文摘gydF4y2Ba
肺肺泡蛋白质沉积症(PAP)是一组罕见疾病肺泡表面活性剂的干扰体内平衡。而90%的成人的主要形式是由集落刺激因子引起的自身抗体,青少年形成的根本原因仍然未知。为了区分主要和次要的影响在这两种形式的发病机制,目前的作者研究了表面活性剂蛋白质加工蛋白酶A和组织蛋白酶napsin H。gydF4y2Ba
总共16控制,20少年PAP患者和13个成人特发性PAP登记。数量和活动蛋白酶的支气管肺泡灌洗液(BALF)是由免疫印迹和特定的底物劈理。gydF4y2Ba
蛋白酶都是现在和活跃在BALF控制和增加的青少年和成人PAP患者。活动组织蛋白酶的量H与总组织蛋白酶H增加PAP患者与控制。半胱氨酸蛋白酶抑制物C,肺泡的生理组织蛋白酶的抑制剂H空间,不增加相同的学位组织蛋白酶H,导致蛋白酶抑制剂的失衡在肺泡空间。gydF4y2Ba
一般缺陷napsin或组织蛋白酶H表达式或活动并不是异常的具体原因表面活性剂积累在青少年肺肺泡蛋白质沉积症。gydF4y2Ba
肺表面活性物质的正常组成、池大小和内稳态的关键是适当的功能和肺的肺泡的气体交换区域。表面活性剂,除脂质,疏水表面活性剂蛋白(SP) - b和SP-C。SP-B由肺泡II型细胞合成为42 kDa proprotein (proSP-B),这是成熟的细胞处理8 kDa的蛋白质gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。支气管肺泡克拉拉细胞也表达proSP-B,但不要将其转化为成熟的形式gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。相反,一个24 kDa proSP-B分泌到肺泡空间形式。SP-C被肺泡II型pneumocytes专门合成为21 kDa proprotein (proSP-C),然后proteolytically II型细胞内部加工到4.2 kDa成熟的蛋白质gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。组织蛋白酶H和napsin一个已知是必要的细胞内处理gydF4y2Ba4gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
H是一种溶酶体组织蛋白酶半胱氨酸蛋白酶,和家庭的其他成员,参与溶酶体蛋白处理gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。合成为一个不活跃的酶原(41 kDa)然后proteolytically加工中溶酶体的活性形式大小28 kDagydF4y2Ba10gydF4y2Ba。在肺组织蛋白酶H是局部片状的身体(磅),密度多泡体和复合II型pneumocytes的尸体gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,这是表面活性剂成熟的场所。Ishii和同事gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba12gydF4y2Ba确定活性组织蛋白酶H支气管肺泡灌洗液(BALF)和建议II型细胞和肺泡巨噬细胞酶的主要来源。其他人发现改变的数量和活动组织蛋白酶H BALF中不同的患者群体gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba和肺部疾病的动物模型gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。的数量和活动组织蛋白酶H与自然基质蛋白质的疏水表面活性剂SP-B SP-C,是未知的。gydF4y2Ba
Napsin,天门冬氨酰蛋白酶,主要表现在肺和肾gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。在肺,colocalises proSP-B和SP-B多泡体,合成的身体和磅肺泡II型细胞gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。Immunohistological研究表明其在肺泡空间gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。然而,没有报告的数量和活动napsin BALF和关系其基质,proSP-B proSP-C。gydF4y2Ba
本研究的主要目标是调查这两种蛋白酶的生理正常的人类在肺泡BALF和寻找潜在的异常综合征。比较BALF样品允许区别的主要副作用在这些疾病的发病机理。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
研究对象gydF4y2Ba
从三组BALF的主题是调查:20青少年肺肺泡蛋白质沉积症(PAP)的患者;13个成人PAP患者;慢性支气管炎患者和16 (CB;平均年龄3.5岁,95%可信区间(CI) 1.37 - -5.68岁)作为对照组。这些控制受试者≥3个月·年的历史gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba慢性干咳至少2年,没有特异反应性或哮喘的迹象,被归类为“慢性咳嗽”。潜在的免疫缺陷,囊性纤维化,原发性纤毛运动障碍,畸形,异物,microaspirations gastro-oesophageal返流性疾病,滥用化学风险敞口,气管软化或尼古丁被排除在外。支气管肺泡灌洗(BAL)期间进行免费的恶化和肺渗透评价c反应蛋白测定和胸片。gydF4y2Ba
