文摘
本研究的目的是评估纤维共焦荧光显微镜(FCFM)肺泡呼吸系统作为成像工具在活的有机体内在支气管镜检查。
488 nm波长激发FCFM设备被用在41个健康受试者包括17主动吸烟者。局部麻醉后,1.4毫米miniprobe引入了支气管镜肺泡渠道和先进的远侧地工作。形态学和细胞进行选择分析框架窝藏最小的压缩效果。
在活的有机体内从每个肺腺泡的缩微成像得到段除了顶端和后段的上部叶。可复制的模式,对应的弹性框架轴向和周围间质系统,记录从192年独立的腺泡。均值±sd厚度10±2.7μm腺泡的弹性纤维。肺泡口直径(平均±sd278±53μm)正态分布,但小出现在右上叶和右内侧基底段。小叶微血管(平均直径90μm)均匀分布在整个肺。在不吸烟者肺泡巨噬细胞没有检测到,而一个特定tobacco-tar-induced荧光观察吸烟主题,提供细节的肺泡壁和巨噬细胞。很强的相关性被发现每天吸烟的数量与大型和移动观察巨噬细胞的数量在活的有机体内与巨噬细胞的强度,以及牙槽炎。
纤维共焦荧光显微镜可以准确的外围勘探肺在活的有机体内吸烟者和非吸烟者。
可用的最薄的外径支气管镜不可以呼吸道形象在活的有机体内在细支气管直径小于3毫米1。因此,远端肺的病理目前正在评估在体外,使用技术,如支气管肺泡灌洗和组织学transbronchial或开放肺活检。没有可用的实时成像。
纤维共焦荧光显微镜(FCFM)是一种新技术原理的基础上共焦荧光显微镜2,3,显微镜物镜所取代fibreoptic miniprobe,成千上万的纤维制成的核心。可以引入到2毫米miniprobe工作的灵活的支气管镜提供通道在活的有机体内endomicroscopic实时成像人类呼吸道4。
在先前的研究中,FCFM被用来评估近端支气管壁的自体荧光显微组织在活的有机体内,表明合成的主要内生荧光团FCFM信号是弹性蛋白4。
弹性纤维,具有可扩展性和弹性肺系统,代表50%的肺结缔组织5。在腺泡,弹性蛋白存在于轴向骨干肺泡管和肺泡的入口,以及在外部微血管extra-alveolar的鞘5- - - - - -8。这个轴向系统互联的周围间质系统延伸穿过小叶间隔向胸膜8,9。以前的观测在近端支气管后,当前的作者提出,FCFM能够形象远端肺弹性框架结构在活的有机体内10。
本研究描述了使用FCFM生产体外和在活的有机体内endomicroscopic远航空公司的图像,从远端细支气管肺泡管和囊,在吸烟者和非吸烟者的健康。当前的研究的主要目的是评估获得可再生的可能性,实时FCFM在活的有机体内在人类的腺泡结构成像的支气管镜检查。
方法
体外组织样本
保存完好的样品存储在戊二醛是正常的人类肺大肠韦贝尔地提供了(解剖学研究所,伯尔尼,瑞士)。这个示例已经固定原位不久事后剖析20而言不啻以恒定的压力2啊,所11。FCFM成像后,清白的部分的样本被认为使用荧光显微镜数字化488 nm励磁(Leitz则Aristoplan;德国徕卡微系统,Bensheim)。叶切除术是在吸烟者和不吸烟者获得患者的样本。先用FCFM新鲜的部分进行了研究,使用显微操纵器应用探测到新鲜组织切片,其次是组织病理学分析相同的组织区域。
主题
吸烟者和不吸烟者健康的志愿者,选择来自鲁昂临床研究中心(法国鲁昂)文件系统,是前瞻性临床试验中。受试者正常胸片和呼吸功能测试,也没有呼吸,心脏或出血失调。临床研究是鲁昂大学伦理委员会批准(法国鲁昂,),法语和法国安全范围防疫线des的德桑特(圣德尼、法国)。受试者签署书面知情同意过程之前,和他们的参与是对健康志愿者注册到法国国家数据库。
在活的有机体内肺泡探索
