文摘
四个不同类别的慢性铜绿假单胞菌(巴勒斯坦权力机构)感染在儿童与囊性纤维化(CF)之前定义,基于气道文化接管。
本研究的目的是评估这个定义在当前作者的儿科和成人CF诊所使用临床、免疫和肺功能参数。
在随访中,193名患者,55 (34%)CF患者从未感染过巴勒斯坦权力机构,27(17%)是免费的巴勒斯坦权力机构29(18%)间歇地感染和51例(31%)是慢性感染。疾病严重程度标记,如肺功能,在慢性组明显恶化,尤其是在儿科人口。成人患者的差异较小,不再重要。巴勒斯坦权力机构抗体不同群体之间的强烈,非常高(平均±sd55.4±5.5)和高度统计学意义从慢性组中的所有其他组织。他们从来没有低,不同于其他组织组(1.8±0.6)。巴勒斯坦权力机构抗体的自由之间没有差别巴勒斯坦权力机构和间歇式组。
总之,当前作者确认达成一项协议铜绿假单胞菌根据新的定义状态和临床状态,以及水平铜绿假单胞菌抗体。
在囊性纤维化(CF),铜绿假单胞菌(巴勒斯坦权力机构肺)是最重要的病原体导致进步的肺部感染,缩短生存1。第一个定义为慢性巴勒斯坦权力机构介绍了CF感染1974年在丹麦CF中心。这是基于每月微生物检查痰,慢性感染定义为连续的存在巴勒斯坦权力机构痰为6个月,而出现短时间的定义为间歇性的感染2。这个定义包括抗体反应随后修改巴勒斯坦权力机构慢性感染需要存在的巴勒斯坦权力机构在降低气道≤6个月如果抗体反应巴勒斯坦权力机构显著增加了3。因为大多数CF中心没有看到患者每月和没有获得常规巴勒斯坦权力机构抗体测定,欧洲共识定义为慢性巴勒斯坦权力机构感染比较常用,即。至少有三个积极的文化在≥6个月与至少一个月样品之间的时间间隔4。
慢性巴勒斯坦权力机构CF感染通常是之前断断续续的感染阶段5的早期检测巴勒斯坦权力机构其次是强化治疗可以延缓慢性感染6。与这些临床数据一致,Leeet al。7,从利兹的CF中心(英国),引入了一个新的定义分类患者分成四组根据气道文化结果在过去的12个月。慢性感染是指患者呼吸道样本巴勒斯坦权力机构文化积极探索> 50%的月。断断续续的感染是指≤50%的患者巴勒斯坦权力机构积极的文化。一个病人被定义为免费巴勒斯坦权力机构当巴勒斯坦权力机构过去被隔离,而所有文化在过去12个月中保持巴勒斯坦权力机构负的。显然从未感染是指病人谁巴勒斯坦权力机构从来没有培养7。这个定义评估在儿科CF李人口et al。7并适当地证明对患者进行分类与相关临床分数和调查。
收购巴勒斯坦权力机构可能发生在早期,但可能仍未被发现的频率取决于气道取样和样品的地方了吗8。的诊断巴勒斯坦权力机构收购是基于痰细菌培养或被咳嗽棉签对病人无法咳出痰痰,主要是儿童。咳嗽的负面预测值拭子巴勒斯坦权力机构是高达95%的阳性预测值低只有44%9。
它已被证明巴勒斯坦权力机构抗体反应与炎症和肺组织损伤的程度10,11。因此,抗体的水平巴勒斯坦权力机构可能区分慢性和断断续续的感染。
本研究的目的是评估的定义et al。7(进一步称为利兹标准)为慢性巴勒斯坦权力机构在儿科感染,以及成人,CF人口鲁汶诊所(比利时)。这个概要文件的病人的不同群体巴勒斯坦权力机构状态与临床和生化参数比较,以及通过测量的水平巴勒斯坦权力机构四组抗体,如李的研究et al。7。
患者和方法
病人和控制
162年的随访的193例患者(120 > 18岁的年龄≤18岁至73岁)在鲁汶CF中心,至少有四个气道文化导致不同的月分布在今年,以及巴勒斯坦权力机构抗体的测量,是可用的。不到四患者痰培养被排除在外,以及CF患者肺移植后(n = 13)。在所有患者中,CF的诊断是依照Rosenstein诊断标准12。病人特点是表1中给出⇓。CF跨膜调节器(雌性生殖道)基因突变分析所有患者。突变是归类为类电流-电压,如在雌性生殖道突变财团13。为不同的巴勒斯坦权力机构组,CF基因型在这些不同种类分类(I-II-III或IV-V)14- - - - - -16。
