摘要
抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)可预防败血症引起的膈肌功能障碍。NAC作为间接抗氧化剂可诱导内毒素血症小鼠免疫细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性。本研究的目的是评估NAC是否作为间接抗氧化剂,通过诱导内毒素血症大鼠膈肌锰(Mn)-SOD活性,同时预防肌肉功能障碍。
进行了一种受控研究,其中使用免疫印迹和免疫组化检测蛋白质羰基化,Mn-SOD,过氧化氢酶和3-硝基荧光蛋白免疫反应性。在盐水(对照)或脂多糖(LPS; 20 mg·kg后,研究了六组24小时−1.)i、 p。在没有或有NAC预处理(1.5或3 mmol·kg)的情况下注射−1.·24 H−1.连续7天,还测定膈肌线粒体Mn-SOD活性和呼吸肌功能。
24小时内 h、 LPS诱导最大吸气压力降低,增加膈肌蛋白质羰基化和硝化 mmol·kg−1.NAC明显增加了LPS-和生理盐水注射动物的肌肉Mn-SOD蛋白含量和活性,同时减少了蛋白质羰基化和硝化,部分防止了LPS诱导的呼吸肌功能障碍。
这项研究产生的数据表明,高剂量的N-乙酰半胱氨酸诱导锰超氧化物歧化酶,并保持其活性,可能是通过阻止酶的关键酪氨酸残基硝化来实现的。
脓毒症中观察到的通气肌功能障碍是多种因素共同作用的结果,如促炎细胞因子、活性氧(ROS)、一氧化氮和细菌脂多糖(LPS)的过度产生LPS是革兰氏阴性细菌外膜的主要成分,在引发脓毒症的炎症级联反应和血流动力学事件中起着关键作用。
在过去的十年中,越来越多的证据表明,氧化应激(被定义为氧化剂和抗氧化剂之间的不平衡,有利于前者)与败血症引起的肌肉收缩功能障碍有关1.–4.。Barreiro最近的观察等5.研究表明,内毒素血症大鼠膈肌中蛋白质酪氨酸硝化作用(一氧化氮引起的最常见的共价修饰)也增加。也有人提出,血氧合酶6.,7.具有保护作用,可能通过降低脓毒症引起的膈肌功能障碍中的肌肉氧化应激水平。在另一项研究中,通过减少氧化和机械应激,机械通气也被证明可以预防LPS给药引起的膈肌功能障碍8.。
N-乙酰半胱氨酸(NAC)是一种具有抗氧化特性的分子,因为它可以直接或间接与多种活性氧反应。例如,NAC降低了重复收缩时膈肌疲劳的发生率9郁闷体外非疲劳肌肉的收缩力呈剂量依赖性10通过直接减少ROS介导的对肌浆网或线粒体膜的损伤9,10作为一种间接抗氧化剂,NAC被证明可诱导先前用NAC治疗的致死性内毒素休克小鼠免疫细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)活性,而氧化应激指数显著降低11,12.根据这一信息,作者假设NAC是否可能作为一种间接抗氧化剂通过内毒素血症模型中肌纤维内初级细胞内抗氧化防御的刺激。因此,本研究旨在确定NAC预处理是否能提高内毒素血症大鼠膈肌中抗氧化损伤必需酶锰(Mn)-SOD的含量和活性,从而预防肌肉功能障碍。
材料和方法
动物
实验组
6组同龄(8周)雄性Sprague-Dawley大鼠(275 ~ 300 g,每组8只)腹腔注射脂多糖或生理盐水(对照组)24 h, NAC前处理和无NAC前处理。动物组的分布如下:1组和2组分别腹腔注射20 mg·kg−1.属于大肠杆菌LPS(血清型055:B5;Sigma-Aldrich,Schnelldorf,德国)或生理盐水;第三组和第四组接受1.5%的预处理 mmol·kg−1.三, mmol·kg−1.分别给予NAC,每24小时用14mm针口服,连续7天13在注射LPS之前,第五组和第六组也接受了1.5%和1.5%的预处理 mmol·kg−1.三, mmol·kg−1.NAC,每24小时一次 在注射生理盐水前连续7天。尽管组间死亡率很低(∼8%),在实验方案过程中死亡的动物立即被丢弃,并总是用更多的大鼠替换,这些大鼠再次接受不同的程序。所有动物都用戊妥哈尔(100%)麻醉 mg·kg−1.;B. Brown Medical S. A.,巴塞罗那,西班牙),并在注射后24小时杀死。然后将隔膜迅速切除并在液氮中冷冻或在石蜡中嵌入用于免疫组化使用。