在活的有机体内支气管镜的过程在仰卧位进行自发呼吸,局部麻醉后航空公司。4.4毫米的支气管镜(MP60模型;奥林匹斯山,日本东京)插入到航空公司最小的可及支气管。那时的FCFM miniprobe引入工作通道,轻轻的先进到远端细支气管直到肺泡系统观察。8支气管肺泡地区先后探索通过选择不同的细支气管的一侧支气管肺(左或右)和相应的位置是根据国际注册支气管肺段命名法12。连续实时肺泡图像记录在程序和存储进行进一步分析。后立即到达肺泡,探测器略回落到失去了联系,以确保调查到肺泡系统最小的压缩效果。一个胸部x光之前和之后执行过程。
FCFM成像和光谱分析系统
的FCFM Cellvizio®一样分光镜原型用于当前的临床研究提供的莫纳克亚山技术(法国巴黎)。在当前使用的系统研究不同于商用Cellvizio®一样设备(图。1⇓)的光谱通道,使光谱的同时记录和显微图像观察的视野4。成像系统产生9帧·s−1896×640像素的图像和一个圆形600 -μm直径的视野。的横向分辨率和深度调查的重点是3.5μm 0-50μm,分别。系统的原理图,以及探针尖端的相对大小和远端肺结构,如图1所示⇓。系统提供了在线的细节补充材料。
)图的Cellvizio®一样系统(莫纳克亚山技术,法国巴黎)和相对大小的1.4毫米探针尖端和b)细支气管和肺泡结构。)纤维的共焦荧光显微镜系统由几个组件:一个1.4毫米的微型柔性纤维miniprobe由成千上万的纤维芯(右上),488 nm激发波长激光源,XY扫描系统(左上),和一个专用的控制和采集软件,允许实时动态图像的重建。注意,图中的光谱通道并不代表;完整的光谱系统之前描述的细节4。b)的顶端miniprobe是叠加在7-μm固定远端细支气管腔肺组织切片。c) miniprobe是叠加在一个肺泡管系统。白色栏对应于纤维束的直径(600μm)。
图像分析
的定性和定量评估的目的,图像intralobular结构是从之前的最后一个帧记录精心挑选撤回调查时失去了联系。这确保了肺泡的变形最小。
的形态学分析intra-acinar结构(即。厚度的弹性蛋白纤维,肺泡环入口和微血管直径)以及动态和细胞分析(即。运动,每视野肺泡巨噬细胞的大小和数目)分别由两个观察员(l . Thiberville和m . Salaun)使用专用软件(MedViewer®1.1.1;莫纳克亚山的技术)。软件允许回顾性观察的数据,图像的图像,以及测微的测量荧光结构。
荧光强度是量化使用MedViewer®的信号量化工具箱,上下阈值水平的查表设置为1到8000年,分别。荧光强度定义为像素的中值强度在整个选择的形象。考虑到可能的变化由于使用的光学性质不同miniprobes在这项研究中,在活的有机体内组织荧光强度是正常的与一个已知浓度的荧光强度acriflavin解决方案(1/1200 w / v;西格玛奥德里奇,圣路易斯,密苏里州,美国)。结果也表示为支气管肺泡/荧光比率,使用近端支气管参考图像在每个主题。这使得(组间比较即。主动吸烟者与不吸烟的科目),同时考虑到主体间荧光变化由于其他原因,如潜在的内在弹性蛋白荧光的变化。
统计数据
比较使用卡方和Mann-Whitney测试执行,方差分析或在需要时斯皮尔曼相关测试。常态分布使用Shapiro-Wilk测试评估。p < 0.05的值被认为是重要的。
结果
体外FCFM固定和新鲜的人类肺样本
如图2中可以看到⇓和在网上补充视频,系统分辨率图像成为可能的细节在肺泡壁毛细血管网络(图2⇓),胸膜肺表面的结构(图2 b⇓)和支气管上皮细胞层的表面(图2摄氏度⇓)。成像是可行的因为很强的自发荧光的每个结构样本,包括红细胞,引起长期在戊二醛固定时间。这个长期固定组织成像相比,FCFM新鲜肺组织专门成像的结缔组织的弹性蛋白组成部分远端肺基于其自然自发荧光(在线补充图1⇑)