通常,病人参加中心每3个月。当发作或并发症发生,额外的访问计划。总共162名患者至少有四个痰结果分布在不同的包容。病人没有慢性巴勒斯坦权力机构感染,隔离巴勒斯坦权力机构从痰或上呼吸道随后开始的治疗根据丹麦协议6:吸入粘菌素口服环丙沙星一起3个月3个月3周。在每一个诊所访问,呼吸道样本获得(咯血痰或咳嗽拭子样本)。当临床表明,诱导痰或支气管镜检查。基于气道文化中获得的结果,患者分成四组根据利兹标准:从来没有,免费的巴勒斯坦权力机构、间歇或慢性巴勒斯坦权力机构感染。
对于慢性感染患者,总天数接收注射。抗生素治疗是计算从2001年到2003年。第一个隔离的日期巴勒斯坦权力机构的发病年龄,以及慢性感染根据欧洲的定义,从数据库中。
为验证巴勒斯坦权力机构抗体检测,对照组包括60 non-CF患者平均年龄为22.4岁(范围)(1.8 - -48.9)参加门诊因为呼吸系统疾病,如支气管哮喘、反复咳嗽或复发性感染。在这些患者中巴勒斯坦权力机构从呼吸道分离的文化。
目前的研究是经医院伦理委员会批准,同意从患者获得或父母(s)。
气道的文化
口水在无菌塑料一次性容器收集。痰,咳嗽咽拭子通常存储在环境温度和4 h内收集处理。口水拭子和接种和孵化到几个媒体的隔离巴勒斯坦权力机构使用琼脂哥伦比亚和其他潜在的病原体(CMO331;英国贝辛斯托克Oxoid) 5%去纤维蛋白的马血,MacConkey琼脂(CM0007;Oxoid)和甘露醇盐琼脂(CM0085;Oxoid)。所有的媒体都在37°C孵化耗氧48 h。不同表型确认为从每个病人的痰巴勒斯坦权力机构采用常规鉴定方法的组合(增长42°C,积极的氧化酶,色素生产),以及Vitek - 2系统(BioMerieux,马西l 'Etoile,法国)和细胞脂肪酸气相色谱的分析。
anti-pseudomonas抗体的ELISA检测
maxisorp (Nunc Kamstrupvej、丹麦)ELISA 96孔板涂层在室温下60分钟了假单胞菌提取物(6.66 mg·L−1在PBS杜尔贝科)。提供的抗原提取是好心的作者之一(n . Høiby)和由水溶性提取物通过17 o属最常见的声波降解法巴勒斯坦权力机构(标准抗原(St-Ag) - 17)如前所述17。涂层后,盘子洗了三次200µL PBS含有0.1%渐变20。此后,盘子被1 h与阻塞在室温下稀释缓冲(PBS杜尔贝科+ 0.1%渐变+ 15 g·L−1氯化钠)。血清稀释1:40,000了阻塞稀释缓冲,添加到井,在室温下和孵化1 h。洗涤三次后200µL PBS中含0.1%渐变peroxidase-conjugated反人类免疫球蛋白(Ig) G(北欧免疫实验室、蒂尔堡、荷兰)的稀释1:5,000(阻碍稀释缓冲)添加到井中。板是在室温下培养1 h。此后,3.3′-5.5′-tetramethylbenzidine添加色彩发展。60分钟后,反应是停在酸原液含有盐酸1 n和3 n H2所以4。板块在450 nm读。
血清池获得丹麦CF患者殖民巴勒斯坦权力机构100年非盟分配作为参考。ELISA方法前面已经详细描述。积极的预测价值测试诊断慢性巴勒斯坦权力机构感染92%(诊断特异性)和负面测试的预测价值排除慢性感染93%(诊断灵敏度)18,19。
肺功能
年龄的6年,每三个月进行肺功能测试。用力肺活量(FVC)和在一秒用力呼气量(FEV1)测量主屏幕肺活量计(Jaeger Hoechberg,德国)据美国胸科学会的指导方针20.。值表示为预测正常的百分比值根据修改后的参考努森方程21,22。最好的价值从2003年被分析。营养状态被表示为在身高体重比例(W / H %)23。
统计方法
数据进行正态分布Kolmogorow-Smirnov测试测试。对于一个正态分布的变量,用t检验;否则,非参数统计检验。分类数据的评估,费舍尔的确切或卡方测试。的假定值≤0.05被认为是显著的。
结果
验证不同的殖民群体根据利兹标准
