文摘gydF4y2Ba
严重的肺部发炎,氧化剂应力发生在肺泡内舱。在这种情况下,低分子量的规定抗氧化剂在上皮衬里流体知之甚少。因此,抗氧化水平测定在支气管肺泡灌洗液(BALF)患者的急性呼吸窘迫综合征(ARDS);n = 40)和健康志愿者(n = 20)。gydF4y2Ba
减少谷胱甘肽(GSH)、氧化谷胱甘肽(GSSG;酶反应)、视黄醇(维生素A),α-tocopherol(维生素E),抗坏血酸(维生素C),尿酸通过高效液相色谱法(所有),缩醛磷脂(磷脂1-alkenyl-2-acyl),多不饱和脂肪酸(PUFA;通过气液色谱法)和FgydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostanes (ELISA)量化。所有的值表示为浓度cell-depleted BALF。gydF4y2Ba
GSSG (ARDS: 0.13±0.02µM;控制:0.03±0.01µM;均值±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba)和FgydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostanes (ARDS: 78±10点;控制:在ARDS±5点26日)增加,从而表明氧化剂压力。谷胱甘肽水平的病人没有显著变化,而浓度的维生素A和C,维生素E (ARDS: 77±15海里;控制:26±3海里)和尿酸(ARDS: 11.8±2.2µM;控制:0.7±0.0µM)在ARDS显著升高。PUFA的总脂质,作为祭祀抗氧化剂,增加了∼3倍的病人,但缩醛磷脂明显下降。gydF4y2Ba
总之,低分子量抗氧化剂升高在急性呼吸窘迫综合征患者的肺泡间隔。进一步的研究才能阐明分子机制这一发现。gydF4y2Ba
这项研究得到了德意志Forschungsgemeinschaft (SCHM 1524/2-1),德国波恩。gydF4y2Ba
肺泡间隔是永久暴露于活性氧(ROS)和氮物种(RNS)来自吸入空气污染物。上皮衬里的抗氧化防御系统流体由几种低分子量化合物,如减少谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸(维生素C)和尿酸,亲脂性的抗氧化剂,如α-tocopherol(维生素E),视黄醇(维生素)和缩醛磷脂(1-alkenyl-phospholipids)、抗氧化酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽氧化酵素代表显著的例子gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。正常的肺,复杂而协调互动的抗氧化化合物提供保护的远端肺结构的破坏性影响氧化攻击。gydF4y2Ba
肺的炎症可能导致激活巨噬细胞和中性粒细胞,并释放自由基教授呼吸破裂。此外,常用的吸入的氧气浓度高可能导致自由基的生成gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。因此,大量的作者提供了证据表明氧化降解产品升高在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者在支气管肺泡灌洗液(BALF)和呼出的气息凝结gydF4y2Ba4gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。新生成的氧化化合物之间的这种不平衡和当地的抗氧化系统可能会导致肺损伤,导致增加毛细管泄漏gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,改变表面活性剂的新陈代谢gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba和减少表面活性剂功能gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。这可能进一步增强肺泡水肿和崩溃,经常遇到在ARDS和急性肺损伤(ALI)。gydF4y2Ba
因为ARDS /阿里与BALF中活性氧化剂的含量升高,并基于发现血抗氧化剂浓度降低gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,它早就提出,肺泡抗氧化剂可能减少inBALF病人gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。针对低分子量抗氧化化合物,数据冲突和稀缺。例如,有人认为,谷胱甘肽降低BALF的ARDS患者gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。这样的单一化合物的分析可能是复杂的整体BALF中这些物质的含量低,由于上皮衬里的稀释100 - 200倍液(精灵)在洗胃过程。因此,高度敏感和有选择性的分析方法似乎代表了这种分析的先决条件gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
鉴于这些考虑,本研究进行仔细BALF中量化单抗氧化化合物从40 ARDS患者。共有20名健康志愿者作为控制。显著增加被发现对大多数单抗氧化参数研究,除了谷胱甘肽和缩醛磷脂。得出增加氧化剂负担在随后ARDS患者的远端肺区域或伴随着增加抗氧化化合物。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba
