文摘gydF4y2Ba
猪监禁工人呼吸道疾病的风险增加,包括粘膜刺激综合征,慢性鼻窦炎和慢性支气管炎。尘埃提取猪监禁设施刺激促炎细胞因子的生产在支气管上皮细胞,包括白介素8 (IL)。作为引发能够阻止β-agonist-stimulated增加纤毛跳动,对黏膜纤毛的间隙的影响,提出,猪barn-dust暴露可能会改变纤毛对刺激的反应。gydF4y2Ba
为了验证这个假设,牛支气管纤毛上皮细胞培养被暴露于猪barn-dust提取(HDE)和纤毛拍频(CBF)化验。gydF4y2Ba
观察基线CBF的高程。这种效应似乎是独立于内毒素但依赖一氧化氮。HDE也刺激支气管上皮细胞一氧化氮产量;然而,刺激的纤毛击败β-agonist没有发生在细胞pre-exposed HDE。gydF4y2Ba
这些数据表明,猪谷仓尘埃可以改变正常的纤毛的刺激,建议废除的机制刺激增加黏膜纤毛的清除吸入粉尘接触的反应。gydF4y2Ba
现代猪操作提高到成千上万的动物在封闭约束建筑,提高职业的担忧,环境和社区这些大型集中的动物饲养操作带来的危害gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。这种方法提高猪已经成为主要的工作场所活动的农业工人。猪监禁谷仓的空气通常有高水平的氨和富含内毒素的灰尘gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。内毒素、氨和高总粉尘水平与呼吸道疾病的存在在这些工人gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。猪监禁工人通常报告增加鼻和鼻窦症状,咳嗽、胸闷、气喘和呼吸短促用力gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。这些症状与气流阻塞肺功能测试和下呼吸道炎症的证据gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。明显的上呼吸道炎症也会发生,以增加中性粒细胞和炎性细胞因子在鼻灌洗的正常志愿者暴露于猪监禁设施gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。此外,鼻腔鼻窦疾病细菌暴露工人普遍有鼻塞、慢性和减少的嗅觉gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。然而,对工作的影响猪监禁谷仓黏膜纤毛的清除。gydF4y2Ba
黏膜纤毛的清除是一个可调整的天生的宿主防御,由一个复杂的调节分泌粘液,气道表面液体和纤毛跳动gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。哺乳动物的纤毛跳动的刺激包括一氧化氮(NO)介导的过程gydF4y2Ba10gydF4y2Ba调节循环nucleotide-dependent通路gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。β-agonists已广泛用于刺激纤毛击败的增加gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba研究gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。之前被确认,纤毛的β-agonist刺激击败可以通过接触酒精脱敏gydF4y2Ba13gydF4y2Ba或被白介素8 (IL)的存在gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。在此之前,gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba研究表明,猪谷仓灰尘刺激生产的il - 6,引发人类支气管上皮细胞gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。这个反应是独立于内毒素浓度出现在所需的灰尘和蛋白激酶C的激活。gydF4y2Ba
猪限制工人的风险增加发展中上下呼吸道气道疾病,是提出一个先天防御机制,黏膜纤毛的清除,可能改变在纤毛上皮细胞暴露于猪监禁设施灰尘。接触猪呼吸道上皮的谷仓灰尘导致引发的生产;因此,当前作者进一步提出,这样的接触块β-agonists在纤毛跳动的刺激效果。这些机械的研究gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba纤毛跳动的影响提供了一个洞察在猪监禁环境对呼吸道。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
细胞的准备gydF4y2Ba
模型粒子刺激纤毛gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba,牛纤毛上皮细胞刺激β-agonists增加纤毛跳动gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba。主要牛支气管上皮细胞准备从牛肺如前所述gydF4y2Ba16gydF4y2Ba。支气管肺癌和消化隔夜的尸体剖检4°C 0.1%细菌蛋白酶IV型最低基本媒体(M199伯爵盐;表达载体,卡尔斯巴德、钙、美国)。第二天,支气管反复冲洗在M199含10%胎牛血清(的边后卫;英杰公司)收集上皮细胞管腔。纤毛细胞丛40-μm网过滤收集,已被证明能够有效地隔离流过可行的纤毛细胞> 95%。这些细胞被洗在M199媒体,血球计算,3×10gydF4y2Ba6gydF4y2Ba细胞被镀上60毫米组织培养盘子涂上1%的I型胶原蛋白(Vitrogen;凝聚力,帕洛阿尔托,加州,美国。细胞生长在M199完成媒体包含10%的边后卫,U·50毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba青霉素和链霉素(表达载体)和2μg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba二性霉素b(表达载体),在空气湿润95% / 5%股份有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba孵化器在37°C。融合性的层的初级纤毛细胞获得3天,作为描述。gydF4y2Ba