的CF患者,55(34%)从未感染过巴勒斯坦权力机构,27(17%)是免费的巴勒斯坦权力机构29(18%)间歇地感染和51例(31%)是慢性感染。患者的平均年龄为11.3,15.2,13.8和21.5年不会,免费的巴勒斯坦权力机构分别,间歇和慢性组(表2所示⇓- - - - - -⇓4⇓)。患者年龄≤18年,只有12%的慢性感染,而63%的成年患者(年龄> 18岁)慢性巴勒斯坦权力机构感染。慢性感染的患病率随着年龄的增加。不同年龄段的受感染的患者数量是如图1所示⇓。
![图1 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/27/5/937/F1.medium.gif)
的慢性铜绿假单胞菌(巴勒斯坦权力机构每年龄组)患者。病人的总数(□)13日,48岁的39岁年龄组和62 0 - 5,6 - 12,分别13-18和> 18岁。殖民的病人的数量(▒)1,1,每个各自的10岁至39岁年龄组。
不同的疾病严重程度标记如FVC, FEV1,总免疫球蛋白和W / H %之间的不同组织和慢性组(表2明显恶化⇑)。FEV方法之间的差异1被显著的所有组除了免费的吗Pa与间歇组(未配对t检验;表2⇑)。W / H %降低慢性组。这是从来没有明显不同(p < 0.005)和间歇(p < 0.001),但相比的差异没有达到意义的自由巴勒斯坦权力机构组(p = 0.09;未配对t检验)。在儿科年龄组(≤18岁)疾病严重程度参数的差异更加显著(表3所示⇑在患者年龄> 18岁),而这些差异不再显著(表4所示⇑)。
当看着并存病,胰腺癌患者不足的数量在儿科和成人类似组(91 100胰腺不足年龄≤18岁与58 62岁> 18岁;卡方p =无意义的)。可以预期,CF-related糖尿病患者的数量(CFRDM)在成人高集团(12 62与一个儿科的100组;卡方p = 0.001)。
Co-pathogens进行分析巴勒斯坦权力机构组。总体而言,66%的患者有一个隔离金黄色葡萄球菌。年代球菌感染显著降低(p < 0.01),慢性组(51)25日与其他组(40 55的永远,19 27免费巴勒斯坦权力机构,24日29日间歇组)。与其他革兰氏阴性细菌感染(Stenotrophomonas maltophilia, Alcalygenes xylosoxidans和假单胞菌spp)被发现在20%的病人。从未组发生率明显降低(p < 0.01),而与其他组(四40从未集团27日的10个免费的巴勒斯坦权力机构组,八29间歇集团和11个51慢性组)。感染伯克不过和methicillin-resistent金黄色葡萄球菌在当前研究人群发病率低(分别为3和10 162)。
目前作者评价黏液状的菌株的存在根据利兹标准(定义为≥50%的隔离黏液状的)。正如所料,慢性感染与黏液状的感染密切相关(65%对慢性组内黏液状的患者),而间歇组只有10%的黏液状的巴勒斯坦权力机构菌株。
殖民国家在2002年和2003年之间的变化
大多数的交换发生的间歇性和自由之间巴勒斯坦权力机构组。2002年断断续续的集团,13例(8%)患者改为免费巴勒斯坦权力机构在2003年(在大多数病人假单胞菌种虫害是间歇性的黏液状的类型)和10(6.2%)免费巴勒斯坦权力机构病人改变了断断续续的。除了八个(4.9%)病人从永远不要断断续续,只有小交流发生在其他组:间歇集团的一个(0.6%)病人慢性2003年,2002年改为两个免费(1.2%)巴勒斯坦权力机构慢性病人改变,慢性病人改变了自由巴勒斯坦权力机构慢性病人,一个在2002年改为2003年断断续续的。
突变分析
慢性感染组48例(94.1%)患者有两类i ii或III突变和三个(5.9%)患者要么一个突变分为IV-V (n = 2)或两个未知突变(n = 1)。其他组,总共89名(79.5%)患者有两类I-II-III突变,23例(20.5%)患者任何一个IV-V突变(n = 9),和一个或两个未知突变(n = 8和n = 5,分别;确切概率p = 0.01)。< 1图则= 5 pt ? >