患者人群gydF4y2Ba
内科医学的研究部门,Justus-Liebig-University,吉森,德国,和包括40例完成ARDS的标准,根据美国欧洲共识会议ARDS的定义gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。在细节,ARDS患者强烈的历史发展中呼吸困难,动脉氧张力(gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)/吸入氧气分数(gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)的值< 200毫米汞柱(1 kPa = 0.133毫米汞柱),肺浸润和肺动脉楔压力(PAWP) < 18毫米汞柱或失踪在超声心动图左心力衰竭的迹象。潜在原因发展ARDS的肺炎(n = 31;主ARDS),脓毒症综合征(n = 8;二次ARDS)和胰腺炎(n = 1;二次ARDS)。gydF4y2Ba
排除标准为所有患者PAWP > 18毫米汞柱,肺挫伤,预先存在的肺疾病(纤维化、慢性阻塞性肺疾病),潜在恶性疾病,怀孕和额外的试验性药物。gydF4y2Ba
所有患者接受标准化全静脉营养疗法,包括氨基酸和微量元素(Aminomix 2®;费森尤斯公司Kabi,糟糕的小礼帽,德国)、脂质(Intralipid 20®;巴克斯特,Unterschleissheim、德国)和多种维生素制剂(Cernevit®-12;巴克斯特;1瓶·天gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)。10.2毫克α-tocopherol Cernevit-12包含等,1.93毫克维生素a棕榈酸酯和125毫克抗坏血酸。所有患者机械通气,fibreoptic支气管镜检查和支气管肺泡灌洗(BAL)进行机械通气的发病后直接诊断。共有20名健康志愿者灌洗在类似的方式。协议是Justus-Liebig-University经当地伦理委员会批准。每个病人或其近亲提供知情同意。人口和基本临床资料表1中给出gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。平均动脉氧合指数(gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2BaARDS)是143毫米汞柱(所有的病人),134毫米汞柱主要ARDS患者和170毫米汞柱在二级ARDS患者。在28天死亡率没有显著差异主要和次要ARDS(表1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。BALF的复苏是降低ARDS∼20%与健康对照组相比(表1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
支气管肺泡灌洗gydF4y2Ba
灵活fibreoptic在所有患者进行支气管镜检查和控制由一个医生以标准化的方式,如前所述gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。一个段海豆芽或右中部叶灌洗的总量140毫升无菌生理盐水在七等于整除。恢复BALF汇集,通过无菌纱布过滤,立即离心机(300×gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟4°C)去除细胞和膜碎片。整除的BALF抗氧化分析提供0.01%丁羟甲苯(二叔丁基对甲酚),在液态氮冷冻和储存在−80°C。颗粒状细胞的染色和计算按照常规标准执行。符合欧洲呼吸学会的建议(人)工作小组188bet官网地址gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,测量无细胞的成分浓度每毫升BALF中恢复过来。gydF4y2Ba
脂质和蛋白质分析gydF4y2Ba
脂质提取与氯仿/甲醇、BALF和磷脂含量的分光光度测量,如前所述gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。总蛋白进行分析使用一个商业试验(Bicinchoninic酸蛋白质定量测定;皮尔斯,德国波恩)。gydF4y2Ba
抗氧化剂的分析gydF4y2Ba
减少,氧化谷胱甘肽gydF4y2Ba
总谷胱甘肽和氧化谷胱甘肽(GSSG)是由酶回收试验研究院和蒂策。资助最初所描述的gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,用于microtitre盘子。GSSG屏蔽后测定谷胱甘肽gydF4y2BaNgydF4y2Ba-ethylmaleimide (NEM)和GSH-NEM使用固相萃取分离。gydF4y2Ba
维生素E和维生素AgydF4y2Ba
疏水性维生素α-tocopherol(维生素E)和视黄醇(维生素A)同时分析高效液相色谱二极管阵列检测,根据Catignani和Bieri的方法gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。视黄醇和α-tocopherol同时发现在324 nm和292 nm,分别。使用相应的紫外光谱峰纯度检查。分析物被量化为每个维生素通过标准曲线,修正后为内部标准(视黄醇乙酸)的变化。gydF4y2Ba
维生素C和尿酸gydF4y2Ba