制备猪barn-dust提取gydF4y2Ba
解决粉尘收集∼从猪监禁1 - 2米地上建筑与猪体重∼100∼500 - 700公斤gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。尘埃从每个设施分开处理,实验重复使用不同来源的灰尘,包括刚获得灰尘和灰尘,储存在-80°C。在类似的方式提取制备粮食粉尘提取利用先前发表的研究gydF4y2Ba18gydF4y2Ba和猪barn-dust提取(HDE)用于动物模型研究gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。HDE准备通过将1 g的尘埃在10毫升的汉克的平衡盐溶液(美国Biosource国际,打击士气,CA)没有钙。混合物被漩涡,允许站在室温下1 h。混合物是离心机在2000×20分钟gydF4y2BaggydF4y2Ba,上层清液回收并再次离心20分钟2000×gydF4y2BaggydF4y2Ba。最后的上层清液过滤消毒,立即使用。这个浮层被认为是100% HDE和稀释培养基实现中使用的各种HDE浓度实验。gydF4y2Ba
其他研究报告0.3×10的可耕种的细菌gydF4y2Ba4gydF4y2Ba-3.3×10gydF4y2Ba8gydF4y2Ba克隆形成单位(cfu)·mgydF4y2Ba−3gydF4y2Ba在工人的呼吸区gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。目前作者培养∼5×10gydF4y2Ba6gydF4y2Bacfu·ggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba猪的谷仓尘埃HDE用于生产100%。这表明HDE可培养细菌的浓度是类似于细菌的浓度在工人的呼吸区。gydF4y2Ba
从一个匹配提取由猪饲料猪监禁设施,或谷物feed-dust提取(GFDE),准备在一个时尚HDE相同。内毒素的含量在HDE量化使用鲎变形细胞溶解产物(LAL)胶凝试验(Cambrex Walkersville,医学博士,美国)和记录在每个提取做好准备gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。Endotoxin-reduced HDE(40内毒素单位(欧盟)·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Bapre -gydF4y2Ba与gydF4y2Ba0.06欧盟·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Bapost-polymyxin B)准备和特征如前所述gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
纤毛拍频分析gydF4y2Ba
细胞被维持在一个恒定的温度(25±0.5°C)在所有实验过程中使用一个恒温控制的加热阶段。纤毛的运动使用Sisson-Ammons视频分析处理(萨瓦河)系统(美国亚扪人工程,太莫里斯,MI)如前所述gydF4y2Ba22gydF4y2Ba。纤毛细胞的图像呈现在一个奥林巴斯IMT-2倒置相差显微镜(奥林巴斯、东京、日本)使用20×物镜1.5×管乘数,和图像捕获使用柯达310模拟/数字摄像机(伊士曼柯达运动分析系统部门,圣地亚哥,美国)。采样率设定在85帧·sgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba所有的实验条件。直接从相机捕捉数字视频传播到一个IMACQ OCI / pxi - 1422数字收购委员会(美国国家仪器、奥斯汀、TX)在戴尔精密420工作站。整个拍摄640×480像素的形象被萨瓦河使用自动分析运动过程称为整个领域分析。整个领域特定的验证分析技术分析如前所述gydF4y2Ba22gydF4y2Ba。萨瓦河软件分析图像,包含19200种可能的能动的区域,确定平均频率和gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba每个字段被俘。对于每一个实验条件,至少六个单独的字段被抓获,分析和表达为一个数据点。方差分析是运行在每个数据点和被认为是显著的假定值≤0.05。gydF4y2Ba
没有分析gydF4y2Ba