研究设计
这项受控研究是根据IMIM(巴塞罗那,西班牙),巴斯克乡村大学(Bizkaia,Spain)和McGill University(Montreal,Quebec,Canada)以及赫尔辛基公约的伦理标准设计使用和护理动物。所有实验均由动物研究委员会批准各自的机构。
生理学研究
吸气压力测量
首先,动物完全清醒地被放置在一个聚氨酯容积描记室中,其前部包含一个双向阀(2200型;Hans Rudolph,堪萨斯城,密苏里州,美国)。每只大鼠的脖子和头部都被一层胶乳膜固定住,这层胶乳膜靠近阀门,而位于腔室后部的活塞将大鼠向前推以保持其不动。一根塑料管连接到阀门的吸气分支,并连接到压力传感器(ML 140;ADI Instruments, Castle Hill, Australia)测定所有大鼠的吸气压力。最大吸气压力(P一、 马克斯)完全闭塞汉斯鲁道夫阀吸气回路30秒,并至少执行两次,间隔时间<60秒15。P一、 马克斯是从两次不同测量中获得的最高值。在一组大鼠中,用3 mmol·kg−1.(n = 8),P一、 马克斯在三个不同的时间点进行测量:1)在基线检查时(在7天的适应期后),2)在使用3 mmol·kg−1.NAC和3)24 LPS或生理盐水后hi、 p。注射(在注射戊硫酸钠和处死动物之前)。在另一组未经NAC预处理的动物中(LPS对照组和生理盐水对照组,n = 每个8个),P一、 马克斯测量结果:1)在基线检查时,2)24 LPS或生理盐水后hi、 p。注射
生物肌肉研究
免疫印迹
正如其他地方广泛描述的那样,对氧化和亚硝化应激水平进行了评估16–18.因此,通过衍生成2,4-二硝基苯肼(DNP)检测到的总羰基19.使用抗DNP部分(Oxyblot试剂盒;Chemicon International Inc.,Temecula,CA,USA)测定Mn-SOD、过氧化氢酶和蛋白质酪氨酸硝化(3-硝基酪氨酸免疫反应性)18.; 抗Mn SOD(加拿大不列颠哥伦比亚省维多利亚州StressGen),抗过氧化氢酶抗体(美国加利福尼亚州圣地亚哥Calbiochem);和抗-3-硝基酪氨酸(美国密歇根州安阿伯开曼化学公司)抗体。
免疫组织化学
免疫组化分析如其他描述16,18..所有切片(3μm)脱蜡,并与抗DNP部分、抗Mn SOD、抗过氧化氢酶和抗3-硝基酪氨酸一级抗体一起孵育,然后与生物素化二级抗体一起孵育,并与辣根过氧化物酶结合链霉亲和素和二氨基联苯胺一起孵育(Dako Corporation,加利福尼亚州卡宾提亚市)。
超氧化物歧化酶测定
按照Nebot描述的整个程序,根据制造商的说明,使用市售超氧化物歧化酶分析试剂盒(Calbiochem,圣地亚哥,加利福尼亚州,美国)选择性测定线粒体异构体的活性等21.。样品始终以一式三份的形式运行,其相应的活性表示为三次测量的平均值。
统计分析
数据表示为平均值±SD.。Anova,Tukey纠正,用于多次比较,用于比较不同组内获得的数据;p≤0.05被认为是显着的。
结果
功能评估
在24小时内,LPS注射引发了显着的减少P一、 马克斯(43%)与基线值相比(图1)⇓)。3 mmol·kg处理的大鼠,仅在对照组−1.南汽,是不是下降了P一、 马克斯相对于基线部分和显著衰减(30%)(图1)⇓)。P一、 马克斯在7天的预处理期后,无论是3天还是3天,数值都没有显著改变 mmol·kg−1.或1.5 mmol·kg−1.仅NAC(未显示数据)。
与基线相比显著下降(43%)(最大吸气压力:P一、 马克斯)7天适应期后所有动物的平均值,n = 16,以100%的比例表示P一、 马克斯24 注射脂多糖(LPS)后h(平均P一、 马克斯仅在不使用LPS的情况下注射LPS的动物的测量N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理,n = 8) 通过之前的3次治疗,部分和显著减弱(30%) mmol·kg−1.NAC/24 h,持续7天(平均P一、 马克斯测量值24 LPS注射后h,用3 mmol·kg−1.南汽 = 8).P一、 马克斯完全闭塞的汉斯鲁道夫瓣吸气回路。在进行这种操作时,动物们总是完全清醒的。*: p < 0.05;* * *: p < 0.001。
