA的液体配方的雾化用于CsA的吸入gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba。用于输送到肺的CsA气溶胶的液体配方是含有有机溶剂和表面活性剂的药物溶液,如乙醇、聚乙二醇、丙二醇或cremoophor ELgydF4y2Ba3.gydF4y2Ba。虽然含乙醇和蓖麻油的雾化CsA静脉应用溶液能够减弱嗜酸性粒细胞和淋巴细胞对气道腔的浸润,但支气管肺泡灌洗液(BAL)中的中性粒细胞是由商业产品成分的刺激性特性引起的。如蓖麻油或乙醇在卵清蛋白(OA)致敏大鼠中的作用gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。因此,CsA气溶胶的液体配方由于其局部刺激性的效力而受到限制。gydF4y2Ba
微粉干粉是另一种潜在的药物形式,用于直接给肺的化合物。研究表明,在豚鼠哮喘模型中,吸入CsA干粉可有效抑制嗜酸性粒细胞增多gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。然而,由于CsA干粉的疏水性,其直接接触肺部的能力受到限制。任何输送到肺的药物都应该是亲水的,在粘膜层溶解,亲脂的,通过细胞膜吸收。为了增加CsA在含水黏液层的吸收,有必要提高CsA在水中的溶解度。环糊精(CDs)以亲脂药物为客体分子形成包合物,从而提高其水溶性。此外,CDs的重要特征是它们在溶液和固体中都能形成包合物gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。有报道表明,通过与CD形成配合物,CsA的药物性能得到了改善;α‐CD提高CsA在眼科溶液中的溶解度gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,二甲基(DM)-α-CD与CsA形成复合物,改善大鼠对CsA的口服吸收gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,且CsA与DM‐β‐CD复合物可增加溶解性gydF4y2Ba8gydF4y2Ba和CsA在胃肠道的溶出率gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。关于CD作为药物载体在气溶胶中的应用有两篇报道gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。因此,假设CD作为载体剂,通过水环境将CsA转运到膜的亲脂吸收位点。此外,与单纯吸入CsA相比,吸入CsA/CD复合物可减少抑制炎症细胞积聚所需的有效剂量。因此,CsA/CD复合物有望有更广泛的治疗边界。此外,CDs的毒性也值得关注。gydF4y2Ba
本研究对4种CDs进行了干粉吸入的适宜性评价。为了确定CsA/CD复合物的平喘作用,我们通过吸入致oa致敏小鼠气道中变应原诱导的嗜酸性粒细胞积累来评估CsA/CD复合物的平喘作用。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
化学物质gydF4y2Ba
CsA来自诺华公司(瑞士巴塞尔)。α-CD和DM-β-CD均来自日本株式会社(日本东京)。葡萄糖基-α-CD(G1-α-CD)和麦芽糖基-α-CD(G2-α-CD)来自横滨生物研究公司(日本横滨)。OA(五级)来自西格玛(美国密苏里州圣路易斯)。灭活gydF4y2Ba博代氏杆菌属gydF4y2Ba百日咳gydF4y2Ba疫苗来自Wako Pure Chemicals(日本大阪)。Intal®来自Fujisawa制药(大阪,日本)。gydF4y2Ba
用于药理学研究的微粉化干粉制备如下。将CsA、G2-α-CD和这些化合物的混合物揉捏3分钟 h,逐渐加入纯化水。将捏合样品干燥24小时 h在减压条件下,然后初步干燥2小时 h在40°C下。为了制备微粉化干粉,样品通过气流粉碎机(日本兵库Powrex公司)粉碎,并在减压下进一步干燥。产品粒度为:CsA微粉化干粉(批号971205)2.47 µm,微粉化CsA/G2-α-CD复合物干粉(批号980728)3.15 μm,以及G2-α-CD(批号980820)2.76的微粉化干粉 µm。使用粒度分析仪(Aerosizer;美国马萨诸塞州波士顿API)测量这些粒度。gydF4y2Ba
动物gydF4y2Ba
用牛蛙(埼玉-直kenn- dohbutu,日本埼玉)作为纤毛的来源。BAL评估:BALB/c雄性小鼠(22-31 g体重;查尔斯河,东京,日本)。老鼠被喂食水和食物gydF4y2Ba随意gydF4y2Ba。所有动物实验均由诺华制药K.K. Tsukuba研究所动物实验伦理委员会批准,并按照日本实验动物科学协会1987年批准的动物实验指南进行。gydF4y2Ba