具体的铜绿假单胞菌抗体
全细胞的特定血清免疫球蛋白巴勒斯坦权力机构通过ELISA抗原测定的2003 - 2004。血清样本外呼吸加重和常规访问CF中心期间,病人需要其他血常规检查,包括总血清免疫球蛋白。
巴勒斯坦权力机构免疫球蛋白抗体不同群体之间的强烈(图2所示⇓)。抗体是很高的(意味着±扫描电镜55.4±5.5)和高度统计学意义从慢性组中的所有其他组织。抗体也很低(1.8±0.6)和不同于其他组没有组和对照组(1.37±0.22)。巴勒斯坦权力机构免疫球蛋白抗体的自由之间没有差别巴勒斯坦权力机构组(5.3±1.4)和间歇组(8.4±5.5;未配对t检验;表2⇑- - - - - -⇑4⇑)。
![图2 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/27/5/937/F2.medium.gif)
盒子,晶须的阴谋铜绿假单胞菌(巴勒斯坦权力机构)抗体值控制病人和囊性纤维化患者不同巴勒斯坦权力机构的地位。水平线表示中位数。盒子,须代表se分别和最小/最大值。搞笑:免疫球蛋白。o:离群值。
具体的截止电平巴勒斯坦权力机构免疫球蛋白g值确定在当前的研究中人口使用接收器操作曲线。17盟的最佳组合值敏感性(88%)和特异性(96%)区分慢性感染患者的队列。阳性预测值为92.1%,阴性预测值为93.9%。
慢性感染和总时间天注射。抗生素治疗
的持续时间巴勒斯坦权力机构感染影响特定的水平巴勒斯坦权力机构抗体,但相关性弱(皮尔森r = 0.47)虽然显著(p < 0.001)。
天接受的总数注射。抗生素也从2001年到2003年显著相关,但弱,特定的免疫球蛋白抗体的水平巴勒斯坦权力机构(皮尔森r = 0.432;p < 0.001)。类似的之间的相关性被发现注射。皮尔逊疗法和免疫球蛋白(r = 0.413;p < 0.001)。
讨论
一个统一的定义巴勒斯坦权力机构状态反映了临床和微生物状态的CF患者是很重要的:1)决策有关病人军团为了防止相互传染;2)治疗的强度(根除巴勒斯坦权力机构与与吸入维持治疗抗生素);3)预后的评估;4)研究或中心评估的目的(如。病人军团对慢性病的发病率巴勒斯坦权力机构感染)。在这项研究中,李et al。7,一个新的分类巴勒斯坦权力机构介绍了感染CF和四个不同组的巴勒斯坦权力机构感染状况定义根据痰培养获得在过去12个月。气道的大多数文化在当前患者每3个月进行的,这个定义比欧洲更适用的共识的定义4,三个积极的口水与≥6个月个月间隔评估。此外,目前的数据证实,这四个不同的国家巴勒斯坦权力机构地位与儿科的临床地位协议CF患者遵循目前作者的中心。肺功能值、总免疫球蛋白和慢性和其他营养状况之间的差距显著巴勒斯坦权力机构组。然而,对于成人CF患者,上述参数没有显示类似的差异四个巴勒斯坦权力机构最多组时使用的参数。这可能是由于小数量的成人患者中在当前分析和病情加重的患者的慢性组收到了移植(n = 13)或已故,改善慢性组剩下的病人的数据(FEV中值1% pred移植组移植前21.3%的平均年龄22.5岁)。较低的平均年龄在成人患者的慢性组(尽管不是统计不同)与其他群体相比可能支持这个解释。然而,在长期巴勒斯坦权力机构感染,其他因素可能成为疾病的严重程度同样重要,如CFRDM,修饰基因,并长期与其他病原体感染,等。最后,对这种老群,为早期治疗策略巴勒斯坦权力机构感染和慢性肺部感染一般是不同的在儿童早期大多数患者没有照顾一个专门的CF中心。更多的数据需要大量的成人CF患者评估利兹标准是否CF人口是一个有价值的工具。