20青少年患者,平均年龄(95% CI) 2.01(0.84 - -3.18)岁,被诊断为巴氏通过肺泡的组织学特征模式填充周期acid-Schiff阳性材料在12个孩子打开或transbronchial肺活检。所有20个患者银河系灌洗废水,演示了一个pathognomic细胞学的模式和特征radiographical PAP的结果在高分辨率计算机断层扫描(HRCT)。SP-B突变,SP-C或磷酸腺苷磁带,sub-family,成员3 (ABCA3)没有检测到任何一个孩子。集落刺激因子(gm - csf)自身抗体是阴性的血清和灌洗液中所有这些病人。gydF4y2Ba
总共13个成人PAP患者被诊断为特发性成年PAP (PAPad)的形式。他们的平均年龄为43.54(95%置信区间)(37.45 - -49.62)岁。其中,五个被打开或transbronchial肺活检诊断。结合典型的临床和HRCT radiographical发现和诊断BAL显示乳白色液体和丰富的细胞外周期acid-Schiff积极材料cytopreparations被认为在所有其他病人。的13个成人患者中,8高的gm - csf自身抗体滴定度。gydF4y2Ba
BAL样品制备、隔离的大型和小型聚合表面活性剂gydF4y2Ba
支气管镜检查和平衡(4×1毫升0.9%氯化钠每公斤体重)进行如前所述gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。隔离的大型和小型聚合(分别拉和SA)表面活性剂,能整除BALF的离心机40000×gydF4y2BaggydF4y2Ba30分钟。gydF4y2Ba
免疫印迹分析人类BALF、洛杉矶和SAgydF4y2Ba
人类BALF的整除,洛杉矶和股价降低条件下分离使用10% NuPAGE®Bis-Tris凝胶(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)和转移到聚乙二烯二氟化物膜(微孔,康科德,妈,美国)探测SP-B SP-C proSP-B, napsin和组织蛋白酶h .蛋白质乐队与QuantityOne densitometrically量化(Biorad、大力神、钙、美国)。半胱氨酸蛋白酶抑制物C水平夹心ELISA测定。(详情参见补充数据)。gydF4y2Ba
组织蛋白酶H和napsin活动分析gydF4y2Ba
组织蛋白酶H和napsin活动是由测量特定合成基质的乳沟。(有关详细信息,请参阅补充数据)。gydF4y2Ba
统计方法gydF4y2Ba
非参数测试是用于比较两个未配对组(Mann-Whitney紫外线测试)。数据意味着±gydF4y2BasegydF4y2Ba个人的价值观不同的科目,每个值代表的意思是两到三个实验。使用相关性,斯皮尔曼的非参数检验。被认为具有统计显著性p值< 0.05。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
组织蛋白酶H数量和活动在PAP患者BALF升高gydF4y2Ba
组织蛋白酶在BALF H被免疫印迹量化。分析是线性和特定浓度范围宽(图1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。蛋白质的主要免疫反应性的形式有28 kDa的大小,对应于组织蛋白酶的活性形式H(图1 cgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。未发现proforms更大或更小的降解产物。组织蛋白酶的浓度H BALF中少年PAP患者高出三倍(PAPjuv)和PAPad,受试者相比,在控制CB组(15.9±1.5,14.0±0.9,5.7±0.6μg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba分别;p < 0.0001 PAPjuv和PAPad CB的比较;图1 dgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。这些结果并不区分积极组织蛋白酶H不活跃,组织蛋白酶H的蛋白水解活性BALF决心(图。2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。PAPjuv水平和PAPad患者显著高于CB组(6.8±2.07,13.09±3.79,0.20±0.06μg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba分别;为比较p < 0.0001 PAPjuv和PAPad CB)。组织蛋白酶的活性氢与它的浓度相关(r = 0.646, p < 0.0001;图2 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。有趣的是,不同的百分比的活跃组织蛋白酶H观察每组的主题。在控制患者中,只有3%的组织蛋白酶H,而46和85%的人活跃在PAPjuv PAPad患者,分别为(表1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
组织蛋白酶H在人类支气管肺泡灌洗液(BALF)。量化组织蛋白酶H,标准曲线(a)是由测量的化学发光信号不同数量的组织蛋白酶H (5 - 200 ng)免疫印迹(b)。整除(50µL)人类BALF样品分离游离NuPAGE®凝胶,其次是与组织蛋白酶immunodetection H抗体。c)代表免疫印迹,显示三个50μL BALF为每个病人的样本组,信号的成熟组织蛋白酶在∼28 kDa H。d)组织蛋白酶H浓度的分布在患者BALF组。单杠表示中位数。盟:任意单位;CB:慢性支气管炎病人控制;PAPjuv:青少年肺肺泡蛋白质沉积症(PAP)的患者;PAPad:成人PAP患者。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p < 0.0001。gydF4y2Ba