a - c)纤维共焦荧光显微镜(FCFM)的图像保存完好的肺样本在戊二醛固定20而言不啻2O压力和d-f)与相应10-μm清白的组织学部分,使用油浸显微镜数字化成像。两种成像模式进行488 nm波长激发。一)FCFM肺泡管系统的成像显示细节的毛细管网肺泡壁(黑色箭头)。后获得的图像应用探针上的蜂窝状的部分样本。看到动态的在线补充视频序列。b) FCFM肺胸膜表面看到的图像。#:肺泡壁胸膜的连接到周围结缔组织。c) FCFM成像在显示一个支气管在面对的上皮细胞层。杯状粘液细胞出现黑色的斑点(白色箭头)。d)荧光显微镜10-μm厚的部分对应的肺泡壁),显示的细节fixative-induced荧光红细胞在肺泡毛细血管网络(黑色箭头)。e)荧光显微镜、胸膜和相邻肺泡壁部分。f)支气管部分对应的荧光显微镜(c),白色箭头:杯状细胞与胞质粘液出现在黑色的。规模酒吧= a - c) 50μmμm 10 d), e) 20μm 25μm和f)。
在活的有机体内支气管肺泡腔镜的成像主动吸烟和不吸烟的科目
共有41名健康受试者(男性)19日招募,其中17主动吸烟者。不吸烟的受试者中,20个从不吸烟和三位曾经抽过烟已经停止吸烟8、18和20岁。一个主题是一个偶尔吸烟者(1香烟·月−1),被归类为不吸烟的人。这个话题没有抽2个月,但一直被动吸烟暴露于3天前的过程。研究对象的主要特征如表1所示⇓。
宽容的过程
均值±sd肺泡成像时间11±5分钟(表1所示⇑)。过程是无痛的除了少数受试者表明瞬态疼痛对肺区域探索,表明调查达到了胸膜下区。没有观察到近端支气管树出血。术后胸部影像表现是正常的。
在活的有机体内远端细支气管成像
共有215个细支气管地区探索(表2所示⇓)。由于难以弯曲的支气管镜里面探头时,顶端和后段的上部叶(B1和B2)无法联系。每隔一段两肺中很容易评估程序。
远端细支气管的endomicroscopic成像在线补充材料说明(补充图2⇑和在线视频)。在这个级别,FCFM确定了螺旋状的印记的peribronchiolar肌肉内表面的细支气管(在线视频)。由于各自大小的探测器和远端细支气管结构(图。1⇑),在呼吸细支气管肺泡的味蕾中确定只有两例(补充图2⇑和在线视频)。进入肺泡空间是通过细支气管壁经常通过渗透(在线视频)。
在活的有机体内腺泡的FCFM成像不吸烟的人
在腺泡的层面,FCFM不吸烟的学科专门成像的弹性框架肺泡导管、肺泡入口环和微血管extra-alveolar,典型的方面显示在图3⇓,图4⇓和在线视频。
在活的有机体内肺泡共焦荧光成像探针尖端的相对位置和肺泡管轴(不抽烟的人健康的志愿者)。两者不同的观点的肺泡管表示根据d)示意图韦贝尔表示的外围肺弹性骨干(修改8出版商的许可)。厚彩色箭头:应该渗透的角度miniprobe进入肺泡。在不吸烟者,纤维共焦荧光显微镜(FCFM)主要成像系统集中在轴向的弹性蛋白纤维(表示为橙色和黄色的线在d)),形成肺泡管的边缘边缘地区(黄色)和肺泡环入口(橙色)。a)斜管轴向纤维的系统视图,显示螺旋或循环管的形状的边缘(箭头)。b)轴系统的横向视图,显示肺泡开口的弹性蛋白纤维相互连接的框架肺泡管,“ladder-stitch”的方式。两个连续的图像显示肺泡管沿其纵轴的伸长与呼吸同步(在线视频7)。白酒吧:肺泡入口的大小变化。c)视图的轴管,显示肺泡环入口后面的飞机(#),由于轻微的压缩效应(见在线视频6动态序列)。酒吧= 50μm规模。
![图4 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/33/5/974/F4.medium.gif)