蛋白质羰基化
抗DNP抗体在内毒素血症动物和对照组的横膈膜中检测到不同的阳性蛋白带(图。 2.⇓).24小时内 h、 与注射生理盐水的动物相比,LPS诱导大鼠膈膜中蛋白质羰基化显著增加(图。 3.⇓).用两种药物预处理的动物膈膜3 mmol·kg−1.和1.5 mmol·kg−1.NAC显示羰基形成显著减少24 LPS或生理盐水注射后h(图。 3.⇓).用抗DNP抗体进行的免疫染色显示存在大量的羰基,这些羰基分散分布在横膈膜纤维24内 注射LPS后h(图。 4.⇓).当给动物预处理3小时,这种强度明显降低 mmol·kg−1.NAC(图4所示⇓)。
![图2 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/26/6/1032/F2.medium.gif)
隔膜羰基的代表性示例24 给未经治疗的大鼠注射脂多糖(LPS)或生理盐水,并用1.5 mmol·kg−1.或3 mmol·kg−1.N乙酰半胱氨酸(NAC)。检测到几种羰基化蛋白。分子量kD:分子量(千道尔顿);CTL:控制。
平均值±SD.与盐水注射大鼠相比,注射脂多糖(LPS)的动物膈肌中总蛋白羰基化的比例更高N-乙酰半胱氨酸(NAC)可显著降低LPS或生理盐水注射后24小时的蛋白羰基含量。注意3 mmol·kg−1.在注射LPS的动物中,剂量导致蛋白质羰基化更大程度的降低。OD:光密度;au:任意单位;Ctl:对照组;*:p<0.05;**:p<0.01。
一种脂多糖注射动物(a)和另一种3 mmol·kg预处理动物的横隔膜纤维中羰基修饰蛋白的免疫组化定位−1.N-乙酰半胱氨酸(b)。抗二硝基苯肼(DNP)抗体检测到阳性染色,扩散分布在肌纤维(a和b)内。避免衍生化过程可消除阳性蛋白质羰基化染色(阴性对照:c和d)。此外,用二级抗体替换一级抗DNP抗体完全消除了阳性羰基修饰蛋白染色(阴性对照:e和f)。比例尺 = 50μm。
抗氧化酶
Mn-SOD酶存在于所有大鼠膈膜中(图。 5.⇓)。在24小时内,与注射盐水的动物相比,LPS诱导膈肌Mn-SOD蛋白质含量显着上升(图6⇓).预处理过的动物的横膈膜 mmol·kg−1.NAC显著增加Mn-SOD蛋白含量24 LPS或生理盐水注射后h(图。 6.⇓).然而,在那些用1.5%预处理的动物中 mmol·kg−1.NAC,LPS注射后的24小时,NAC含量显着增加,而不是在盐水注射后显着增加(图6⇓).24小时内 h、 LPS注射诱导的Mn-SOD阳性染色广泛定位于横膈纤维(图。 7.⇓),且在3 mmol·kg预处理的动物中,这种强度显著增强−1.NAC(图7所示⇓).24小时内 h、 与注射生理盐水的动物相比,LPS并未诱导膈肌Mn-SOD活性产生任何显著差异(图。 8.⇓).预处理过的动物的横膈膜 mmol·kg−1.NAC显著提高了Mn-SOD活性 LPS或生理盐水注射后h(图。 8.⇓)。
![图5-](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/26/6/1032/F5.medium.gif)
典型的例子锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)蛋白表达的两种脂多糖(LPS)和盐水注射大鼠,未经处理和1.5 mmol·kg处理−1.或3 mmol·kg−1.N乙酰半胱氨酸(NAC)。相应地表明了相应的阳性对照(大鼠脑线粒体)。MW KD:Kilodattons中的分子量:碱基对;CTL:控制。