组织蛋白酶H活动在人类支气管肺泡灌洗液(BALF)。组织蛋白酶的酶活力H在人类BALF决心通过测量特定的底物的营业额。a)的数量proteolytically活跃组织蛋白酶在人类BALF中H。单杠表示中位数。相关的组织蛋白酶b) H与组织蛋白酶浓度H活动所有的病人。答:慢性支气管炎病人控制(▪);PAPjuv:青少年肺肺泡蛋白质沉积症(PAP)的病人(▴);PAPad:成人PAP患者(•)。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p < 0.0001。b) r = 0.646, p < 0.0001。gydF4y2Ba
组织蛋白酶H浓度、活动和抑制剂(半胱氨酸蛋白酶抑制物C)浓度和比率表示在摩尔的基础上gydF4y2Ba
半胱氨酸蛋白酶抑制物C BALF中gydF4y2Ba
不同数量的BALF中内源性蛋白酶抑制剂可能会导致不同的活动组织蛋白酶的百分比h .半胱氨酸蛋白酶抑制物C是可逆抑制组织蛋白酶h .大约五倍浓度更高的半胱氨酸蛋白酶抑制物C在场BALF PAPjuv和PAPad病人与CB组(69.6±12.8,80.9±14.6,13.6±1.9 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba分别;PAPjuv p = 0.0003gydF4y2Ba与gydF4y2BaPAPad CB, p < 0.0001gydF4y2Ba与gydF4y2BaCB;表1gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba,图3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
![图3 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/31/6/1197/F3.medium.gif)
半胱氨酸蛋白酶抑制物C在人类支气管肺泡灌洗液(BALF)。单杠表示中位数。CB:慢性支气管炎病人控制;PAPjuv:青少年肺肺泡蛋白质沉积症(PAP)的患者;PAPad:成人PAP患者。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p < 0.0001;gydF4y2Ba¶gydF4y2Ba:p = 0.0003。gydF4y2Ba
由半胱氨酸蛋白酶抑制物C抑制发生化学计量的1:1摩尔的基础上gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。组织蛋白酶浓度增加与H, H越来越不平衡的组织蛋白酶活性与半胱氨酸蛋白酶抑制物C浓度观察(表1所示gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。对照组有超过10倍半胱氨酸蛋白酶抑制物C H活动对其组织蛋白酶抑制剂,这是∼作为PAPad PAPjuv和77倍。相比之下,总组织蛋白酶的浓度之比H其抑制剂组之间没有显著变化。这清楚地表明缺乏组织蛋白酶H在巴氏抑制能力。gydF4y2Ba
Napsin是存在于人类BALF和增加人民行动党gydF4y2Ba
其他蛋白酶参与蛋白质疏水表面活性剂是napsin的处理gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。一个占主导地位的免疫反应性的群38 kDa,对应napsin的活性形式gydF4y2Ba21gydF4y2Ba,是由免疫印迹检测BALF样本(图4gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。没有proforms较大或较小的降解产物napsin被检测到。的浓度napsin PAPjuv明显更大,比CB PAPad组(3038±1571、3054±1505和504±392任意单元(AU)·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba分别;p < 0.0001 PAPjuv和PAPad CB的比较;图4 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
Napsin在人类支气管肺泡灌洗液(BALF)。一)整除(50µL)人类BALF样品分离游离NuPAGE®凝胶,其次是immunodetection napsin抗体。代表免疫印迹,显示三个50µL为每个病人的样本组,与信号为成熟napsin∼38 kDa。Napsin所有患者densitometrically量化信号,并计算相对于内部标准。b)分布的相对napsin BALF的浓度。单杠表示中位数。盟:任意单位;CB:慢性支气管炎病人控制;PAPjuv:青少年肺肺泡蛋白质沉积症(PAP)的患者;PAPad:成人PAP患者。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p < 0.0001。gydF4y2Ba
Napsin BALF proteolytically活跃和增加在PAPad PAPjuv但不是gydF4y2Ba
