文摘gydF4y2Ba
本研究的目的是阐明增加气道炎症的机制在急性恶化。gydF4y2Ba
共有68名慢性阻塞性肺病患者在一个稳定的阶段为为2 - 3年随访。炎症细胞进行分析,白介素8 (IL),中性粒细胞弹性蛋白酶,eotaxin,类胰蛋白酶和咆哮(激活规范,正常t细胞表达和分泌)测定在痰液,在一个稳定的阶段,在急性恶化。gydF4y2Ba
30(不稳定组)68例,急性恶化和足够咯血痰在恶化。32例(集团)稳定没有出现任何恶化为2 - 3年。中性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞,引发的水平,嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP) eotaxin类胰蛋白酶和痰从两组病人在稳定阶段获得明显高于健康不吸烟。没有明显差异在细胞分析和生物标记物在两组之间,但是病人不稳定组表现出更严重的气流限制。不稳定组,总细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,并引发,中性粒细胞弹性蛋白酶,ECP和咆哮水平显著增加在一个稳定值的恶化阶段。gydF4y2Ba
这些发现表明,慢性阻塞性肺疾病的恶化可能与额外增加气道炎症介导的中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、interleukin-8和咆哮。gydF4y2Ba
慢性阻塞性肺疾病(COPD)的预后由急性恶化的不利影响,从而增加死亡率和发病率,并导致不可逆的肺功能下降,从而可能导致严重疾病的发展gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。有人建议,恶化可能与气道炎症的增加产生的各种原因,如病毒或细菌感染,或环境因素。亚伦gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba3gydF4y2Ba证明标记气道中性粒细胞炎症增加慢性阻塞性肺病急性恶化的时候;然而,这种急性炎症反应似乎发生独立的可论证的细菌或病毒呼吸道感染。BhowmikgydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba证明更频繁的发作患者有较高的基线痰白介素(IL) 6和引发的水平,这些细胞因子可以预测未来发作的频率。它也被报道,也不仅中性粒细胞,嗜酸性粒细胞和淋巴细胞可能参与增加气道炎症在急性加重gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。然而,增加气道炎症机制的细节仍在恶化模糊。gydF4y2Ba
有人建议,在各种急性恶化的原因,由于呼吸道感染病毒或细菌可能占,甚至超过80%的慢性阻塞性肺病急性加重,约有1/3到1/2的原因显然是病毒感染的结果gydF4y2Ba7gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。已经表明,气道上皮细胞的病毒感染诱发各种细胞因子和趋化因子,如引发,eotaxin和咆哮(激活规范,正常t细胞表达和分泌)gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。有人建议,这些细胞因子和趋化因子参与气道中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的炎症反应化学引诱物在COPD的发病机制gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。相反,它也表明,肥大细胞的航空公司增加慢性阻塞性肺病gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,这类胰蛋白酶的浓度从肥大细胞脱粒痰增加在COPD患者中,与痰嗜伊红血球过多的证据gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。虽然在慢性阻塞性肺病肥大细胞激活的作用仍然是模糊的,有人建议,激活肥大细胞在气道可能导致气道分泌过多gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
在当前的研究中,提出,中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,被化学引诱物,如引发、咆哮、eotaxin以及肥大细胞,可能导致增加在气道炎症急性恶化。检验这一假说,炎症细胞在痰液检查,和引发的浓度,中性粒细胞弹性蛋白酶,类胰蛋白酶,嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP) eotaxin痰从COPD患者获得咆哮,在一个稳定的阶段,而加剧,测量。现在的作者还研究了这些气道炎症细胞和生物标志物在痰预测是否发作的频率。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