支气管上皮细胞没有生产监控gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba没有检测的气相化学发光反应之间没有和臭氧(OgydF4y2Ba3gydF4y2Ba;西弗斯仪器模型280我;美国通用分析仪器,博尔德有限公司)。层的气道上皮细胞与不同浓度的HDE治疗不同时期。细胞中分离细胞和两个分数flash冷冻停止代谢反应。蛋白质沉淀在相同体积的0.5 N ZnSO氢氧化钠和10%gydF4y2Ba4gydF4y2Ba15分钟前离心14000×gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟在4°C。上层清液(10µL)被注入一个包含0.1 VCl回流列gydF4y2Ba3gydF4y2Ba在80°C 1 M盐酸向没有减少硝酸盐和亚硝酸盐。没有然后结合OgydF4y2Ba3gydF4y2Ba没有分析器产生的形式gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。没有兴奋的产生的排放gydF4y2Ba2gydF4y2Ba由光电倍增管检测并记录数字(mV)。的值被窜改NaNO的标准曲线gydF4y2Ba2gydF4y2Ba浓度同时确定。样品测量每个细胞治疗是一式三份,每个样本注入至少三次总共九个阅读每个数据点。由方差分析决定意义。gydF4y2Ba
细胞生存能力分析gydF4y2Ba
媒体上层清液(50μL)从细胞单层膜处理HDE或媒体仅是细胞生存能力化验取样。此外,汇合的单层细胞细胞溶解的积极控制乳酸脱氢酶(LDH)释放。细胞生存能力是由商用设备(σ,圣路易斯,密苏里州,美国)来衡量LDH释放,根据制造商的指示。gydF4y2Ba
西方墨点法gydF4y2Ba
水溶性HDE或谷物饲料粉尘减少条件下蛋白质在sds - page分离和转移到硝基详细gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。硝化纤维膜在一夜之间被封锁在4°C组成的缓冲5%牛奶,50 mM Tris-HCl, 90毫米CaCl氯化钠和2毫米gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(烂醉如泥的)。呈现引发的检测是通过孵化这些墨迹的溶液含有0.2毫克·毫升烂醉如泥的gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba兔子anti-porcine引发(研发系统,明尼阿波利斯,美国)和0.5 mg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Baperoxidase-conjugated山羊anti-rabbit二级抗体(美国罗克兰Gilbertsville, PA)。墨迹与磷酸盐缓冲盐水洗广泛(PBS)和Tween-20,洗一次使用增强化学发光与PBS和发展(SuperSignal西Pico,皮尔斯,罗克福德,美国)。控制包括探测用特异性的兔兔免疫球蛋白G (Ig)到位anti-porcine引发。gydF4y2Ba
ELISA对引发gydF4y2Ba
引发HDE样品的浓度是由ELISA之前报道gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
所有定量实验进行至少三次,每个数据点化验一式三份(n = 9)。数据分析使用Graphpad Prizm(美国圣地亚哥,CA)和表示为±gydF4y2BasegydF4y2Ba。数据分析统计意义使用单向方差分析化验和纤毛拍频的配对t检验(CBF)化验。意义被接受的95%置信区间。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
HDE基线CBF升高gydF4y2Ba
急性暴露吸入粒子通常刺激黏膜纤毛的清除,导致假设短暂接触天真的纤毛细胞HDE刺激纤毛的能动性。为了验证这个假说,短期HDE对黏膜纤毛的间隙的影响gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba是由暴露牛支气管上皮细胞纤毛HDE和检查纤毛蠕动。汇合的层的纤毛细胞保持作为一个水下文化M199媒体。细胞治疗的存在与否5% HDE和CBF化验使用萨瓦河室温≤5 hgydF4y2Ba22gydF4y2Ba。接触文化媒体表现出一致的基线CBF∼9赫兹(图。1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。海拔在30分钟后观察基线CBF HDE,最大的增加(∼1 Hz) 1 h HDE治疗后观察。的影响对CBF HDE浓度和时间依赖性。后30分钟接触,增加浓度的HDE 5 - 25%基线升高CBF对媒体控制曝光(图。2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。虽然早期接触(30 - 90分钟)5 - 25% HDE导致CBF的海拔,更高的浓度(10 - 25%)HDE没有增加CBF后2 - 3 h(图2 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。事实上,更高的浓度(25%)的HDE产生持续放缓的3 h后纤毛。长时间曝光后,25% HDE与减少细胞生存能力取决于LDH释放(数据未显示)。这些数据表明,HDE基线升高CBF支气管上皮细胞。gydF4y2Ba
![图1 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/31/6/1249/F1.medium.gif)
基线纤毛拍频(CBF)升高在气道上皮细胞暴露于猪barn-dust提取(HDE)。层的支流牛支气管纤毛上皮细胞治疗5% HDE(•)或媒体控制(□)≤5 h, CBF测量。暴露于5% HDE CBF增加了∼1 HzgydF4y2Ba与gydF4y2Ba媒体控制后1 - 2小时。*:p < 0.05。gydF4y2Ba
