摘要
特发性肺纤维化(IPF)/通常的间质肺炎(UIP)是最严重的特发性间质肺炎,需要治疗目标。来自IPF / UIP患者的手术肺活检标本表现出CC趋化因子受体(CCR)7的焦点表达,但这些CCR7阳性细胞的同一性未知。本研究的目的是检测从IPF / UIP和正常外科肺活检标本生长的原发性成纤维细胞的CCR7表达的功能和信号意义。
原发性成纤维细胞由IPF / UIP和正常患者的手术肺活检标本培养。使用免疫细胞化学分析,基因阵列,Taqman实时PCR和迁移,增殖和蛋白质印迹测定分析用CC趋化因子配体(CCl)21处理的成纤维细胞进行分析功能,转录和蛋白质组差异。
CCR7在IPF/UIP成纤维细胞中表达,而在正常成纤维细胞中不表达。IPF/UIP成纤维细胞(而非正常成纤维细胞)暴露于CCL21时表现出显著的迁移和增殖反应,而CCL21受到百日咳毒素或CCR7中和抗体的抑制。IPF/UIP成纤维细胞暴露于CCL21改变了这些细胞中丝裂原激活蛋白激酶激酶1/2、细胞外信号调节激酶激酶1/2和核糖体S6激酶(90kda)的磷酸化状态;百日咳毒素或ccr7特异性小干扰RNA可使其失效。
这些数据一起证明CC趋化因子配体21调节特发性肺纤维化/通常间质肺炎成纤维细胞的功能性质,但不是正常的成纤维细胞。
具有常见的间质肺炎(UIP)组织学模式的特发性肺纤维化(IPF)是最严重的特发性肺炎肺炎(IIP)1.IPF/UIP以老年男性为目标,中位生存期为确诊后3年2那3.,表明目前的治疗方法并不令人满意4..IPF / UIP由高度合成和增殖细胞的居民和/或募集到肺部,其纤维增生活性导致胶原蛋白在间质组织中过度沉积,导致重塑和最终阻碍氧气交换。IPF / UIP的关键诊断组织学特征包括时间异质性,具有致密瘢痕和纤维束焦点破坏的正常肺组织5..目前,IPF/UIP唯一成功的治疗方法是肺移植;因此,迫切需要为这些患者找到治疗靶点。最近在IPF/UIP肺活检样本中发现的新靶点集中在改变的转录本和蛋白表达6.那7.和源自肺活检标本的原发性成纤维细胞8.那9..
一组转录本和相应的蛋白质是趋化因子(趋化因子)。10..趋化因子是小,可溶的膜结合蛋白,基于其N-末端的半胱氨酸分类。这些蛋白质通过在细胞表面上通过G蛋白偶联受体(GPCR)来信号11并影响许多细胞功能,包括迁移、增殖和粘附。最近对IIP和正常患者外科肺活检(SLB)标本中趋化因子受体(CCR)受体转录和蛋白表达的检查显示,IPF/UIP SLB标本中CC趋化因子受体(CCR) 7表达强烈的局灶性和弥漫性间质模式,这在正常SLB标本中是不存在的12.CCR7在免疫细胞上表达(树突和T细胞13),产生胰腺产物的胶原蛋白(纤维纤维)14那15)和源自乳腺的肿瘤细胞16;但是,IIP SLB样本中的CCR7表达与表征这些细胞的标记不相关12.CCR7配体,CC趋化因子配体(CCL)19和CCL21的整个肺转录物水平在检查的所有SLB样本中都高,但IIP和正常活组织检查标本之间的蛋白质水平没有差异12.
考虑到IIP SCRB样本中CCR7的间质表达,假设该趋化因子受体可以在SLB衍生的原发性成纤维细胞中表达和功能上活性。在本研究中,在IPF / UIP中观察到迁移和增殖活性,但不会暴露于CCL21的正常成纤维细胞。IPF / UIP成纤维细胞暴露于CCL21导致改变与细胞外信号调节激酶(ERK)1/2信号传导途径相关的蛋白质的磷酸化,其被Pertussis毒素(PTX)或CCR7小干扰RNA(siRNA)阻断。因此,这些数据表明IPF / UIP成纤维细胞对CCR7依赖性活化响应,使CCR7在IPF / UIP中具有吸引力的靶标。以前报道了这些研究的一些结果17.