主题gydF4y2Ba
共有68个连续的COPD患者,承认当前作者的门诊(日本信州大学医院,Matsumoto)从1998年10月到2001年9月,与选择标准一致,有足够的痰中获得一个稳定的阶段,参加本研究。他们没有α与吸烟有关的慢性阻塞性肺病gydF4y2Ba1gydF4y2Ba抗胰蛋白酶缺乏症和吸烟史> 30 pack-yrs。慢性阻塞性肺病的诊断是基于临床劳力性呼吸困难,肺功能的特点是不可逆的气道阻塞(在一秒用力呼气量(FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)/用力肺活量< 70%,吸入短效βgydF4y2Ba2gydF4y2Ba受体激动剂),肺恶性通货膨胀,减少气体传输和解剖肺气肿在高分辨率计算机断层扫描(HRCT)。任何历史的患者哮喘,哮喘症状,比如咳嗽和喘息静止在一个稳定的阶段,以及患者吸入或口服类固醇,或患有呼吸道感染或恶化前3个月被排除在外。慢性阻塞性肺病的严重性根据全球倡议对慢性阻塞性肺疾病(黄金)的指导方针gydF4y2Ba16gydF4y2Ba如下:14病人在阶段1中,23日在阶段2中,20在第三阶段,11在第四阶段。共有12名患者已经接受长期氧疗法,治疗43的常规吸入抗胆碱剂和/或长效βgydF4y2Ba2gydF4y2Ba受体激动剂,治疗42自缓释茶碱> 6个月前的研究。11个正常健康男性志愿者48 - 76岁年龄不等,平均年龄66岁,担任控制;nonatopic都不吸烟,没有表现出异常的肺功能测试。这项研究是由当地研究伦理委员会批准,所有患者把他们的知情同意。gydF4y2Ba
研究设计gydF4y2Ba
共有68名慢性阻塞性肺病患者在一个稳定的阶段为从目前作者的门诊从1998年10月到2001年9月。在第一次访问,得到当前病史和常规身体检查,常规实验室检查,胸片进行。在第二次访问,胸部HRCT和肺功能测试检查,和诱导痰液被吸入从患者获得高渗盐水。所有患者随访门诊诊所每个月2 - 3年。在这段时间里,如果病人感觉更糟,联系当前作者在观察期间,要求他们尽快来到门诊,历史和体格检查,检查痰,肺量测定法(胸图嗨- 701;箱有限公司、日本东京)和脉搏血氧测量血氧饱和度的测量(Pulsox-24M;帝人有限公司、日本大阪)或动脉血气分析。之后,它被诊断出病人是否已经开发了一个恶化与否,根据Anthonisen定义gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba从患者获得,痰是尽可能经常。稳定阶段是确定病人的病情稳定持续≥3个月正常的日常变化和没有任何呼吸道感染的迹象。在最近的研究中,然而,由于心脏衰竭加重,肺血栓栓塞、气胸、呼吸肌肉疲劳,麻醉代理和明显的肺炎被排除在分析。在稳定和恶化阶段获得的痰样本总量分析和微分细胞计数,和ECP化验,中性粒细胞弹性蛋白酶,引发,eotaxin、类胰蛋白酶和咆哮。gydF4y2Ba
痰收集和分析gydF4y2Ba
当前作者收集痰液吸入诱导的高渗盐水使用一般原则如前所述gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。然而,在急性恶化,吸入高渗盐水有时会产生更严重的后果。在这种情况下,自发的痰。痰诱导的方法简要概述如下。诱导痰前,所有科目吸入βgydF4y2Ba2gydF4y2Ba受体激动剂,3.5%高渗盐水与超声波nebulised nebuliser (NE-V10B;欧姆龙,日本东京)最大输出10分钟时间。如果无法获得合适的痰,4.5%高渗盐水nebulised 5分钟时间。如果FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba下降了从post-bronchodilator值> 10%,盐水的浓度并没有增加。如果FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba减少了> 20%或者麻烦的症状发生,nebulisation停止。nebulisation是持续≥10分钟后,停止了15分钟或更早如果≥2毫升的痰样本质量好。自发或诱导痰收集时,受试者被要求冲洗嘴巴和喉咙,然后试图咳出痰到无菌塑料盘。痰是然后分开唾液污染宏观检验、和粘液栓被撤盘子无菌塑料容器,然后确定样品的体积。小整除的样本用于细胞计数与同等容积的汉克的覆盖平衡盐溶液(hbs)包含1毫米二硫苏糖醇(σ化学品,普尔,英国)和孵化在37°C,持续15分钟。孵化悬架与哈佛商学院然后洗两次。后残余粘液被暂停用纱布过滤删除,洗脱液用于总,微分细胞计数。总细胞数,除了鳞状细胞,确定了一个标准的血球计,正常体重和表达为细胞×10gydF4y2Ba5gydF4y2Ba·ggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba痰湿重。细胞涂片用离心机(Autosmear;樱花、东京、日本)和彩色May-Grunwald-Giemsa污点的微分细胞计数,盲法的方式进行。幻灯片是编码和500个细胞数的微分白细胞计数。