napsin BALF中增加的酶活性大约3至4倍相比,PAPjuv CB控件(258±32和58±14盟·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba分别;p < 0.0001),但不是在PAPad(119±29盟·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba;p = 0.083;图5gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。Napsin活动相关的只有弱Napsin浓度(图5 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。总napsin,∼11%活跃,没有差异组(10.6±1.9,6.9±3.4和11.5±2.7%;分别为PAPjuv PAPad和CB),符合一个不变的活跃napsin分数三组。gydF4y2Ba
Napsin活动在人类支气管肺泡灌洗液(BALF)。napsin的酶活性在人类BALF决心通过测量特定的底物的营业额。活动是基于内部标准。a)的数量proteolytically活跃napsin人类BALF中。单杠表示中位数。b)的相关性napsin浓度与napsin所有病人的活动。答:慢性支气管炎病人控制(▪);PAPjuv:青少年肺肺泡蛋白质沉积症(PAP)的病人(▴);PAPad:成人PAP患者(•)。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p = 0.0833;gydF4y2Ba¶gydF4y2Ba:p < 0.0001。b) r = 0.475, p = 0.0006。gydF4y2Ba
增加蛋白酶水平并非由于增加了细胞损伤或溶解gydF4y2Ba
排除的可能性增加了大量的组织蛋白酶H和napsin BALF中蛋白酶是由于增加细胞的损伤或裂解PAP患者的活动自由BALF中乳酸脱氢酶(LDH)确定。LDH活性PAP患者和CB组没有差异;虽然四PAP患者显示LDH活性升高,之间没有相关性的蛋白酶和LDH的活动(数据未显示)。gydF4y2Ba
Napsin位于洛杉矶和组织蛋白酶H BALF的SA分数gydF4y2Ba
从以前的研究众所周知,napsin和组织蛋白酶H细胞局部在II型pneumocytes磅及其前体囊泡gydF4y2Ba4gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。napsin相比,组织蛋白酶H表达并不局限于II型pneumocytes,和增加组织蛋白酶H水平BALF的PAP患者可能出现肺内的几个来源。为了确定BALF中蛋白酶的起源,BALF游离在40000×被超速离心法分离gydF4y2BaggydF4y2Ba成一个小球,gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba大颗粒表面活性剂主要来自磅,和一个SA上层清液。的分数受到immunodetection与组织蛋白酶H或napsin抗体。gydF4y2Ba
组织蛋白酶H是主要发现在SA分数;它只成为了洛杉矶的五倍集中检测样本PAP患者。因此,大多数的组织蛋白酶H本地化的SA(图6gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。与组织蛋白酶H的分布,数量明显更高的napsin蛋白质局部在LA分数(图6 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
本地化组织蛋白酶H和napsin人类支气管肺泡灌洗液(BALF)小分支。人类BALF、小总(SA)和大总(LA)表面活性剂分离NuPAGE®凝胶(表达载体),其次是immunodetection) H或组织蛋白酶b) napsin抗体。道是满载总BALF、SA或拉的样本量100µL BALF(1×)或拉的样本量500µL BALF (5×)。样本从)一个少年肺肺泡蛋白质沉积症(PAPjuv)病人和两个控制慢性支气管炎患者(CB;组织蛋白酶淬透性带大小kDa 28日)或b)一个PAPjuv病人和一个成人PAP (PAPad)病人(napsin乐队大小38 kDa)。gydF4y2Ba
Napsin和组织蛋白酶H数量和活动与intra-alveolar大量成熟SP-B, SP-C proSP-B生理处理中间体gydF4y2Ba
Napsin A和组织蛋白酶H是参与细胞内处理SP-B和SP-C成熟的形式。目前的研究表明这些蛋白酶也存在和活跃在细胞外空间,因此他们的潜在作用与蛋白质疏水表面活性剂进行了研究。组织蛋白酶的浓度H 1(参见无花果gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba和b在补充数据)和napsin(参见无花果1 cgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba在补充数据)和d的浓度显著相关的成熟形式SP-B SP-C。此外,两种蛋白酶的活动还与这些SPs (SP-B:组织蛋白酶的浓度H r = 0.511, p < 0.0002, napsin r = 0.489, p < 0.0004;SP-C:组织蛋白酶H r = 0.645, p < 0.0001, napsin r = 0.518, p < 0.0001)。gydF4y2Ba