平均值±SD.大鼠膈肌锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)值升高24 注射脂多糖(LPS)后h,与注射生理盐水的动物的肌肉相比。以前的治疗有3例 mmol·kg−1.N-乙酰半胱氨酸(NAC)显著增加注射LPS和生理盐水的大鼠膈肌Mn-SOD蛋白含量。请注意,1.5 mmol·kg−1.剂量也仅在注射LPS的动物中诱导肌肉Mn-SOD蛋白含量增加。Ctl:对照。#:不重要的。*: p < 0.05;* *: p < 0.01;* * *: p < 0.001。
免疫组化定位的锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)肌肉纤维内的脂多糖(LPS)注射动物,无论是未处理(a)或处理(b) 3 mmol·kg−1.N-乙酰半胱氨酸(NAC)。注意,在用3.0%预处理的动物的纤维中,Mn-SOD染色更为强烈 mmol·kg−1.南汽。用非特异性二抗替换一抗mn - sod完全消除阳性染色(阴性对照:c和d)。比例尺= 50 μm。
用3.0%预处理的动物 mmol·kg−1.N-乙酰半胱氨酸(NAC)在注射脂多糖(LPS)或生理盐水的大鼠中显示线粒体酶锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的膈肌活性增加。注意,在未经NAC肌肉处理的动物中,Mn-SOD活性在24小时内没有增加 h注射LPS后,对注射生理盐水的大鼠。Ctl:control.*:p<0.05;**:p<0.01;***:p<0.001;#:不重要的。
过氧化氢酶存在于所有大鼠膈膜中(图。 9⇓).24小时内 h、 与注射生理盐水的动物相比,LPS诱导的膈肌过氧化氢酶蛋白含量没有显著差异(图。 10⇓).预处理过的动物的横膈膜3 mmol·kg−1.或1.5 mmol·kg−1.NAC在过氧化氢酶含量上无显著差异 LPS或生理盐水注射后h(图。 10⇓).24小时内 h、 LPS注射诱导隔膜纤维胞浆内过氧化氢酶阳性染色,3 mmol·kg−1.NAC处理(图11)⇓)。
![图9-](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/26/6/1032/F9.medium.gif)
脂多糖(LPS)和生理盐水注射大鼠(未经1.5或1.5治疗)膈膜过氧化氢酶蛋白表达的代表性示例 mmol·kg−1.或3 mmol·kg−1.N乙酰半胱氨酸(NAC)。分子量kD:分子量(千道尔顿):碱基对+C:阳性对照(大鼠红细胞);CTL:控制。
![图10-](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/26/6/1032/F10.medium.gif)
平均值±SD.脂多糖(LPS)和生理盐水注射动物的肌肉蛋白过氧化氢酶含量值,未处理和1.5 mmol·kg−1.三, mmol·kg−1.N-乙酰半胱氨酸(NAC)。不同动物组的横膈膜过氧化氢酶水平没有差异。Ctl:对照。#:不重要的。
![图11-](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/26/6/1032/F11.medium.gif)
未处理(a)和处理(b) 3 mmol·kg的脂多糖注射动物膈纤维胞质中过氧化氢酶的免疫组化定位−1.N-乙酰半胱氨酸。用非特异性二级抗体替换一级抗过氧化氢酶抗体完全消除了过氧化氢酶阳性染色(阴性对照:c和d)。比例尺 = 50μm。
蛋白质酪氨酸硝化
在所有肌肉中检测到几个酪氨酸硝化蛋白带(图。 12⇓)。与注射盐水的动物相比,LPS在24小时内,LPS诱导膈肌3-硝基霉菌素免疫反应性(图13⇓).预处理过的动物的横膈膜 mmol·kg−1.NAC在LPS或盐水注射后24小时显示蛋白质酪氨酸硝化蛋白硝化术(图13⇓).然而,在那些用1.5%预处理的动物中 mmol·kg−1.NAC, 3-硝基酪氨酸免疫反应在LPS注射后24小时只有轻微的,不显著的降低(图13)⇓)。在24小时内,LPS注射诱导3-硝基酪氨酸扩散分布于膈膜纤维(图14)⇓),并且当用3.0%预处理动物时,这种强度明显降低 mmol·kg−1.NAC(图14⇓)。