的高程基准纤毛拍频(CBF)猪barn-dust提取(HDE)时间和浓度依赖性。牛支气管上皮细胞纤毛是HDE的0 - 25%稀释处理,和CBF测量30分钟和24小时之后。30分钟后)接触HDE 5 - 25%,基线CBF增加。b)一夜之间暴露于5%(▪)或10% (•)HDE导致基线CBF与媒体控制相比没有显著变化(□)。更高浓度的HDE (25%;○)后导致降低CBF 4-24 h。*:p < 0.05。gydF4y2Ba
由于内毒素是已知的炎症介质由于灰尘吸入,这是建议CBF的HDE-induced高程是独立于内毒素。为了测试这个假说,稀释5% HDE从多粘菌素B列筛选了减少样本中包含的内毒素水平。这解毒HDE解决方案然后暴露于纤毛细胞和CBF测量。没有观察到CBF的差异5% HDE曝光和polymyxin-treated HDE曝光(图3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。控制媒体筛选了多粘菌素B列没有影响基线CBF水平与媒体控制(数据未显示)。内毒素的量中包含5%的稀释HDE LAL试验确定gydF4y2Ba21gydF4y2Ba欧盟·∼40毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。当欧盟·40毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba脂多糖(LPS)直接添加到纤毛细胞,没有增加CBF基线跳动(图3 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。欧盟的40毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba有限合伙人5% HDE没有改变高架CBF观察HDE 5%(数据没有显示)。这些数据提供的证据表明,内毒素不是组件的基线CBF HDE负责海拔。gydF4y2Ba
海拔纤毛拍频(CBF)猪barn-dust提取(HDE)不是由于内毒素。一)牛支气管纤毛上皮细胞治疗≤5 h与媒体控制(□),5% HDE(•),或5%从endotoxin-binding HDE筛选了多粘菌素B列(HDE排毒。5%;○),CBF测量。排毒。5%相比基线CBF HDE显著提高与媒体控制在每一个时间点从1 - 4.5 h。没有观察到显著差异之间5% HDE和排毒。5% HDE类似的时间点。b)加入欧盟·40毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba脂多糖(○)细胞媒体导致CBF与媒体控制相比无显著变化(□)在任何时间点化验。5% HDE欧盟(•)包含∼40毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba内毒素。*:p < 0.05。gydF4y2Ba
HDE刺激没有生产gydF4y2Ba
暴露于粉尘从猪监禁设施与呼出没有升高有关gydF4y2Ba24gydF4y2Ba,没有CBF的生产是一种已知的刺激gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。因此,它是提出HDE对气道纤毛上皮细胞的影响是由没有生产。汇合的层的media-submerged纤毛细胞治疗的存在与否HDE和媒体发布的是化验≤2 h在室温下使用亚硝酸盐和硝酸盐积累的化学发光检测器。重要的积累没有观察到细胞内媒体,30分钟后开始接触HDE 5%(图4所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。海拔不继续≤2 h;在这之后,没有观察到的进一步积累。更高浓度的HDE(10 - 25%)也没有升高,但HDE较低浓度(1%)没有导致显著的海拔(数据没有显示)。Pre-incubation细胞的1 h和1µM NO合酶抑制剂,gydF4y2BaNgydF4y2BaGgydF4y2Ba单甲-gydF4y2BalgydF4y2Ba精氨酸(L-NMMA),阻止HDE-stimulated生产没有(数据未显示)。同样,HDE-stimulated海拔在基线CBF被封锁的细胞被pre-incubated L-NMMA(图5所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。这些数据表明HDE增加的生产不,CBF的刺激调节器纤毛细胞。gydF4y2Ba
![图4 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/31/6/1249/F4.medium.gif)
猪barn-dust提取(HDE)刺激一氧化氮(NO)在气道上皮细胞生产。牛支气管纤毛上皮细胞治疗与5% HDE物品细胞媒体≤2 h。总增加媒体亚硝酸盐和硝酸盐化验。暴露于5% HDE迅速增加的水平积累硝酸盐和亚硝酸盐才是真正与媒体控制相比,2 h的持续增加。*:p < 0.05。gydF4y2Ba
猪barn-dust提取(HDE)刺激睫毛的拍频(CBF)一氧化氮(NO)的依赖。牛支气管纤毛上皮细胞治疗≤5 h与媒体控制(□),5% HDE(•), 10µM没有合酶抑制剂gydF4y2BaNgydF4y2BaGgydF4y2Ba单甲-gydF4y2BalgydF4y2Ba精氨酸(L-NMMA;▪HDE)或者5% + 10μM L-NMMA(○)和CBF测量。基线CBF增加5% HDE相比之下,媒体控制在每个时间点,但是HDE-induced海拔被当细胞与L-NMMA预处理的1 h。*:p < 0.05。gydF4y2Ba