维生素C(抗坏血酸(AA))和尿酸(UA)使用高效液相色谱法测定,根据Iriyama的方法gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。检测完成使用惠普1049电化学检测器(安捷伦、Waldbronn、德国),配备了Ag / AgCl工作电极和+ 800 mV。gydF4y2Ba
多不饱和脂肪酸和缩醛磷脂gydF4y2Ba
总脂质被孤立如前所述,脂肪酸和缩醛磷脂使用气相色谱法同时测定如前所述gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。下面的脂肪酸被用于计算多不饱和脂肪酸(PUFA): 18:2,γ-18:3,十八3,20:2,20:3(3),20:3(6),20:3(9),20:4,二十5,22:3,22:4,22:5,22:6。比例(重量的二甲基缩醛(DMA) /重量的脂肪酸甲酯(名声))×2)检测到的DMA成名表示的相对量缩醛磷脂中的磷脂分数。由于缺少BHT-supplemented BALF材料,缩醛磷脂和PUFA只是以14控制和31 ARDS患者。gydF4y2Ba
分析FgydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostanesgydF4y2Ba
FgydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostanes被量化的ELISA(开曼化工、安阿伯市MI,美国)。总之,样本(500µL BALF)是由固相萃取纯化,浓缩(3毫升Chromabond C18ec墨盒;Macherey内格尔,Duren、德国)和FgydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostanes筛选了,受到ELISA,详细的供应商手册中。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
结果表示为±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba为每个组。首先,统计分析差异之间的病人和控制和中小学ARDS患者是由测试原则意义的多样性(克鲁斯卡尔-沃利斯H-test),其次是与一个非参数检验(Mann-Whitney紫外线测试)。值明显不同于控制表示p < 0.05, p < 0.01, p < 0.001。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
正如预期的那样,ARDS患者显著增加中性粒细胞和巨噬细胞计数下降BALF中细胞的差异。总BALF蛋白质在ARDS高度升高,同时总磷脂病人和控制之间没有显著差异(表1所示gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
BALF中健康对照组,谷胱甘肽是最丰富的抗氧化剂分子(1.6∼µM),其次是AA(0.5∼µM)和UA(0.7∼µM)。亲脂性的抗氧化剂的浓度α-tocopherol(∼26海里)和视黄醇(∼5 nM)相对较低(表2所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
ARDS患者(0.13µM;p < 0.001)显示GSSG浓度比对照组高(0.03µM;表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。因此,FgydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostane水平,作为脂质过氧化的标记,在ARDS显著升高,从而表明氧化剂压力(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。目前作者无法检测到大量的丙二醛在控制和患者目前使用的技术(高效液相色谱荧光检测),表明很低浓度的BALF中脂类降解产物。gydF4y2Ba
谷胱甘肽的浓度不是ARDS与不同的控件(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。AA的高效液相色谱分析显示一个大约四倍海拔在ARDS(2.4µM;p < 0.05;表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。同样,在ARDS UA的浓度升高(11.8µM;p < 0.001)与控制(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。分析α-tocopherol(维生素E)显示在ARDS显著增加(∼77海里;表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。视黄醇(维生素A)的浓度大约七倍升高在ARDS (∼32 nM;p < 0.001)与控制(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
与其他抗氧化剂研究相比,缩醛磷脂在ARDS显著下降,这是真正的绝对和相对总磷脂(与之相比)浓度(表2所示gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba和3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。PUFA的绝对和相对含量,可以作为牺牲剂氧化压力下,被∼2-3-fold ARDS与控制相比(表2中升高gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba和3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