环孢素A的溶解能力gydF4y2Ba
为了评价CDs的溶解能力,将剩余的CsA添加到各种CDs的饱和溶液中。根据初步观察,在分离实验中测量了CDs在20℃水中的饱和点,α‐CD的浓度为10% (w/v), DM‐β‐CD的浓度为57% (w/v), G1‐α‐CD和G2‐α‐CD的浓度为40% (w/v)。将CsA与CDs的混合溶液在20℃下搅拌孵育3 h,采用高效液相色谱法(HPLC)紫外(UV)检测(LC6A体系;日本岛津公司、日本京都)。HPLC检测条件为:检测器紫外波长214 nm;色谱柱LiChospher 100, RP‐8(e) (Merck, Darmstadt,德国),加热70°C;流动相乙腈/水/甲醇/磷酸=12/7/1/0.001 (v/v);流速2.0 mL·mingydF4y2Ba−1gydF4y2Ba; 和注射量20 微升。gydF4y2Ba
纤毛静电电位的测定gydF4y2Ba
为了评估对粘膜的安全性,观察纤毛抑制电位。从青蛙上颚分离出纤毛标本。该制剂保持了蛙腭粘膜纤毛上皮的功能完整,但足够薄以使光线得以透射。将分离的纤毛灌注0.6% (w/v) NaCl溶液(青蛙的生理盐水),以及CDs、Intal®和CsA与G2‐α‐CD包合物的每种溶液。所有的化学物质都溶解在蒸馏水里。为了评估CDs单独的纤毛抑制作用,将所有CDs的浓度调整到10%作为α‐CD的饱和浓度。比较了实验配方CsA/G2‐α‐CD复合物与Intal®对纤毛运动的安全性。在本实验中,使用了5%的Intal®和G2‐α‐CD溶液,因为10% Intal®溶液的粘度相对较高(11.02 mPa×s),由旋转粘度计(模型RB-100L;Tohki Sangyo,东京,日本)。当浓度为5%时,所有样品的黏度在1.10 ~ 1.13 mPa×s范围内。 The duration of ciliary beat movement was measured microscopically for a maximum of 60 min. The osmotic pressure of each sample solution was measured by an osmometer (model 3MO; Advance Instruments, Tokyo, Japan).
环糊精的溶血性质gydF4y2Ba
通过检测溶血特性来评估CDs的细胞毒性。用pH为7.4的磷酸盐缓冲盐水(PBS)溶解CDs作为样品溶液。混合兔血(Oriental Bio-Service, Tsukuba, Japan)用PBS稀释至1% (v/v)作为0%的溶血,用不同浓度的CDs样品溶液和1%的磷酸盐缓冲氯化钠溶液作为100%的溶血。所有溶液在37℃下孵育30分钟。孵育后,取样管1500×离心gydF4y2BaggydF4y2Ba室温下静置5分钟。将上清转移到立方体中,用紫外分光光度计在540 nm处测量血红蛋白的吸光度。溶血程度的计算是由1%的磷酸盐缓冲氯化钠溶液从总释放的血红蛋白的百分比。gydF4y2Ba
敏化作用过程gydF4y2Ba
小鼠用10µg OA与5 mg Al(OH)混合。gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba以及10亿个失活的微生物gydF4y2Ba博代氏杆菌属gydF4y2Ba百日咳gydF4y2Ba第1天皮下注射疫苗0.5 mL生理盐水。第14天重复此程序作为助推器。第21天,将动物置于鼻腔吸入室(Shibata,东京,日本)并暴露于10 mg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba1人OA HgydF4y2Ba
药品管理局gydF4y2Ba
动物被关在一个只有鼻子的吸入室中,并暴露于微细的G2‐α‐CD,微细的CsA,或微细的CsA/G2‐α‐CD复合物(含49.7%的CsA)中,并使用粉尘喂食器(Shibata)。初步检查了单独吸入CsA的几个暴露时间。CsA吸入60 min(1116.7±5.9µg·kg)时对气道嗜酸性粒细胞内流有明显抑制作用gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba但在暴露时间较短的情况下,gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba(186.0±0.7)µg·kggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(557.8±3.0 g·kg)gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在气道中),嗜酸性粒细胞流入未被抑制(数据未显示)。相反,CsA/G2‐α‐CD预期在低得多的浓度下有效,在使用大鼠的单独研究中,它的有效性约为仅吸入CsA的10倍(数据未显示)。因此,在此基础上,为控制全身吸入各微粉干粉产品的暴露时间设置如下:CsA 60min, CsA/G2‐α‐CD复合物和G2‐α‐CD 10min。这种干粉吸入在第21天OA挑战前1、3、6、12、18或24小时终止。对每种试验化合物分别进行试验。gydF4y2Ba