isoproterenol-stimulated CBF HDE暴露阻塞gydF4y2Ba
一氧化氮调控是重要的纤毛细胞的反应β-agonist-stimulated CBF的增加gydF4y2Ba25gydF4y2Ba;因此,gydF4y2Ba在体外gydF4y2BaHDE暴露对异丙肾上腺素(ISO)刺激的纤毛跳动检查。类似于以前的研究结果gydF4y2Ba26gydF4y2BaISO(100µM)迅速刺激增加3 - 4赫兹CBF 30 - 90分钟后,紧随其后的是随后的恢复或减少基线击败2 h后曝光(图6gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。这刺激响应ISO受阻时细胞预处理HDE 1 h为5%。之前的研究表明,引发接触块β-agonist-stimulated CBF的增加gydF4y2Ba14gydF4y2Ba和HDE支气管上皮细胞的刺激引发的释放gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。因此,目前的作者调查引发这HDE纤毛的作用抑制反应。Pre-incubation稀释HDE和20µg兔子anti-porcine引发24 h逆转ISO-stimulated HDE 5%增加的抑制作用CBF(图6 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。anti-porcine的存在引发抗体在HDE CBF没有产生差异而独自HDE(数据未显示)。同形像控制免疫球蛋白抗体没有恢复的能力ISO刺激CBF的HDE(数据没有显示)。这些数据表明,存在引发HDE负责CBF的失去了对ISO刺激响应性支气管上皮纤毛。gydF4y2Ba
猪barn-dust提取(HDE)抑制β-agonist-stimulated增加睫毛的拍频(CBF)被抗体白介素8 (IL)。牛支气管纤毛上皮细胞预处理的有或没有被稀释5% HDE 1 h暴露于100年之前µM异丙肾上腺素(ISO)≤4 h。)ISO +媒体(▪)显著刺激增加3 - 4赫兹的CBF与媒体控制(□)在一段时间的30 - 90分钟的曝光。CBF∼1 Hz的增加是由于5% HDE (○)。Pre-incubation HDE封锁了5% ISO CBF的刺激(•),导致与媒体控制相比没有变化。b)隔夜pre-incubation HDE和引发抗体(anti-IL-8)恢复ISO刺激CBF的能力gydF4y2Ba与gydF4y2BaISO-stimulated细胞暴露于HDE和不与anti-IL-8预处理。▵:anti-IL-8 pre-incubation HDE;▴:anti-IL-8 pre-incubation HDE然后暴露于ISO。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p < 0.005。gydF4y2Ba
HDE包含引发gydF4y2Ba
确定的存在引发猪谷仓灰尘、免疫印迹分析进行HDE样品。六种不同的样本猪谷仓尘埃,每从一个不同的农场,准备在水溶液中描述的材料和方法部分。样本被解决通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和西方涂抹使用兔子anti-porcine引发抗体。观察8 kDa蛋白质乐队在所有样本化验(图7所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。消极的控制,GFDE证明没有猪引发(数据没有显示)。使用猪引发抗体识别牛引发的六种不同HDE样本中平均258.3 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba引发,由ELISA。这些数据表明,猪有猪引发谷仓灰尘。gydF4y2Ba
识别白介素8 (IL)在猪barn-dust提取(HDE)。a)六种不同的样本HDE (f)是解决通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和使用猪引发抗体进行免疫印迹。HDE证明反应蛋白乐队在∼8 - 9 kDa认可anti-IL-8抗体在所有尘埃样本化验。b) HDE样品f被ELISA对引发化验。平均(Av) 258.3 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba引发六HDE样本中,检测出。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
在目前的研究中,提取猪谷仓灰尘增加基线纤毛在跳动gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba牛细胞模型。然而,它也被观察到接触猪谷仓灰尘阻塞的能力β-agonist, ISO,刺激增加纤毛跳动。纤毛的刺激“斗或逃”反应,正如β-agonists模仿的,可能更重要的是在黏膜纤毛的间隙比维护基线跳动。这些观察结果也强调纤毛刺激途径可能涉及不同的监管机制的细胞机制维护基线不断纤毛跳动。gydF4y2Ba