材料和方法
病人
密歇根大学医学院(Ann Arbor, MI, USA)的机构审查委员会批准了本研究。所有患者在进行纤维支气管镜检查之前进行了临床评估,包括胸部x线摄影、肺功能测量和薄层计算机断层扫描12.
成纤维细胞的分离和培养
如前所述,从组织学证实的IPF/UIP或组织学正常的SLB标本中机械分离和培养成纤维细胞18.简单地说,SLB标本被机械分散到150cm内3.用Dulbecco的改良鹰媒介(DMEM)烧瓶补充有15%胎牛血清(FBS),青霉素(100u·ml-1),链霉素(100μg·ml-1)和Fungizone (0.25 μg·mL-1).贴壁细胞在37°C、5%二氧化碳条件下生长融合,并在分裂和电镀前传代6次。从第7代到第11代使用成纤维细胞进行实验。
蛋白质收集和RNA提取
主要成纤维细胞以2.5×10的密度涂在12孔组织培养板中5. cells·mL-1.洗涤后,500 μL含0.5%胎牛血清的DMEM (DMEM-FBS)单独或与10 ng·mL的DMEM联合使用-1将重组CCL19或CCL21加入二份孔中24小时。收集无细胞上清液,用于可溶性蛋白质含量分析。向每个孔中加入三唑(250μl),并根据制造商的方向(Invitrogen,Carlsbad,Ca,USA)提取RNA。
基因阵列
人类CCR7, CCL19和CCL21基因表达分析使用SuperArray (Carlsbad)的一个特定的趋化因子和趋化因子受体基因阵列。
塔克曼分析
如前所述,使用7500 RT- pcr系统(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA),通过实时定量RT- pcr分析CCR7和还原甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的表达19.所有抗体和探针均购自Applied Biosystems。将CCR7的表达归一化至GAPDH,然后计算其表达变化程度。
免疫细胞化学
根据制造商的说明(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA),使用辣根过氧化物酶(HRP)-氨基乙基咔唑细胞和组织染色试剂盒,免疫细胞化学分析人CCR7表达。
成纤维细胞迁移测定
在存在或不存在10 ng·ml的情况下,将原发性IPF / UIP和正常成纤维细胞加入到8μmtranswell插入物中的6孔细胞培养板中-1使用CCL19或CCL21 24小时。将井底迁移的成纤维细胞固定,苏木素染色并计数。为了检测受体或配体的特异性,5 μg·mL-1向每个孔中加入抗人CCR7,CCL19或CCL21抗体。作为一种对照,5μg·ml-1加入免疫球蛋白(Ig)G或10μLPBS。
增殖试验
在24孔组织培养板中评估成纤维细胞的增殖能力,使用[3.胸苷激酶结合,如上所述9..
Bioplex蛋白质测定
分析无细胞上清液(对活化,正常T细胞表达和分泌的)/ CCl5,干扰素(IFN)-α,Eotaxin,单核细胞化学抑制剂蛋白-1(CCL2),血小板衍生的生长因子-b那growth-related oncogene-α/CXC chemokine ligand (CXCL) 1, IFN-γ-inducible protein 10 (CXCL10) and interleukin-8 using an extracellular antibody kit according to the manufacturer’s instructions (Invitrogen), with a Bio-Rad Luminex Bio-Plex 200 System (Bio-Rad, Hercules, CA, USA).
免疫印迹分析
在无血清DMEM中饥饿成纤维细胞24小时,然后单独用DMEM-FBS处理或与10ng·mL组合处理-1重组CCL19或CCL21的不同时间。其他成纤维细胞培养物用200 ng·mL预处理-1或在血清剥夺和治疗前转染50 nM ccr7特异性siRNA。用由1% Triton X-100、50 mM氟化钠、2 mM乙二胺四乙酸(乙二胺四乙酸)、200 μM原钒酸钠、5 μg·mL组成的500 μL冰冷裂解缓冲液裂解成纤维细胞-1胃蛋白酶,5μg·ml-1在PBS (pH 7.4)中加入白细胞介素和100 nM calyculin。采用Bradford法测定总蛋白含量。含20 μg总蛋白的样品被分离、转移和阻断20..剥离粉末抗体的膜被剥落(恢复)TM剥离缓冲区;Pierce, Rockford, IL, USA),清洗和重新印迹GAPDH,装载控制。Western分析中使用的抗体包括单克隆抗人CCR7抗体(R&D Systems),针对p44/p42丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化抗体,MAPK激酶1/2,核糖体S6激酶(90 kDa;p90RSK)、应激活化蛋白激酶(SAPK)/ERK激酶1/MAPK激酶4、SAPK/c-Jun n端激酶(JNK)、c-Jun II、p38 MAPK和MAPK激酶3/MAPK激酶6(均来自Cell Signaling, Danvers, MA, USA)、抗gapdh和针对平滑肌α-肌动蛋白(α-SMA;Abcam, Cambridge, MA, USA)。使用的二抗分别是酶标抗兔、抗小鼠和抗生物素抗体(细胞信号)。
转染的核
使用Qiagen Custom Synthesis Site创建靶向CCR7的SIRNA21.通过Lipofectamine 2000 (Invitrogen)转染IPF/UIP肺成纤维细胞来测试两种siRNA候选细胞的有效性。如前所述,更有效的siRNA (AGCGGACATCAGCTGGTCAA)被转染22.