测定室内化合物的浓度gydF4y2Ba
从室中吸入空气(20 L·min)gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)使用空气采样器(LD-20;Shibata)通过纸过滤器。在吸入规定体积的气溶胶之前和之后对过滤器进行称重,并根据这些重量测量值计算室内化合物的浓度。gydF4y2Ba
动物体内药物浓度的估计gydF4y2Ba
根据下列公式估算化合物的全身吸入剂量:gydF4y2Ba
式中D为化合物暴露时间,F为可吸入颗粒物比例(≤5.4µm), W为动物体重,RMV为分体积速率,等于1分钟内吸入空气的体积(4.19×W (g))gydF4y2Ba0.66gydF4y2Ba/ 1000)。gydF4y2Ba
RMV的值是根据McMahon的报告计算的gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。肺部吸入化合物的量假定为估计全身剂量的5%gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
评估燃烧室中化合物的粒径gydF4y2Ba
通过泵(2)从动物室吸入空气 L·mingydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),并直接进入粒度分析仪(气溶胶粒度仪;API)。几何粒径值在整个研究中使用。吸入剂量采用≤5.4 μ m颗粒大小的总体,如上式中的“F值”。gydF4y2Ba
支气管肺泡灌洗gydF4y2Ba
在过敏源挑战48小时后,通过腹腔注射过量的戊巴比妥(Dinabbott,东京,日本)处死动物。当呼吸作用不再明显时,将气管暴露并插管。用三份等量(1 mL)的钙清洗肺组织gydF4y2Ba2+gydF4y2Ba- - - MggydF4y2Ba2+gydF4y2Ba自由汉克平衡盐溶液(HBSS;Gibco Life Technologies Ltd,佩斯利,英国)含有10毫米乙胺四乙酸(关东,日本)和1毫米gydF4y2BaNgydF4y2Ba2 hydroxyethylpiperazine应承担的检测gydF4y2BaNgydF4y2Ba‐2‐乙烷磺酸(HEPES)缓冲液(Gibco Life Technologies Ltd), pH调整为7.4(改良HBSS), 37℃加热。三次洗涤后的液体回收率超过>90%。离心灌洗液(200×)gydF4y2BaggydF4y2Ba将细胞颗粒重悬于0.5 mL改良HBSS中,使用细胞计数器(F‐300;Toa,日本东京)。为了区分细胞类型,用细胞离心机(Cytospin 3;Shandon,道,英国)。涂片用May-Grünwald和Giemsa染色液(diffi - quick;日本大阪,Midorijuji)。每个涂片在光镜下至少计数500个细胞。每个细胞群的比例表示为总细胞的百分比,该比例与总细胞计数一起用于计算每种细胞类型的数量。gydF4y2Ba
数据分析gydF4y2Ba
所有数据均表示为平均值±sem。采用非配对t检验评估未处理的无oa组与未处理的oa组之间差异的统计学意义。当通过F检验比较方差观察到显著差异时,使用未配对t检验与韦尔奇校正。在单因素方差分析后,使用Bonferroni的多重比较试验评估对照组和药物处理组在oa挑战小鼠中的统计学差异;A <0.05被认为是显著的。gydF4y2Ba
后果gydF4y2Ba
溶解度gydF4y2Ba
通过与CDs形成配合物,提高了CsA的溶解度。在α‐CD、DM‐β CD、G1‐α‐CD和G2‐α‐CD存在时,CsA的溶解度分别增加了约40、570、130和80倍(表1)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
环糊精(CD)存在下环孢菌素(Cs)A的溶解度gydF4y2Ba
环糊精的抑纤毛和溶血潜能gydF4y2Ba
摘要蛙腭作为研究呼吸道粘液纤毛器官特性的模型已被广泛应用gydF4y2Ba14gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba17gydF4y2Ba因此,为了评估CDs的纤毛抑制作用,确定了CDs对离体青蛙上腭纤毛搏动的影响。纤毛抑制电位的增加程度取决于CDs的种类,在浓度为10%时,顺序为G2-α-CD