![图12-](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/26/6/1032/F12.medium.gif)
膈肌蛋白酪氨酸硝化(总3-硝基酪氨酸免疫反应性)的代表性示例24 在大鼠体内注射脂多糖(LPS)和生理盐水后h,未经处理和用1.5 mmol·kg−1.或3 mmol·kg−1.N乙酰半胱氨酸(NAC)。检测到几种酪氨酸硝化蛋白。Ctl:控制;分子量:分子量(千道尔顿)。
![图13-](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/26/6/1032/F13.medium.gif)
平均值±SD.膈肌总3-硝基酪氨酸的免疫反应性高于24 注射脂多糖(LPS)后h与注射生理盐水的动物进行比较。预处理3 mmol·kg−1.N-乙酰半胱氨酸(NAC),但不含1.5 mmol·kg−1.NAC显著降低LPS-和盐水注射大鼠的肌肉蛋白酪氨酸硝化。Ctl:对照组。*:p<0.05;**:p<0.01;***:p<0.001;#:不重要的。
膈肌3-硝基酪氨酸24的免疫组织化学定位 未治疗组(a)和对照组(3)注射脂多糖(LPS)后h mmol·kg−1.NAC预处理(B)动物。抗-3-硝基荧光蛋白抗体检测到阳性染色肌纤维(A和B)内的阳性染色。注意,用3mmol·kg预处理的LPS注射的动物的纤维中染色较小−1.N-乙酰半胱氨酸(NAC)。用非特异性二级抗体替换一级抗-3-硝基酪氨酸抗体完全消除阳性染色(阴性对照:c和d)。比例尺 = 50μm。
讨论
本研究的主要发现是:1)24 h注射LPS后,P一、 马克斯显著降低横膈膜蛋白羰基化、硝化和Mn-SOD蛋白含量;2)用3 mmol·kg预处理大鼠−1.NAC部分且显著地减弱了P一、 马克斯,同时降低注射LPS和生理盐水的动物的肌肉蛋白质羰基化和硝化水平;3)用3 mmol·kg−1.NAC导致LPS-和盐水注入大鼠中的肌肉MN-SOD活性增加。
氧化应激与内毒素血症引起的呼吸肌功能障碍
如前所示22.–25.,目前的研究证实,在24小时内 LPS诱导内毒素血症动物呼吸肌力降低,膈肌蛋白质羰基化和硝化水平升高1.–8.,26.. 多种自由基清除剂以及一氧化氮合酶抑制剂的施用被证明可预防败血症引起的动物通气肌功能障碍1.,3.,26.由此得出结论,各种自由基可能参与呼吸肌功能障碍26.。与此相一致的是,最近的证据表明,横膈膜纤维内血红素加氧酶活性的缺乏增加了氧化应激水平,并显著降低了这些纤维产生力量的能力6.,7.。在此基础上,可以认为在膈肌中显示最大氧化修饰的主要物种最有可能是直接参与肌肉功能的蛋白质。确实,在内毒素血症大鼠的模型中,Callahan等4.证明氧化剂改变了膈肌纤维的肌肉收缩蛋白力产生能力等27.对内毒素血症大鼠膈肌纤维内的ROS靶向的特定生理和代谢过程也有了一些了解。具体而言,参与糖酵解、三磷酸腺苷(ATP)的蛋白质中主要存在蛋白质羰基化这些酶的活性与其蛋白质羰基化水平呈负相关27.。
影响N-乙酰半胱氨酸对脂多糖所致呼吸肌功能障碍的影响
在本研究中,以3 mmol·kg预处理−1.NAC通过部分逆转呼吸肌肉功能障碍和降低大鼠膈肌中ROS产生的间接指数来保护内毒素血症。NAC和其他抗氧化剂通过清除ROS影响肌纤维功能。氧化剂去除可能影响肌肉细胞功能的确切分子机制尚未完全了解。NAC可以作为骨骼肌纤维的直接抗氧化剂,通过保护不同的分子位点,如肌浆网、肌膜和/或线粒体蛋白免受疲劳肌肉和/或内毒素血症的氧化损伤1.,9,28.,29.. 事实上,NAC在两种实验动物重复等长收缩时对肌肉都有有益的抗氧化作用9,10和人类研究30.,在重度慢性阻塞性肺疾病患者的股四头肌中31.,在内毒素血症大鼠中1.,并在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠膈肌功能障碍中14。