这是痰液是否充足与否取决于指销gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。此外,唾液污染也评估了鳞状细胞的比例微分细胞计数,不包括上皮细胞,在幻灯片。这是接受足够如果鳞状细胞的比例< 20% dithiothreitol-treated样本gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。微分白细胞计数的结果表示为一个百分比的有核细胞,不包括鳞状上皮细胞。同等体积的生理盐水立即被添加到剩下的痰样本,没有包含二硫苏糖醇,然后样本用离心机2000×gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟。上层清液吸气,冻结在−80°C。ECP的测量,类胰蛋白酶,中性粒细胞弹性蛋白酶,引发,eotaxin和咆哮被委托给三菱Kagaku Bio-Clinical实验室有限公司(日本东京)。项目和类胰蛋白酶是衡量fluoroenzyme免疫测定用UniCAP ECP和UniCAP类胰蛋白酶工具包,分别(法玛西亚诊断,乌普萨拉,瑞典)。中性粒细胞弹性蛋白酶和乳胶凝集法测定,使用一个Ecoline中性粒细胞弹性蛋白酶工具包(默克有限公司,达姆施塔特,德国)。引发、咆哮、eotaxin酶免疫分析法测定,分别使用Quantikine人体咆哮和eotaxin免疫测定试剂盒(研发系统,明尼阿波利斯,美国)。gydF4y2Ba
数据分析gydF4y2Ba
文本和表中所示的值意味着±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba。变量的数据分布在不同的组首次评估Bartlett的测试。当显示一个正态分布的数据变量,他们与单向方差分析相比,紧随其后的是多个Tukey-Kramer的比较方法。当数据没有显示一个正态分布的变量,这些变量与克鲁斯卡尔-沃利斯检验比较,紧随其后的是多个非参数的比较组间Tukey-Kramer方法。变量之间的比较稳定的阶段,在恶化进行配对t检验。变量之间的关系是研究通过计算皮尔逊相关系数的产品。一个p值< 0.05为所有统计测试结果被认为是显著的。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
在招收了68名患者,34个病人急性恶化为2 - 3年开发。的34个病人,可以获得足够的痰样本在恶化30例慢性阻塞性肺病(不稳定),其余4名患者退出,因为无法获得足够的痰加重期间(n = 2)或他们的只有一次性恶化在观察期间是错过了(n = 2)。发展中急性恶化前的平均时间为11.5±1.7个月30个病人。21开发的30例急性恶化在观察期间,两倍多,平均·年恶化率为1.2±0.2事件gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。剩下的34岁患者,32名患者没有任何急性恶化为2 - 3年(稳定的慢性阻塞性肺病)和两名患者退出观察期间由于缺乏接触当前的作者的门诊。在这项研究中,当前作者分析痰中获得一个稳定的阶段从32稳定病人和痰从30不稳定的病人在一个稳定的阶段,在第一次急性恶化阶段。他们的年龄,严重程度和肺功能测试从一个稳定阶段如表1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。没有明显差异在年龄、性别、吸烟史;然而,FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba显著降低,残余容积(RV) /肺活量(TLC)明显高于30患者恶化与32个病人没有出现恶化。此外,尽管没有严重的患者在稳定的慢性阻塞性肺病组,第四阶段不稳定的慢性阻塞性肺病组30被划分为严重的慢性阻塞性肺病的第四阶段。30患者恶化明显更严重而32名患者没有。gydF4y2Ba
特点和肺功能gydF4y2Ba
肺量测定法显示FEV的显著下降gydF4y2Ba1gydF4y2Ba值从稳定到恶化阶段(1.29±0.08 LgydF4y2Ba与gydF4y2Ba0.99±0.08 L;p < 0.01)。根据Anthonisen定义的恶化的严重程度gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba轻微的13个病人,温和的六个,和严重的11个。然而,只有三个病人需要住院治疗,没有在紧急治疗诊所或插管。增加所有患者的症状的严重程度通过额外的系统性皮质类固醇和抗生素治疗,来解决,在需要的地方,用支气管扩张剂,但没有住院。gydF4y2Ba
痰液细胞分析阶段和稳定在恶化gydF4y2Ba