为了弥补稀释可变性在平衡过程中,磷脂系数计算所有测量参数(表3gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。当使用磷脂浓度作为分母,几乎相同的结果如前所述。相比之下,当执行尿素校正(血尿素浓度/ BALF中尿素浓度),在GSSG和F无显著差异gydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostane水平观察(数据没有给出细节)。Urea-corrected谷胱甘肽在ARDS(71.0µM显著下降gydF4y2Ba与gydF4y2Ba216.5µM控件;p < 0.001), UA浓度仍显著升高(ARDS: 342µMgydF4y2Ba与gydF4y2Ba100年µM控制;p < 0.001),视黄醇值在ARDS升高约三倍,而所有其他抗氧化化合物显示只有细微的差别与控制(数据没有给出细节)。gydF4y2Ba
ARDS患者进一步分为初级ARDS (n = 31)和二级ARDS (n = 9)。只有细微的差别在谷胱甘肽水平在初级ARDS(1.5±0.4µM)和二级ARDSµM (1.4±0.3)。相比之下,AA和UA的绝对浓度降低中小学ARDS ARDS相比(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba),但这些差异并不显著。此外,当使用总磷脂浓度作为分母,中小学ARDS之间只有细微的差别可以发现(表3所示gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。缩醛磷脂浓度和PUFA中小学ARDS之间并没有改变。gydF4y2Ba
相关分析的结果与本文提供的数据和疾病严重程度的标记(gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2Ba死亡率)和临床结果(28天)显示,可以发现当没有显著相关性比较抗氧化剂和氧化降解产物水平gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2Ba值。此外,无显著差异可以观察28天幸存者和nonsurvivors之间,针对解决标记。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
本研究试图探讨低分子量抗氧化分子的监管在ARDS。与其他疾病有潜在炎症活动,比如哮喘gydF4y2Ba22gydF4y2Ba在肺移植和闭塞性细支气管炎综合征gydF4y2Ba23gydF4y2Ba了,但是人们对肺泡低分子量抗氧化剂的监管和分布在这些实体。最近ARDS的调查主要集中在一些抗氧化酶谷胱甘肽水平和BALF浓度和蛋白质。在目前的研究中,谷胱甘肽,亲水抗氧化剂AA和UA和缩醛磷脂膜相关抗氧化剂,维生素E和被确定为主要的低分子量抗氧化剂BALF的健康人。只有非常少量的氧化产品,如GSSG和FgydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostanes,被检测到。gydF4y2Ba
ARDS的条件下,氧化剂应激(GSSG和F的标志gydF4y2Ba2gydF4y2Ba-isoprostanes)数倍的提升,符合先前的调查gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。F的浓度相对较低gydF4y2Ba2gydF4y2BaBALF -isoprostanes表明,生成的氧化脂质是有限的在这些条件下,或者他们正在迅速清除肺泡空间,通过代谢途径或转移到血液室。gydF4y2Ba
Upregulation的多数研究抗氧化化合物一直观察到。然而,最丰富的肺泡抗氧化剂谷胱甘肽显示与控制相比并没有显著变化。这与先前的报道,谷胱甘肽含量显著减少ARDSgydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。这种差异的主要原因可能与尿素的使用系数修正BAL可变性在这些研究中。一直反复讨论,BAL /血尿素quotient-based修正BALF化合物的浓度是容易产生缺陷,这可能源于尿素的迅速扩散,尤其是通过漏水的障碍在炎症性肺部疾病。现有的水肿液,富含尿素,可能导致错误的过低的价值观和大型interpatient变异gydF4y2Ba24gydF4y2Ba。按照这样的推理,被观察到了类似的谷胱甘肽浓度的变化,与之前的研究相比,应用尿基时校正方法。在最近的研究中,人工作组的指导报告之后gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba和所有的值都报道,每毫升BALF浓度。此外,人所显示工作组,灌输灌洗液的复苏是报道,和BALF磷脂浓度被用作分母。gydF4y2Ba
亲水抗氧化剂(AA和UA)与亲脂性的抗氧化剂相比似乎更多的调节(维生素A和E), PUFA可能作为祭祀的抗氧化剂,也是在当前病人组明显升高。gydF4y2Ba