大部分的受试者的生理proSP-B形式- 26 kDagydF4y2Ba22gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba24gydF4y2BaBALF中,评估免疫印迹(表2所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。至于成熟SP-B,这种常见的前身是成正比的丰富的浓度和活动组织蛋白酶H(浓度:r = 0.638, p < 0.0001;活动:r = 0.636, p < 0.0001)和napsin(浓度:r = 0.407, p = 0.0082;活动:r = 0.738, p < 0.0001)。gydF4y2Ba
表面活性剂蛋白(SP) - b proforms在支气管肺泡灌洗液(BALF)患者团体调查gydF4y2Ba
成熟SP-B的分数,计算的比例SP-B proSP-B形式,患者组之间没有差别。所有SP-B∼80%是在成熟的形式(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。这表明最终产品的处理SP-B PAP患者并没有改变。有趣的是,在与PAPjuv∼50%的患者,额外的异常30 - kDa proSP-B形式存在于大量(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
PAP的罕见疾病是一组被表面活性剂体内平衡,导致肺泡表面活性剂的组成和池大小改变。PAPad可以分为初级(所谓的特发性)形式,以及二次形式与其他疾病有关。主要形式是由缺陷引起的表面活性剂的再吸收,由于自身抗体对gm - csf在血液和组织,包括肺肺泡gydF4y2Ba25gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba27gydF4y2Ba。这些自身抗体中和gm - csf的生物活性。PAPjuv是一种罕见的疾病,病人很少被描述gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。有原因地,gm - csf自身抗体发挥任何作用,根据目前的研究和以往的研究gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba。本研究的假设是,napsin或组织蛋白酶H,至关重要的细胞内合成的蛋白酶SP-B SP-C,都由参与PAPjuv的发病机制。gydF4y2Ba
发现napsin在场,活跃在生理条件下肺泡空间。PAP患者,napsin浓度增加6倍与控制。类似的观察进行了组织蛋白酶H .结果排除一般缺乏napsin和组织蛋白酶H具体原因异常表面活性剂在PAPjuv积累,因为本质上相同的结果被发现在PAPad, gm - csf自身抗体引起的。酶都是活跃的,和现在的丰富和成熟的SPs的肺泡数量成比例。gydF4y2Ba
本研究有局限性。数量第一,蛋白酶和活动没有确定肺泡II型细胞内部,表面活性剂的合成。人民行动党组之间细微的差别,人民行动党和对照组之间的差异大,不太可能源于不同的蛋白酶的分泌进入肺泡空间。细胞损伤或溶解排除在外。此外,这种限制是抵消了有趣的发现,这些蛋白酶活性在肺泡空间和潜在的进一步未知函数。其次,缺乏PAPad的同龄对照组。然而,鉴于蛋白酶的巨大差异之间的数量和活动PAPjuv和控制CB集团与人民行动党团体间的细微差异相比,甚至与成人比较组基线水平更高,相同的结论是派生的。此外,没有迹象显示年龄依赖性的年龄范围,和人类和动物数据表明,表面活性剂池稳定在新生儿期之后gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
Napsin一gydF4y2Ba
本研究首次表明,活跃napsin BALF的存在于人类正常和病变。Napsin需要表面活性剂的合成;的proforms SP-B和SP-C napsin反应的生理机制gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。之间的密切相关性观察到大量的加工酶napsin SP-B, proSP-B和SP-C肺泡空间表明蛋白酶增加数量和活动确实是成熟的SPs参与增加扩大患者肺泡表面活性剂池大小。BALF的LDH活性水平之间没有不同的三组,排除napsin的释放(或组织蛋白酶H)通过增加细胞损伤或裂解PAP患者。通过分数BALF,拉斯维加斯被确认为napsin的首要位置;拉斯维加斯来自磅肺二型细胞。这是在协议与本地化的napsin磅,immunoelectron显微镜所示gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,其与细胞膜gydF4y2Ba32gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
Napsin是一个最大的细胞内天门冬氨酰蛋白酶活动的酸性博士指出,在pH值7和37°C, Napsin活动的半衰期为4 hgydF4y2Ba33gydF4y2Ba。因此,预计活跃的酶将BALF中发现,如果分泌。Napsin可能参与许多细胞外酶的过程。符合napsin是其分泌的细胞外功能的肾脏正常人体的尿液gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba34gydF4y2Ba。这一切适合酶活动的一般范式,曾被认为是完全负责细胞内过程,也可能有特定的函数后分泌或释放到细胞外环境。还存在,例如函数称为细胞内凋亡的刽子手,保持酶活性在不同的细胞外液gydF4y2Ba35gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba。这种细胞外半胱天冬酶活动相关的组织在开发过程中改造和疾病,因为它提供了协调细胞和细胞外基质的损失gydF4y2Ba37gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