环糊精(CDs)的纤毛抑制电位:环孢素(Cs) a饱和CD溶液和Intal®溶液对青蛙上颚分离制剂纤毛跳动的影响gydF4y2Ba
还评估了CDs的溶血潜能。当浓度达到2%时,G2‐α‐CD不会增强溶血。相反,α‐CD、DM‐β‐CD和G1‐α‐CD以浓度依赖的方式显著增加溶血(图1)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
![图1. -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/22/2/213/F1.medium.gif)
α‐环糊精的溶血潜力(CD;▴),glucosyl高αCD(▾)应承担maltosyl量α的CD(♦)和二甲基β检测CD(•)。gydF4y2Ba
这些数据表明,基于溶解性、纤毛抑制和溶血特性,G2‐α‐CD是最有希望的候选药物。评估的安全属性实验配方CsA / G2αCD应承担的复杂,其纤毛运动,CsA-saturated G2的ciliostatic效应量αCD应承担的解决方案相比,在5%的浓度,与G2的溶液量α检测CD单独或色甘酸钠胶囊®的内容,这是一种干粉吸入产品在日本市场上。当这三种溶液灌注时,纤毛搏动的持续时间相似(表2)gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)因此,可以认为CsA饱和的G2-α-CD和G2-α-CD的纤毛抑制特性与Intal Capsule®相当。gydF4y2Ba
接触过敏原后炎症细胞流入呼吸道gydF4y2Ba
根据上述方法计算小鼠吸入微粉产品的暴露剂量。根据计算,吸入CsA和CsA/G2-α-CD复合物后主动致敏小鼠气道中的CsA剂量估计为1325.5±21.7 微克·千克gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba和153.9±2.3µg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(表3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
在主动致敏小鼠气道中吸入CsA单独和CsA/麦芽糖- α -环糊精(G2 - α - CD)复合物后吸入微粉干粉产品的暴露剂量和环孢素(Cs)A的估计剂量gydF4y2Ba
单独吸入CsA显著抑制了变应原诱导的嗜酸性粒细胞以时间依赖性的方式流入主动致敏小鼠气道(图2)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
![图2. -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/22/2/213/F2.medium.gif)
吸入环孢素(Cs)A(1325.5µg·kg)时程效应gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba致敏小鼠气道内的变应原诱导的嗜酸性粒细胞(n= 6-8)。BALF:支气管肺泡灌洗液。卵清蛋白(OA)注射量为10 mg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。*:与未处理的oa刺激组相比,p<0.05(效果值);**:与未治疗无OA组(no OA)相比,p<0.01。gydF4y2Ba
在暴露过敏原前18和24 h单独使用CsA,其疗效消失。因此,在该模型中,CsA单独吸入对过敏原诱导的嗜酸性粒细胞内流起作用的时间为1-3 h,作用时间小于18 h。吸入CsA/G2‐α‐CD复合物,其中气道中CsA的剂量约为单独CsA的9倍(表3)gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba),对嗜酸性粒细胞流入气道也有明显影响(图3)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
吸入环孢素(Cs)A/麦芽糖基- α -环糊精(G2 - α - CD)复合物(309.7µg·kg)的时间-过程效应gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba航空公司;153.9µg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba致敏小鼠气道内的变应原诱导的嗜酸性粒细胞(n= 9-10)卵清蛋白(OA)注射量为10 mg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。*:与未接受治疗的无oa挑战组相比,p<0.05(▪);gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:与未处理的oa刺激组相比,p<0.05(效果值)。gydF4y2Ba