与其他抗氧化剂评估,缩醛磷脂,它被认为是肺表面活性物质的主要成分gydF4y2Ba25gydF4y2Ba和强大的抗氧化剂gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,减少病人群体,针对我国有关矿山截污库坝的绝对和相对含量(总磷脂)。一方面,这可能表明增加退化和/或合成/另一方面分泌受损。有趣的是,这明显不同于维生素A和E,发现这里明显调节,也积极与II型肺表面活性物质的分泌细胞gydF4y2Ba25gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
在目前的调查,持续观察氧化应激在ARDS患者远端肺结构。尽管肺泡抗氧化剂增加,过多的氧化力持续下去,最终导致氧化/抗氧化失衡。因此,各种形式的分子破坏发生在应对ROS和RNS的形成,其中包括脂质过氧化、DNA和蛋白质损失。这可能有几个结果,如下:1)实质,ROS内皮细胞受损gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,这可能会导致血管通透性增加gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba;2)破坏surfactant-specific蛋白质和化学改性的活性自由基明显可能导致受损的表面活性,在一些研究确实被观察到gydF4y2Ba4gydF4y2Ba;和3)可能更重要的是比直接表面活性剂伤害,oxidant-induced肺泡II型细胞表面活性剂合成和代谢紊乱可能占表面活性剂功能的明显障碍中遇到ARDSgydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
尽管大量的调查、低分子量抗氧化剂的精确的行为模式在生物体液和组织,个人抗氧化剂的相对重要性,个人对总抗氧化能力的影响肺泡间仍知之甚少。此外,抗氧化剂的来源和新陈代谢的精灵仍不清楚gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
最著名的发现当前的研究中,肺泡间隔的增加抗氧化剂,可能引发猜测,抗氧化代谢的肺泡上皮细胞下加速氧化应激在阿里。然而,它应该记住当前使用的研究设计不能进一步加强这一假说,主要是因为总BALF抗氧化剂水平只反映净不同过程的影响。进一步的研究是必要的调查抗氧化代谢的肺上皮细胞氧化应激的条件下。最近的研究主要集中在谷胱甘肽的调节。例如,拉赫曼gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba发现谷胱甘肽和γ-glutamylcysteine合成酶水平增加氧化剂治疗后肺泡II型细胞。这可能是诱导redox-sensitive转录因子的激活,如核能factor-κB和激活蛋白1参与抗氧化基因的调控。一个最近的研究gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba32gydF4y2Ba显示单个肺泡抗氧化剂水平由柴油机尾气耗尽后迅速恢复,表明肺有快速的代谢途径。在烟草烟雾暴露gydF4y2Ba33gydF4y2Ba在哮喘患者gydF4y2Ba34gydF4y2Ba谷胱甘肽被发现增加BALF中。此外,接种动物亚致死的氧化剂压力,包括臭氧、缺氧和氧过多,导致增加抗氧化剂的水平gydF4y2Ba35gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba宽容和增强后续氧挑战gydF4y2Ba36gydF4y2Ba。总的来说,这些发现可能表明自适应能力的过程中肺oxidant-induced肺损伤。应该考虑另一个方面就是在ARDS的通风方式也可能改变抗氧化基因表达和抗氧化释放。科普兰gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba37gydF4y2Ba令人信服地证明了通风方式对基因表达产生深远影响的肺。作为nonventilated肺相比,他们发现水平的提高促炎基因(gydF4y2Ba如。gydF4y2Bainterleukin-1β)在细支气管上皮细胞通过细胞,gydF4y2Ba原位gydF4y2Ba高频通气后杂交和macroarray技术。几个基因的差别显著上升,对这些观察已经经过30分钟的高频通风。作者假设,机械拉伸在高频通气显著改变了肺癌基因档案,这些基因改变先于肺损伤。尽管这些作者并未出现抗氧化基因的数据,这些结果显然证明肺的准备应对机械通气与基因表达模式的深刻变革,可能,当然,还包括抗氧化基因。gydF4y2Ba
综上所述,在急性呼吸窘迫综合征,目前的结果表明,肺泡氧化的挑战是与低分子量的净增加抗氧化剂。未来的研究将阐明这个局部低分子量的增加抗氧化剂是否由于当地生产或溢出的血液室。然而,全球上皮衬里液的抗氧化能力,尽管增加单抗氧化化合物,似乎无法完全抵消氧化增加负担。未来的研究可能有助于澄清的相对重要性单一抗氧化剂保护肺部免受氧化攻击。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
本报告的部分已经在部分由t . Luboeinski医学论文要求。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2003年的10月28日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2004年8月16日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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