统计分析
所有结果均以平均值±表示SEM..采用单因素方差分析和Tukey-Kramer多重比较检验检测IPF/UIP与正常组之间的差异。显著性设置为p值<0.05。
结果
CCR7,CCL19和CCL21在正常和IPF / UIP成纤维细胞中表达
使用特定的人趋化因子和趋化因子受体超阵列分析来自三个正常和三个IPF / UIP SLB衍生的成纤维细胞的RNA。该分析显示,CCR7,CCL19和CCL21在两组中存在(图1⇓),但在IPF/UIP系中CCR7的表达明显高于正常系(图1a)⇓).进一步分析使用Taqman RT-PCR的基因表达证实了本研究中使用的所有成纤维细胞线的CCR7,CCL19和CCL21的转录物的存在(数据未示出)。因此,这些数据表明CCR7,CCL19和CCL21基因转录物存在于来自SLB材料的正常和IPF / UIP成纤维细胞中。
正常和IPF/UIP成纤维细胞的ccl21定向迁移
CCR7表达上调成熟树突细胞,允许迁移到淋巴结以进行免疫激活23.对某些乳腺肿瘤16和黑色素瘤细胞24, CCL21活化CCR7在转移中起重要作用。在本研究中,CCL19(数据未显示)和CCL21(图3a)⇓)促进IPF / UIP但不是正常成纤维细胞的迁移,CCL21增强迁移约7倍,与仅在暴露于DMEM的IPF / UIP成纤维细胞中观察到(图3A⇓).为了验证CCR7依赖性,5μg·mL-1将IgG、抗人CCR7抗体或抗人CCL21抗体加到三个重复孔中。尽管IgG没有改变IPF/UIP成纤维细胞的迁移,抗ccr7或抗ccl21抗体显著抑制了这些成纤维细胞的迁移反应(图3b)⇓).预处理IPF / UIP成纤维细胞,200ng·mL-1PTX也抑制ccl21诱导的迁移(数据未显示)。总之,这些数据表明CCR7的激活促进了IPF/UIP的迁移,而不是正常的成纤维细胞。
CCR7活化和IPF / UIP成纤维细胞增殖
IPF / UIP的特征在于由于肺部的严重肺泡和间质瘢痕形成,部分地是大量纤维增塑剂。在本研究中,所有三种IPF / UIP成纤维细胞线表现出增强基线(IE。单独DMEM)的增殖率,大约是研究的正常成纤维细胞的三倍(图3c⇑d).另外,10 ng·mL-1CCL21,但不是CCL19(数据未显示),与单独暴露于DMEM的培养物相比,显着增加了所有IPF / UIP成纤维细胞的增殖性质(图3C⇑).正常成纤维细胞的增殖性能未通过CCL19(未示出)或CCL21(图3D)的存在而改变(图3D⇑).