在一个稳定的阶段,痰液总细胞数稳定的慢性阻塞性肺病组和中性粒细胞的数量,淋巴细胞和嗜酸性粒细胞痰从稳定和不稳定的慢性阻塞性肺病患者组明显高于痰从健康的不吸烟者(表2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。在不稳定的慢性阻塞性肺病组恶化,总淋巴细胞的细胞计数和绝对数字,中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,以及相对嗜酸性粒细胞计数,在痰显示额外的显著增加的稳定阶段。图1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba显示绝对中性粒细胞计数的变化,绝对和相对痰中嗜酸性粒细胞计数个体加剧慢性阻塞性肺病患者。引发的浓度,ECP eotaxin类胰蛋白酶和上层的稳定和不稳定的慢性阻塞性肺病患者的痰液组在一个稳定的阶段明显高于健康不吸烟(表3所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。在恶化,引发的水平,中性粒细胞弹性蛋白酶,ECP和咆哮痰从稳定阶段的显著增加,而eotaxin和类胰蛋白酶水平没有任何明显的变化。gydF4y2Ba
绝对中性粒细胞(a)和嗜酸性粒细胞的变化(b)项1 g的痰和相对痰中嗜酸性粒细胞(c)项中获得一个稳定的阶段,在急性恶化阶段从个体不稳定的慢性阻塞性肺疾病患者(n = 30)。在恶化,绝对中性粒细胞和嗜酸性粒细胞计数,以及相对嗜酸性粒细胞计数,痰增加与稳定阶段(p < 0.05)。gydF4y2Ba
分析细胞的痰gydF4y2Ba
比较白介素8 (IL),中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP) eotaxin、类胰蛋白酶和咆哮水平痰gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
表明,嗜酸性粒细胞的数量,中性粒细胞和CD3淋巴细胞在支气管活检获得恶化增加与之相比,那些获得相应的数字在轻度慢性阻塞性肺病患者临床稳定的状态gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。也证明了额外的显著增加细胞数量和淋巴细胞的数量,中性粒细胞和嗜酸性粒细胞痰与恶化。ECP的浓度,痰中嗜酸性粒细胞激活的标志,在急性恶化还显著增加而获得的稳定的状态。这些发现表明,也不仅中性粒细胞,嗜酸性粒细胞和淋巴细胞可能参与气道炎症的增加在急性恶化。一些报道表明,慢性支气管炎的恶化,由痰颜色,不同程度的支气管和系统性炎症、脓性恶化与细菌感染和增加中性粒细胞炎症gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。脓性痰的病人在当前的研究中,恢复细胞和中性粒细胞总数高于nonpurulent痰,但没有这样的差异可能是嗜酸性气道炎症中找到。gydF4y2Ba
引发和白三烯水平BgydF4y2Ba4gydF4y2Ba,发现了有力的中性粒细胞化学引诱物,成为在痰在慢性阻塞性肺病急性加重而升高的水平在临床上稳定阶段gydF4y2Ba22gydF4y2Ba。在这项研究中,目前的作者还演示了一个显著增加引发的COPD患者的痰液稳定阶段的价格相比同龄健康不吸烟,和一个额外的显著增加引发和中性粒细胞弹性蛋白酶在急性恶化,导致痰中性粒细胞的增加。中性粒细胞弹性蛋白酶从激活中性粒细胞可能导致上皮细胞分离和脱粒损伤黏膜纤毛的清除和粘液分泌过多gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。这些发现表明,嗜中性粒细胞招募和激活,以应对引发化学引诱物,可能扮演一个角色在气道炎症的加重急性恶化。gydF4y2Ba
朱gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba已经证明的数量lymphomononuclear细胞表达mRNA eotaxin和咆哮,嗜酸性粒细胞化学引诱物,明显大于吸烟者比不吸烟者在健康与慢性支气管炎,那咆哮的表达在细胞表面上皮细胞和牙龈lymphomononuclear进一步增加急性恶化后,而eotaxin的表达没有任何明显的变化。之间的显著相关性的嗜酸性颗粒类型两正嗜酸性粒细胞数量和RANTES-expressed lymphomononuclear细胞也发现了gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。在当前的研究中,慢性阻塞性肺病患者的痰eotaxin水平在一个稳定的阶段与不吸烟者明显高于痰,和咆哮显示显著增加水平在稳定阶段,而eotaxin水平没有任何明显的变化,与朱的组织学研究结果相似gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。这些结果表明,eotaxin可能参与的嗜酸性粒细胞的炎症反应,嗜酸性粒细胞化学引诱物在慢性阻塞性肺病的稳定阶段;相反,咆哮的恶化可能导致嗜酸性在急性加重炎症。细菌感染的作用,一度被认为是慢性阻塞性肺病急性加重的主要原因,现在争论的话题,因为很明显,在COPD恶化是由于其他原因,如病毒感染和环境因素gydF4y2Ba24gydF4y2Ba。与人类鼻病毒感染的支气管上皮细胞导致的生产eotaxin eotaxin-2,除了引发和咆哮gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。