断断续续的和自由的巴勒斯坦权力机构组织根据年龄之间没有显著性差异,肺功能,W / H %,总免疫球蛋白和具体巴勒斯坦权力机构在当前的研究中人口的抗体。最可能的原因是,这两组病人交换过程中。支持了这个观点观察到交换的感染状况在2002年至2003年之间,主要是观察之间的自由巴勒斯坦权力机构和间歇组。根除长期甚至黏液状的巴勒斯坦权力机构例外,但是之前已经报道过吗24。然而,可以说是否组织之间的交换是一个真正的改变巴勒斯坦权力机构感染状态,或者至少在一些患者中,由于产物的内在弱点利兹标准。所需的最小样本数量使用由李利兹标准没有定义et al。7,尽管他们国家抽样应采取每三个月为最低。月度抽样将会使分类更加准确,但对于大多数CF中心是不现实的。在这项研究中,李et al。7抽样的频率范围1 - 12个月·年−1,意味着每年超过7样品的数量。目前作者获得样本病人至少每3个月一起在常规诊所不定期发作,建议在欧洲共识文件4。患者包括只有在至少四个痰结果从不同的几个月。
除了文化的数量,样品的起源可能影响的分类巴勒斯坦权力机构状态(咯血痰或支气管镜的样本与咳嗽棍)。咳嗽咽拭子的阳性预测值低可能是解释类黏蛋白的存在巴勒斯坦权力机构患者分为间歇性地感染9。在两个患者的“意想不到”从慢性转向自由巴勒斯坦权力机构和慢性间歇性的几乎所有的文化都是咳嗽拭子。在第一个病人,口水了答:xylosoxidans每一次在2003年,病原体可能指向一个转变。
为了进一步支持定义的类别利兹CF中心,先前描述巴勒斯坦权力机构全细胞抗体ELISA测定18引入当前作者的诊所。一个巴勒斯坦权力机构阳性文化与负相结合巴勒斯坦权力机构抗体滴定度表明早期浅表感染而不是先进的慢性感染4。为巴勒斯坦权力机构抗体测定,几个pseudomonal抗原和各种技术已经在文献中报道。大多数研究使用巴勒斯坦权力机构全细胞溶解产物作为抗原显示上升过程中早期抗体滴定度巴勒斯坦权力机构感染,感染的抗体水平和时间之间的关系,和减少抗体水平与密集的抗生素治疗1,8,3,19,25- - - - - -29日。由于这些特点,用提取的17巴勒斯坦权力机构血清型(St-Ag - 17)作为抗原。
特定的水平巴勒斯坦权力机构抗体是慢性组高,明显不同于其他组,确认定义为慢性巴勒斯坦权力机构组CF患者严重巴勒斯坦权力机构肺部感染导致炎症和肺组织破坏。尽管没有成年人的显著不同的临床参数组巴勒斯坦权力机构抗体水平最高的慢性组和这种差异显著提高而从不和免费的巴勒斯坦权力机构组。
尽管相关性弱,慢性的持续时间巴勒斯坦权力机构感染和接受的天数注射。治疗与巴勒斯坦权力机构抗体水平在当前的研究中。的巴勒斯坦权力机构抗体水平可以随访评估反的成功巴勒斯坦权力机构治疗29日。在患者长期殖民巴勒斯坦权力机构,一个庞大而突然增加巴勒斯坦权力机构抗体水平是一个糟糕的预后因子19,30.。不幸的是,目前的数据不包括连续测量巴勒斯坦权力机构抗体值,但是目前作者计划执行这个分析至少每年个别病人的随访。
鲁汶CF中心慢性很低巴勒斯坦权力机构感染率,尤其是在儿科年龄组(总计只有12%与18%相比研究李et al。7)。这是在协议与有利的临床状况。事实上,孩子们分类每个nonchronic组总免疫球蛋白水平和一个非常低的水平相对较低的具体巴勒斯坦权力机构抗体,从而确认适当的分类。
结论
这是第一个的验证利兹标准在另一个囊性纤维化诊所和成人患者的第一评价。目前作者确认达成一项协议铜绿假单胞菌状态和临床状态的水平铜绿假单胞菌抗体,从而确认这是一个可行的分类。而临床参数对儿童慢性明显不同铜绿假单胞菌感染与其他群体相比,成人患者的差异较小,不再重要。慢性铜绿假单胞菌感染在当前儿科患者低和赞同低铜绿假单胞菌在这一人群抗体水平。
确认
作者想感谢微生物实验室的技术人员建立并执行巴勒斯坦权力机构Ag ELISA。作者还要感谢大肠Aergeerts和w . Arijs数据管理和技术援助的准备这个手稿。
- 收到了2005年8月26日。
- 接受2005年12月10日。
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