CCR7激活和CCL5由原发性IPF / UIP成纤维细胞产生
以前的研究表明,趋化因子可以在各种细胞类型中驱动其他趋化因子的表达。例如,添加CCL5至IPF / UIP成纤维细胞培养物显着增强了CCl7的表达,IPF / UIP中的推定生物标志物8..为了确定CCR7激活通过CCL21改变了IPF / UIP和正常成纤维细胞的趋化因子产生性质,在可溶多重蛋白质分析之前将两组成纤维细胞暴露于CCL21 24小时。如图4a所示⇓,CCL5存在于IPF / UIP和正常成纤维细胞培养物中,CCL21在IPF / UIP中显着增加CCL5水平,但不正常成纤维细胞。这些数据与先前研究的数据一起表明CCR7活化增强了IPF / UIP成纤维细胞的趋化因子。
CCL21对原发性IPF/UIP及正常成纤维细胞α-SMA表达的影响
α-SMA是肌成纤维细胞的蛋白标记物,是一种高度合成的成纤维细胞亚型25.鉴于CCL21对IPF / UIP成纤维细胞合成趋化因子的深度影响,CCR7配体是否改变了这些细胞中α-SMA的表达。Western印迹分析表明,IPF / UIP成纤维细胞表达比正常成纤维细胞更高水平的α-SMA(图4B⇑),与IPF/UIP成纤维细胞更强的合成特性一致。然而,α-SMA的表达不受CCL21的影响(图4b)⇑),表明CCR7活化不是成纤维细胞分化成肌纤维素细胞的主要刺激。
IPF/UIP成纤维细胞中CCL21激活的CCR7和p44/p42 ERK信号通路
众所周知,MAPK途径调节许多重要的细胞功能。每种途径对细胞周期,生长和迁移具有独特的效果,部分原因是通过不同的刺激激活每种途径,包括生长因子,应激和炎症细胞因子。由这些刺激引发的信号传导级联涉及MAPK激酶激酶,MAPK激酶和MAPK的连续磷酸化。磷酸化后,MAPKS进入核并激活一个或几个下游转录因子,导致生物反应。为了确定活化的CCR7对MAPK途径的影响,在30s和2,5和30分钟内收集未处理和CCL21活化的成纤维细胞相关蛋白,ERK 1/2,P38和JNK MAPK途径的Western印迹分析了。尽管信号蛋白的磷酸化变化与P38和JNK途径有关(未示出的数据),但ERK 1/2途径显示CCL21除IPF / UIP成纤维细胞培养物之后的磷酸化变化的证据。鼠白血病病毒癌基因同源物1(C-RAF),该途径的MAPK激酶激酶(未显示数据),也没有发现。图5.⇓-⇓⇓8.⇓总结CCL21对正常和IPF / UIP成纤维细胞中ERK 1/2依赖性活化的影响。
CCL21暴露后IPF/UIP成纤维细胞中MAPK激酶1/2的磷酸化
休息(IE。血清饥饿的)初级正常和IPF / UIP成纤维细胞线没有表现出组成型活化的MAPK激酶1/2(图5A⇑).单独添加DMEM-FBS致正常成纤维细胞导致MAPK激酶1/2的磷酸化的时间依赖性增加,其在5分钟达到峰值,并通过添加10ng·mL不变-1CCL21(图5⇑).虽然单独使用DMEM-FBS治疗促进IPF / UIP成纤维细胞中MAPK激酶1/2的类似时间依赖性激活,但加入10ng·mL-1在第2和5分钟,CCL21导致磷酸化增加,在30分钟磷酸化恢复到DMEM-FBS水平(图5a)⇑).总之,这些数据表明,暴露于CCL21的IPF/UIP成纤维细胞中MAPK激酶1/2的加速激活。
CCL21和ERK 1/2在IPF / UIP成纤维细胞中的磷酸化
休息的初级正常和IPF / UIP成纤维细胞表现出组织型ERK 1/2磷酸化,但与IPF / UIP成纤维细胞相比,正常成纤维细胞的基线活性较高(图5B⇑).单独用DMEM-FBS处理正常成纤维细胞,在5分钟内得到峰ERK 1/2活化,加入10ng·mL-1CCL21给出了类似的模式,在这些培养物中具有总体较低的ERK 1/2磷酸化(图5B⇑).单独用DMEM-FBS处理的IPF / UIP成纤维细胞培养物产生类似的ERK 1/2磷酸化图案;然而,活化的大小远高于正常成纤维细胞。在暴露于CCL21和DMEM-FBS的IPF / UIP成纤维细胞中,与单独暴露于DMEM-FBS的IPF / UIP培养物相比,2分钟的磷酸化显着增加(图5B⇑).由于IPF/UIP成纤维细胞中构成性erk1 /2磷酸化水平较低,因此DMEM-FBS单独或与10 ng·mL联合使用后磷酸化水平较低-1CCL21是静息IPF/UIP成纤维细胞的60 - 125倍(图5b)⇑).