呼吸道合胞体病毒也引发引发的生产和上皮细胞系的咆哮gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。因此,一个可能的机制,嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞化学引诱物,引发和咆哮,分别从上皮细胞释放病毒感染后可能招募这些炎症细胞在急性恶化,增加气道炎症。相反,增加痰在慢性阻塞性肺病的类胰蛋白酶水平稳定状态也发现与不吸烟者相比,虽然在痰异染性的细胞没有评估。然而,没有明显的联系可以证明,痰嗜酸细胞增多症已经被路易报道gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。类胰蛋白酶水平升高并没有表现出任何进一步增加在急性恶化。虽然在慢性阻塞性肺病肥大细胞激活的作用仍然是模糊的,肥大细胞在气道可能不会出现为进一步增加在气道炎症急性恶化。gydF4y2Ba
BhowmikgydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba证明更频繁的发作患者有较高的基线痰液il - 6和引发水平,il - 6水平,但不是引发,发作期间进一步增加而稳定的条件,而没有明显增加气道炎症细胞在急性恶化。他们得出结论,这些细胞因子可以预测未来发作的频率。在当前的研究中,当稳定,FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba显著降低和RV / TLC在30不稳定的慢性阻塞性肺病患者相比明显高于32稳定的慢性阻塞性肺病患者。它已经证明了恶化频率与慢性阻塞性肺病的严重程度相关gydF4y2Ba25gydF4y2Ba。然而,没有明显差异在细胞分析和生物标志物在痰获得两组之间在一个稳定的阶段。虽然il - 6没有测量,它不能被证明更频繁的发作患者有较高的基线引发痰。在最近的研究中,轻度慢性阻塞性肺病患者在阶段1和2组成所有主题和FEV均值的58.1%gydF4y2Ba1gydF4y2Ba预测的58%。然而,在伦敦东部的研究gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,参与COPD患者中度到重度及其FEV的意思gydF4y2Ba1gydF4y2Ba预测是39.5%;也就是说,受试者比在当前的研究中更严重的慢性阻塞性肺病。此外,频繁的恶化组被定义为患者≥3加重·年gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba相比,他们开发的恶化更频繁地与不稳定的慢性阻塞性肺病患者在这项研究的恶化率为1.2±0.2事件·年gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。有证据表明,发作更频繁的在那些常规痰生产gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。本研究人群,稳定时,大部分的病人(81%)没有增加痰和没有显示常规痰生产,而56%的患者每日痰在东伦敦的研究gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。此外,21岁的患者吸烟者(36.8%)和51的患者吸入类固醇在东伦敦的研究gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,但大多数研究对象在当前的研究中曾经抽过烟,吸烟者< 1%,所有受试者被吸入或口服类固醇。吸烟史和抗炎治疗可能在很大程度上影响恶化和气道炎症。从这些发现,现在的作者推测,从东伦敦研究结果的差异gydF4y2Ba4gydF4y2Ba可能是由于慢性阻塞性肺病的差异程度,恶化的频率、吸烟史和类固醇治疗。同时,方法论的差异可能会影响结果。BhowmikgydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba每天使用日记卡和最大呼气流量的监测评估急性加重而不丢失任何事件,这可能导致的差异加剧了频率。gydF4y2Ba
总之,许多炎症细胞如淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和介质,如interleukin-8 eotaxin类胰蛋白酶,可能在慢性阻塞性肺疾病气道炎症中涉及在一个稳定的阶段。这些炎症细胞和介质,嗜酸性粒细胞,中性粒细胞,也可能参与的额外加重气道炎症在慢性阻塞性肺疾病急性加重,interleukin-8和咆哮可能扮演重要的角色在招募中性粒细胞和嗜酸性粒细胞进入气道在恶化。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2004年4月22日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2004年12月21日。gydF4y2Ba
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