组织蛋白酶HgydF4y2Ba
类似于napsin,组织蛋白酶H被发现在所有BALF样品分析现在和活跃。没有组织蛋白酶的前体形式H被免疫印迹检测,在协议的研究从炎症性肺部疾病患者BALF和矽肺gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。PAP患者,和活动的组织蛋白酶H增加SP-B和SP-C比例水平升高。至少两个细胞,肺泡巨噬细胞和II型细胞,表达在肺组织蛋白酶HgydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba38gydF4y2Ba。组织蛋白酶H数量都与肺泡巨噬细胞的数量从BALF中恢复过来,也与炎症的程度由BALF中中性粒细胞(结果未显示)。支持H II型细胞组织蛋白酶的起源来自immunoelectron显微镜,这显示了组织蛋白酶的本地化H磅肺泡II型细胞gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。分泌后,分区到SA分数可能发生。中性pH水平最优组织蛋白酶H活动,所以它将活跃于上皮衬里液体,据估计的pH值为6.92gydF4y2Ba39gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
结合在一起,增加了组织蛋白酶H水平PAP最有可能与疏水性的肺泡扩张池SPs和炎症或细胞损伤。在生理条件下,内源性广泛组织蛋白酶抑制剂的半胱氨酸蛋白酶抑制物家族控制H活动严格gydF4y2Ba40gydF4y2Ba。半胱氨酸蛋白酶抑制物C的水平,主要组织蛋白酶抑制剂gydF4y2Ba19gydF4y2Ba是双重的PAP患者比对照组高;然而,积极组织蛋白酶的百分比H PAPjuv从对照组的3%增加到85%的病人。显然,应对过度的蛋白水解活性的能力在人类肺癌是有限的,由动物支持数据gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。半胱氨酸蛋白酶抑制物C是由所有有核细胞合成的gydF4y2Ba41gydF4y2Ba,gydF4y2Ba42gydF4y2Ba。在半胱氨酸蛋白酶抑制物C表达特异性缺陷肺因此不太可能。gydF4y2Ba
的生理功能intra-alveolar组织蛋白酶H只能推测。克拉拉细胞分泌proSP-B作为24 kDa proformgydF4y2Ba2gydF4y2Ba,这可能在肺泡被处理,从而增加SP-B从潜在储层水平。支持这个概念gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba研究重组proSP-B和孤立的组织蛋白酶H,显示生成的羧基端SP-B成熟gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
总之,目前的研究报告的结果排除napsin和组织蛋白酶H表达式的一般缺陷或活动的具体原因异常表面活性剂积累青少年肺肺泡蛋白质沉积症。主要胞内蛋白酶napsin和组织蛋白酶在肺泡空间和H丰富和活跃与表面活性剂protein-B, proprotein表面活性剂protein-B形式和表面活性剂蛋白质c,在内部支持他们的作用,细胞外表面活性剂的新陈代谢。gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
这项工作是支持的资助德意志Forschungsgemeinschaft (DFG) m . Griese gr970 - 7.2。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
一份声明中对这项研究可以发现gydF4y2Bawww.www.qdcxjkg.com/misc/statements.shtmlgydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者承认美国Gruschka的技术援助和a . Schams和s·海因里希社论建议(所有的儿童医院,路德维希-马克西米利安-慕尼黑,德国)。作者要感谢w . Steinhilber从Altana(德国康斯坦茨)慷慨的礼物多克隆反SP-B SP-C抗体,和美国Guttentag(儿科部门,宾夕法尼亚大学医学院的费城,宾夕法尼亚州,美国)提供一个多克隆anti-proSP-B (CtermB)抗体。本研究形成A·鲍尔的医学博士论文工作的一部分,题为“组织蛋白酶H和napsin落下帷幕的间质性肺疾病患者(路德维希-马克西米利安- 2008)。gydF4y2Ba
脚注gydF4y2Ba
可以从本文的补充材料gydF4y2Bawww.www.qdcxjkg.comgydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2007年7月2日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2008年1月4日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
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