在过敏原暴露前12和18小时吸入CsA/G2‐α‐CD复合物可显著抑制嗜酸性粒细胞内流。CsA/G2‐α‐CD复合物的作用开始比单独CsA稍慢(图3)gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba).与单纯吸入CsA相比,吸入CsA/G2‐α‐CD复合物18 h后仍具有显著的抑制活性。CsA单独或CsA/G2‐α‐CD对气道中的其他炎症细胞均无显著影响(表4和5)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).此外,单独吸入G2‐α‐CD对嗜酸性粒细胞流入气道没有任何显著影响。虽然单独吸入G2‐α‐CD更倾向于增加进入气道的炎症细胞数量,但这些变化在统计计算中并不显著(表6)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
主动致敏小鼠吸入环孢素A后气道炎症细胞浸润gydF4y2Ba
主动致敏小鼠呼吸道吸入环孢菌素(Cs)A/麦芽糖基-α-环糊精(G2-α-CD)后的炎症细胞浸润gydF4y2Ba
主动致敏小鼠气道中单独吸入麦芽糖基‐α‐环糊精(G2‐α‐CD)后炎症细胞浸润gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
由于CsA在水溶液中的溶解度低,分子量大,口服生物利用度低。在本研究中,通过与α‐CD、DM‐β‐CD、G1‐α‐CD和G2‐α‐CD形成包合物,CsA的溶解度显著提高。在474 mM DM‐β‐CD存在时,CsA的溶解度增加了570倍。DM‐β‐CD已被广泛用于改善CsA的药物特性gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba及其他药物gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。与无CD时相比,鼻内应用含有DM‐β‐CD的胰岛素包合物大大提高了大鼠血清胰岛素浓度,并且提高了溶出率,从而提高了复合胰岛素的生物学疗效gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。然而,在该报告中,DM‐β‐CD引起适度的纤毛抑制作用。纤毛在呼吸道中的作用对于抵御外来物质的自然防御机制是非常重要的。吸入的药物要么被血液吸收,要么通过纤毛排出肺部,纤毛不断地将黏液向上扫入喉咙。在寻找和设计有效、安全的CsA吸入药物配方时,其溶解作用和纤毛抑制作用可能是关键问题。当吸入的CsA由于从肺腔中缓慢消除而积聚在肺中时,经常使用可能会引起不良反应。gydF4y2Ba
在本研究中,DM‐β‐CD是所有检测的CDs中CsA的最佳溶解剂,但它具有严重的纤毛抑制潜力。与本研究中检测的其他CD相比,G2‐α‐CD表现出相对较弱的纤毛抑制。对药物载体最重要的要求之一是它们没有或可接受的低水平的内在细胞毒性。分离的红细胞没有细胞核、线粒体、内质网或其他细胞器,根据细胞毒性对CDs进行分类可能是一种简单可靠的方法,因为CDs与细胞膜的相互作用肯定是细胞损伤的第一步。据报道,天然CDs的溶血活性顺序为β‐CD>α‐CD>γ‐CD>δ‐CDgydF4y2Ba21gydF4y2Ba。在目前的兔血混合研究中,α‐CD显示出与之前报道的相同浓度范围的溶血活性gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。在实验条件下,G2‐α‐CD表现出较低的溶血活性。此外,小野gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba22gydF4y2Ba有研究表明,G2‐α‐CD对Caco‐2单层细胞具有较低的细胞毒性和较低的干扰能力。在作者的急性口服毒性研究中,G2‐α‐CD对大鼠的急性致死剂量被证明为> 2000 mg·kggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(数据没有显示)。因此,考虑到CsA的安全特性,包括较弱的纤毛抑制和较低的细胞毒性,以及对CsA的溶解能力,G2‐α‐CD是CsA在吸入药物中很好的载体候选。此外,单独G2‐α‐CD和CsA与G2‐α‐CD复合物的纤毛抑制潜力与市售干粉产品fintal Capsule®相当。因此,CsA/G2‐α‐CD被选择为最适合用于CsA的微粉干粉吸入的复杂配方。gydF4y2Ba