IPF / UIP成纤维细胞中的CCL21和90 KDA核糖体S6激酶磷酸化
在骨髓形成中,p90RSK被CXCL12激活26.本研究显示,p90RSK(位于erk1 /2下游)在静息正常和IPF/UIP成纤维细胞中处于磷酸化状态(图5c)⇑).无论CCl21的存在如何,P90RSK激活的变化在正常成纤维细胞培养物中类似。相比之下,与在未处理的培养物中观察到的相比,在所有时间点在所有时间点的CCL21在IPF / UIP成纤维细胞培养物中的存在增强了这种转录因子〜2.5倍的磷酸化(图5C⇑).这些数据在一起表明CCR7是IPF / UIP成纤维细胞中的活性受体,并且该受体至少部分地呈现信号,通过ERK 1/2途径。
用SiRNA和CCL21介导的ERK 1/2活化与PTX或CCR7基因沉默的G蛋白抑制
为了证实CCR7在IPF/UIP成纤维细胞激活中的作用,我们进行了额外的研究,以确定PTX(一种抑制性G蛋白(G一世)和G.O.抑制剂27)或sirna介导的CCR7基因沉默可消除CCL21对erk1 /2激活的影响。如图8a所示⇑,转染特定的CCR7 siRN一种在用DMEM-FBS治疗之前通过转染后将该受体的蛋白质表达减少〜70%。抑制CCR7蛋白表达持续到本研究的30分钟持续时间。在IPF / UIP成纤维细胞中,既不是Lamin-A / C特异性siRNA也不是随机siRNA受CCR7的CCR7蛋白表达(图8A⇑).这些数据显示CCR7已成功瞄准体外使用特定的siRNA。在IPF / UIP成纤维细胞培养物中的PTX或CCR7 siRNA的存在还原MAPK激酶1/2,ERK 1/2和P90RSK磷酸化以单独暴露于DMEM-FBS的培养物中观察到的水平(图8B⇑).总之,这些数据显示CCL21诱导的MAPK激酶1/2,ERK 1/2和P90RSK磷酸化取决于功能性G蛋白偶联的信号传导事件和CCR7。
讨论
一些研究表明,原发性人肺成纤维细胞对趋化因子表现出促纤维化激活28-31他们是这方面的有力来源8.那29那30..本研究解决了CCR7表达由衍生自SLB样本的原发性IPF / UIP成纤维细胞的作用。与源自切除的肺肿瘤的正常缘衍生的初级正常成纤维细胞形成鲜明对比,从组织学证明的IPF / UIP SLB样本培养的近100%的成纤维细胞表达CCR7,一种受体曾经被认为限于血包血细胞。激活CCR7,通过CCL21比CCL19更能促进和/或显著增强IPF/UIP成纤维细胞的迁移、增殖和趋化因子合成特性。外源性CCL21以ccr7依赖的方式激活ERK 1/2 MAPK通路。因此,目前的研究表明,IPF/UIP成纤维细胞获得了对CCR7配体(无论疾病状态如何,在肺中大量表达)的应答能力12),这种反应性可能在IPF/UIP的过度纤维增生中起主要作用。
CCR7在slb衍生的IPF/UIP中而非正常成纤维细胞的存在提出了前成纤维细胞起源的关键问题。当然,现在人们普遍认为,骨髓来源的免疫细胞表达这种趋化因子受体,并利用它在健康和疾病条件下进行免疫监测32.然而,在骨髓源性纤维细胞中也发现了功能性CCR714,这可能在实验性肺纤维化的永久性中具有明显的作用15.鉴于这些发现,可以想到,与正常的SLB衍生的成纤维细胞不同,本文研究的IPF / UIP SLB衍生的成纤维细胞是骨髓来源的,因此对CCR7配体仍然依赖于CCR7配体。尽管骨髓细胞对IPF中肺纤维化反应的贡献不能排除,但本研究中使用的IPF / UIP成纤维细胞并未表达文献中先前描述的任何其他纤维细胞标记物(IE。CD34,CD45,CD86和主要组织代表性复合物II14),可能是由于这些标记物的丢失,因为纤维细胞在募集后占据了肺实质33那34.另外,本文研究的CCR7阳性成纤维细胞可能是驻留细胞,作为持续疾病的结果获得了表达功能性CCR7的能力。为了支持这一假设,我们发现正常和IPF/UIP成纤维细胞都含有CCR7转录本。此外,乳腺和皮肤细胞的肿瘤转化导致CCR7的表达,而CCL21随后指导这些细胞的转移24那35.本研究的局限性在于,使用了人成纤维细胞的主要培养物,其可含有各种起源的胶原蛋白产生的细胞。为了解决这一限制,正在进行的研究正在解决来自各种起源的成纤维细胞的克隆版本的CCR7介导的变化。然而,这些正在进行的研究来解决CCR7阳性IPF / UIP成纤维细胞的起源取决于鉴定彼此持续存在于成纤维细胞和/或肌纤维细胞的纤维细胞特异性标记物。确定哪种促进信号促进了正常成纤维细胞中CCR7蛋白表达的调节信号也很有意思。