这些观察结果有潜在影响的有效性在猪β-agonists关押机构工人。普尔,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba27gydF4y2Ba报道,大多数猪兽医和气流阻塞并没有证明与β-agonists可逆性。虽然机制β-agonists调解bronchodilation和黏膜纤毛的清除可能不是完全相同的,缺少肺量测定法响应β-agonists表明暴露于猪谷仓灰尘干扰的可能性β-agonists调节气道功能的能力,和符合HDE阻止ISO-stimulated CBF的能力。gydF4y2Ba
目前的数据显示,支气管上皮细胞生成没有回应HDE曝光gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba。同样,提高呼出正常人没有报道gydF4y2Ba24gydF4y2Ba和工人gydF4y2Ba28gydF4y2Ba暴露于猪关押机构灰尘。目前作者发现没有重合的高程基准水平增加纤毛跳动HDE-exposed细胞,和HDE影响击败没有合酶抑制剂L-NMMA纤毛被封锁。没有建立监管机构的纤毛,首次报道控制刺激增加在耆那教的跳动gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。的功能性意义NO-elevated跳动在回应HDE还不清楚。目前的gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba研究代表急性暴露的幼稚细胞。事实上,长时间曝光HDE展出回到相同的基线殴打媒体control-exposed细胞。这与快速HDE对β-agonist-stimulated纤毛跳动。然而,这将是有趣的探索猪隔离灰尘的效果没有和纤毛击败天真的科目。天真的主题有更明显的炎症反应比猪监禁工人呼吸道,可能表明一个适应环境发展的工人gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
接触HDE 1 h完全封锁了ISO刺激纤毛跳动。在探索这种抑制的机制,目前的作者发现,中和引发水平HDE恢复了ISO纤毛刺激反应。这个观察同意先前的发现引发使感觉迟钝β-agonist响应gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。在这研究中,结果表明,该机制引发的抑制反应是腺苷酸环化酶的水平并不是由于β-adrenergic受体的改变gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。研究表明,粒子本身并不会改变β-agonist受体,在人体应对β-agonist后粒子滴注法gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba。虽然已经表明HDE刺激引发的一个重要生产和释放6-48 h后曝光gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,纤毛的脱敏效应发生在1 h HDE暴露在当前的研究中。这种快速脱敏效果建议引发的存在灰尘和免疫印迹证实了此事。然而,它更有可能持续β-agonist HDE脱敏反应还包括气道上皮的刺激引发在更长一段时间。gydF4y2Ba
也有可能短期内有机粉尘刺激可能类似于β-agonist刺激,它需要一个“飞行”。这可能代表一个不同的差异从维护基线击败没有改变。这班飞机HDE可能,因此,使感觉迟钝或刺激反应。另外,HDE可能激活支气管上皮细胞蛋白激酶C (PKC)gydF4y2Ba15gydF4y2Ba和发表的观察是一致的,PKC-activating代理导致纤毛的放缓gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba。HDE-mediated激活PKC的同种型可能导致纤毛axonemal蛋白质磷酸化事件导致纤毛飞行的解偶联反应。gydF4y2Ba
尽管目前的研究表明,HDE包含引发,导致CBF的规定,可能其他成分的尘埃也参与其中。研究描述组件HDE负责刺激气道上皮细胞引发释放正在进行。HDE调解引发释放的组件(s)似乎是一个大分子(s)是稳定在沸腾,酸和碱处理(数据未显示)。进一步的工作需要确定这些大分子的具体性质,从而诱导引发生产和是否这些分子也直接监管基线或ISO-stimulated纤毛跳动。gydF4y2Ba
总之,在黏膜纤毛的清除功能障碍发生在工人长期接触猪监禁操作环境。这个功能障碍的机制是复杂的。尘埃摘录这些设施改变纤毛的基线,明显降低β-agonist-enhanced跳动的频率。在某种程度上,一氧化氮介导这一过程。此外,小说组件,interleukin-8,被发现在尘土中提取,这或许可以解释观察到的快速黏膜纤毛的间隙的变化。gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
J.H. Sisson是由国立卫生研究院的资助(2 r01aa008769)。退伍军人事务的部门授予绩效审查又怀亚特和D.J.伯格。疾病控制和预防中心(CDC) /美国国家职业安全与健康研究所”(NIOSH)授予了D.J.伯格(1 r01h008539)。这个工作的内容是完全的责任作者,不一定代表官方的资助机构。又怀亚特是美国肺脏协会职业侦探。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2007年2月6日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2008年1月7日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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