气道中嗜酸性粒细胞数量的增加是哮喘的一个特征gydF4y2Ba4gydF4y2Ba嗜酸性粒细胞被认为通过释放包括有毒蛋白在内的多种介质在哮喘发病机制中发挥重要作用gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。虽然嗜酸性粒细胞积累的确切机制尚不清楚,但淋巴细胞,特别是释放白介素- 4和- 5的T辅助细胞被认为是关键效应细胞gydF4y2Ba24gydF4y2Ba。CsA可抑制大鼠气道嗜酸性粒细胞的积聚gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,因为豚鼠gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。在本研究中,CsA单独和CsA/G2‐α‐CD复合物对过敏原诱导的嗜酸性粒细胞流入主动致敏小鼠气道表现出强有力的抑制作用。单独的CsA以剂量依赖的方式抑制嗜酸性粒细胞流入小鼠气道,本研究中使用的CsA最大限度地防止了这一情况(数据未显示)。相反,在使用大鼠哮喘模型的分离研究中,CsA/G2‐α‐CD对气道炎症的疗效比单独CsA高出10倍(数据未显示)。确实,CsA/G2‐α‐CD复合物中所含CsA的吸入剂量约为单独CsA的9倍。从这个角度来看,为了观察单独吸入CsA对气道炎症的同样作用,可以通过与G2‐α‐CD形成包合物来减少CsA的剂量。通过这种方法,可以降低CsA的毒性作用。gydF4y2Ba
为了确定G2‐α‐CD是否对过敏原诱导的气道炎症有任何影响,我们也检测了单独吸入G2‐α‐CD的影响。单独的G2‐α‐CD的估计吸入剂量大约是CsA/G2‐α‐CD复合物中所含G2‐α‐CD的两倍。单独吸入G2‐α‐CD对气道炎症细胞积聚没有任何影响。然而,应该注意的是,吸入G2‐α‐CD可能对炎症细胞内流有不良影响,因为嗜酸性粒细胞的数量倾向于增加。需要进一步的研究来确定G2‐α‐CD对人体干粉吸入的局部刺激潜力的适用性。品牌gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba有研究表明β‐CDs在兔气管内灌注后可被吸收。虽然作者在吸入CsA/G2‐α‐CD复合物后没有观察到CsA和G2‐α‐CD的药代动力学,但如果G2‐α‐CD能够被吸收到循环中,则应该考虑在人体内诱导抗体反应。gydF4y2Ba
低水溶性药物从其CD复合物中吸收的速率和程度可以通过调整各种因素来优化,这些因素在配方和复合物施用的生物期中都会影响复合物的解离平衡gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。只有药物的自由形式与药物在溶液中的复杂形式保持平衡,才能穿透由粘膜上皮或分层细胞层组成的亲脂性屏障,最终进入体循环gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。虽然作者没有观察到CsA与G2‐α‐CD在水溶液中的相互作用,Miyake说gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba8gydF4y2Ba提示CsA在水溶液中与DM‐α‐CD和DM‐β‐CD相互作用,可能涉及CsA的侧链。因此,作者推测CsA与G2‐α‐CD的相互作用方式类似于DM-CDs。在本研究中,CsA/G2‐α‐CD复合物与CsA单独作用于嗜酸性粒细胞内流的起始和持续时间的差异可能被认为是G2‐α‐CD复合物的结果。作者推测,如果CsA与G2‐α‐CD的复合物在水黏膜层中相对稳定,则溶解的CsA/G2‐α‐CD复合物在吸收位点持续存在,可用于吸收的游离CsA将逐渐在该位点释放。因此,建议进一步研究CsA/G2‐α‐CD复合物在水溶液和药物配方中的解离平衡和化学计量学。gydF4y2Ba
综上所述,作者建议通过制定含有麦芽糖基- α -环糊精的包合物来减少吸入环孢素A的有效剂量。因此,环孢素A的外周毒性作用,gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba肾毒性,可减轻gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba吸入,导致更大的治疗安全边际。麦芽糖基- α -环糊精和环孢素A/麦芽糖基- α -环糊精复合物的药代动力学和毒性也应进一步确定。gydF4y2Ba
致谢gydF4y2Ba
作者要感谢J.Fozard(瑞士巴塞尔诺华公司)和M.Kometani(日本筑波诺华制药有限公司)对手稿的有益讨论和批判性阅读。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba二○○二年三月四日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2003年4月14日。gydF4y2Ba
- ©ERS期刊有限公司gydF4y2Ba