类似于其他CCR,CCR7具有两个内源性配体,CCl19和CCL21,其在T细胞中表现出类似的结合亲和力和趋化性疗效36.然而,研究表明,由于这些配体在免疫细胞中对CCR7脱敏的不同能力,特别是转染了CCR7的细胞,它们的信号明显不同37那38.在这些研究中,用CCl19预处理抑制和降低CCl19-和CCL21诱导的增殖,而用CCL21预处理对CCl19-或CCl21诱导的增殖没有影响37那38.这种选择性脱敏的精确机制是未知的。在本研究中,CCL19在激活CCR7依赖性效果时效果较小(IE。IPF / UIP成纤维细胞中的迁移,增殖和趋化因子合成比CCL21是CCL21。该差异响应可以通过对内源性CCl19的受体脱敏,与IPF / UIP成纤维细胞的培养物中的内源CCL21相比,在更大的丰度中发现了较大的丰富(数据未示出)。
在IPF/UIP成纤维细胞中,CCL21介导的CCR7激活仅限于ERK 1/2 MAPK通路,而p38和JNK MAPK通路未被CCL21激活。erk1 /2对细胞增殖和DNA合成具有重要作用,部分是通过激活p90RSK。在缺乏磷酸化p90RSK的情况下,细胞阻滞并不能脱离细胞周期26.MAPK通路被有丝分裂原、生长因子和GPCRs激活39.CCR7是GPCR,其需要g一世用于适当功能的信令。PTX是G的α-亚基的特异性抑制剂一世/GO.家族,已知抑制GPCR功能40.在目前的研究中,观察到增强的磷酸化ERK1/2加速了文化的存在CCL21 IPF /摘要成纤维细胞,但整体的大小ERK1/2激活的趋化因子似乎是温和,尤其是相比,诱发MAPK激酶1/2和p90RSK磷酸化变化。对于这种由ccl21诱导的erk1 /2磷酸化变化的解释尚不明确,但由于缺乏erk1 /2的特异性药物抑制剂,对其具体作用的研究受到限制。迄今为止,p90RSK的磷酸化已被证明完全依赖于erk1 /2的作用,但也有可能是其他一些新的激酶的作用可能解释了IPF/UIP成纤维细胞中p90RSK的激活。目前已有研究表明,MAPK激酶1/2、ERK 1/2和p90RSK的磷酸化部分依赖于g蛋白的激活,因为PTX抑制了这些激酶的磷酸化。因此,PTX抑制了ccl21依赖的IPF/UIP成纤维细胞的增殖和迁移。本siRNA实验进一步证明CCL21通过CCR7特异性siRNA激活CCR7,而CCR7特异性siRNA抑制了IPF/UIP成纤维细胞中erk1 /2通路的激活。MAPK激酶1/2、ERK 1/2和p90RSK特异性抑制剂的出现将有助于进一步研究这些激酶在由CCL21诱导的IPF/UIP成纤维细胞的合成、增殖和迁移变化中的个体贡献。
综上所述,已经证明来自特发性肺纤维化/通常间质性肺炎外科肺活检标本的原代人成纤维细胞表达功能性CC趋化因子受体7。在特发性肺纤维化/通常的间质性肺炎成纤维细胞中,CC趋化因子受体7被其配体(特别是CC趋化因子配体21)激活,诱导迁移、增殖和趋化因子合成。CC趋化因子配体21诱导活化通过CC趋化因子受体7是G蛋白依赖性的,并且涉及细胞外信号调节激酶1/2丝裂导蛋白激活蛋白激酶途径的活化。鉴于这些数据和其他靶向CC趋化因子配体21的证据抑制实验性肾小球41和肝42瘢痕形成,可以想到CC趋化因子受体7代表特发性肺纤维化/通常间质肺炎的新靶标。因此,在本作者的实验室(密歇根大学医学院的病理学部)正在进行研究以确定在活的有机体内CC趋化因子受体7在将人特发性间质性肺炎成纤维细胞引入严重联合免疫缺陷综合征小鼠诱导肺纤维化反应中的作用
- 收到了2006年9月19日。
- 公认2007年2月9日。
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