锰超氧化物歧化酶的诱导机制及其抗氧化作用
在本研究中,对大鼠进行3次预处理 mmol·kg−1.NAC,而不是较低剂量,诱导LPS或生理盐水注射大鼠膈膜Mn-SOD蛋白含量和活性增加。SOD存在于所有需氧生物体中,尤其是Mn-SOD似乎是生命所必需的32.. 线粒体是肌肉纤维中产生活性氧的主要来源,线粒体的完整性通过Mn-SOD清除超氧阴离子而得以保持33.Mn-SOD蛋白的表达是由包括LPS在内的不同刺激物诱导的34.,但仅证明Mn-SOD mRNA诱导的实验应谨慎看待,因为它们不一定与酶蛋白或活性水平相关。
麦克米伦乌鸦等35–37.最近的研究表明,Mn-SOD酶九个酪氨酸残基中的三个的硝化作用是由石油亚硝酸酯介导的。这种现象在生物学上的重要性在于抑制了相关模型中的酶活性35–37.通过对关键酪氨酸残基的硝化33.在此基础上,似乎需要从蛋白质表达尤其是活性方面分析Mn-SOD的诱导,因为酶的基因上调与酶含量和/或活性的同等增加并不相关,而酶含量和/或活性的增加在已知条件下会导致过亚硝酸根生成增加,如内毒素血症5.因此,从目前的研究结果可以得出结论,NAC可能作为一种间接抗氧化剂,通过清除过氧亚硝酸盐(至少在线粒体水平上)增加内毒素血症膈肌中的Mn-SOD蛋白含量和活性。与此一致,已经证实5.lps介导的蛋白酪氨酸硝化的增加仅限于脓毒症大鼠膈膜的线粒体和膜间隔。此外,本研究发现3 mmol·kg内毒素血症大鼠膈肌的蛋白酪氨酸硝化和羰基化水平均显著降低,这一结论得到了支持−1.南汽。其他研究表明,经NAC预处理的内毒素血症大鼠的外周血细胞SOD活性增加,超氧阴离子减少11,12这一假设也成立。最后,用3.0%预处理的动物的非感觉(对照)肌肉中Mn-SOD蛋白含量和活性的诱导 mmol·kg−1.NAC也可以用过氧亚硝酸盐清除机制来解释,这意味着在这些横膈膜中检测到较低水平的蛋白质羰基化和硝化。
NAC清除过氧亚硝酸盐并最终阻止膈膜Mn-SOD酶中酪氨酸残基硝化的分子靶点尚不清楚。然而,有人提出,氧化还原敏感核因子-κB可能诱导这些肌纤维内ROS和一氧化氮的产生减少,如其他模型和疾病所示38.显然,未来的研究需要充分阐明NAC诱导Mn-SOD活性的细胞和分子位点,并探索这种酶的酪氨酸硝化特性和内毒素血症肌肉的确切功能含义。
最后,值得一提的是,1.5%预处理对肌肉的影响 mmol·kg−1.NAC不同于高剂量的这种化合物所产生的。例如,在注射低剂量LPS或生理盐水后24小时,膈蛋白硝化水平没有明显改变。此外,生理盐水注射的动物肌肉中Mn-SOD含量没有增加,在LPS或生理盐水注射后(数据未显示),1.5 mmol·kg预处理的动物肌肉中Mn-SOD活性在24 h内没有改变−1.NAC。根据这些发现,作者得出结论,在这种内毒素血症的实验模型中,NAC降低了肌肉氧化应激水平并逆转了收缩力,但不是以剂量依赖的方式。存在过亚硝酸根介导的Mn-SOD失活机制的假设可以通过NAC治疗逆转,这一假设也将被证实这是因为触发这些事件很可能需要“阈值”剂量的抗氧化剂NAC。
总之,目前的研究提出了一种高剂量的间接机制N- 乙酰琥珀酸酯作为内毒性肌肉中的抗氧化剂,通过锰超氧化物歧化酶的诱导,通过阻止过亚硝酸根介导的抗氧化酶活性部位酪氨酸残基硝化。需要进一步的研究来探索这些作用和机制在脓毒症患者中的临床和治疗适用性。
致谢
作者要感谢B.de la Puente、A.Llorens、F.Sánchez和J.SellaréS在实验室提供的技术援助,P.Peretti在编制数字时提供的技术支持,以及R.Marshall在编辑手稿时提供的帮助(URMAR,IMIM-UPF,巴塞罗那,西班牙)。
- 收到2005年1月11日。
- 认可的2005年8月21日。
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