肺泡嘴(a, c和d)和小叶微脉管(b, e和f)测量。分布的)肺泡嘴和b)小叶微脉管直径。c和d)肺泡环测量的例子。白色箭头:入口环的大小最小压缩。e和f)的例子extra-alveolar微脉管测量。黑色的箭头:直径测量上游船舶分岔。酒吧= 50μm规模。
的在活的有机体内框架方面的远端间隙的变化取决于渗透的角度探讨肺泡的单位。直接查看的轴管或一个斜视图通常是获得,“螺旋”或“循环”的管道的弹性结构的形状可以很容易地承认(图3⇑和c和在线视频)13。相比之下,横向的角度可以显示肺泡管的延伸沿其纵轴,以及由此产生的伸长的入口环与呼吸同步周期(图3 b⇑和在线视频)。
图5⇓在线视频显示探针尖端的后果的腺泡结构压缩到肺泡管的前面。这些图像显示,压缩使深层结构的可视化的轴管,提供类3 d效果,没有明显的变形结构的第一架飞机的焦点。
一)体外和b)在活的有机体内探针尖端的后果压缩应用于肺组织肺泡管的轴线。从左到右:越来越大的压力对组织的影响(见在线视频的动态序列)。一)体外固定样本。b)在活的有机体内纤维共焦荧光显微镜图像从一个不吸烟的人。虚线箭头:肺泡管的边缘;箭头:连续出现的遥远的肺泡管结构。压缩允许可视化的深层结构的轴管,提供类3 d效果,没有明显的变形集中的第一架飞机。酒吧= 50μm规模。
腺泡的荧光结构测量和再现性
肺泡结构在192年达到的215支气管部分探索(表2⇑)。图4⇑显示肺泡嘴直径测量的例子,选择图像上执行以最小的压缩效应。表1⇑和2⇑表示的意思是肺泡嘴直径测量技术。直径从274肺泡嘴评估在活的有机体内出现了正态分布(Shapiro-Wilk测试;图4⇑),意味着±sd大小为278±53μm(表1所示⇑)。肺泡的嘴似乎小得多的腹段的右上叶(RB3)和正确的内侧基底/ paracardiac段(RB7),相比与其他肺段探索(p < 0.001,方差分析;表2⇑)。
均值±sd弹性纤维的厚度是10±2.7μm整个组的主题(909测量;表1⇑)。
图4⇑重建和在线视频(拼接)14节目通常FCFM小叶微血管的外观在活的有机体内。共确定了250种不同的微血管(表1所示⇑和2⇑)。与肺泡入口,微血管直径不是正态分布由于罕见的大型船只的存在(图4所示⇑)。小叶微血管的粒度中值是90±50μm(表1所示⇑)。出现均匀分布在整个肺(表1所示⇑和2⇑)。
没有显著差异在肺泡洞口大小或微脉管直径根据年龄和性别的受试者(数据没有显示)。
吸烟者肺泡成像的活跃
在吸烟者肺泡荧光成像技术成像的不同显著不吸烟者(图6所示⇓)。肺泡入口和肺泡导管的吸烟者通常是充满了高荧光细胞,可以清楚地观察到的运动(见视频)。支气管肺泡灌洗的分析吸烟者使用荧光和传统显微镜证实,这些荧光细胞专门对应肺泡巨噬细胞15。
荧光观察巨噬细胞在每一个吸烟的话题除了一个雪茄(表1所示⇑)。相比之下,没有可检测荧光细胞的肺泡空间不吸烟的话题,除了一个主题严重暴露于被动吸烟3天前的过程。因此,荧光细胞成像出现非常具体的吸烟者的健康个体(p < 0.0001;表1⇑)。
由于吸烟者,具体对比成像体的结构有时可检测肺泡表面(图6 c⇑和在线视频)。此外,肺泡壁的细节在吸烟,也可以发现包括深处像科恩的毛孔和细纵向结构兼容毛细管网的表面(图6 d⇑)。
起源的肺泡荧光吸烟和不吸烟的人
荧光光谱分析的吸烟和不吸烟的人显示在图7中⇓。图7⇓显示正常的自体荧光发射光谱中获得的在活的有机体内alveoscopy从人类lung-extracted不吸烟的主题和弹性蛋白粉。实验重复了很多不吸烟的话题显然表明FCFM信号起源于周围肺的弹性蛋白骨干。
![图7 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/33/5/974/F7.medium.gif)
自体荧光发射光谱的肺泡系统)不吸烟者和b)健康的吸烟者,期间在活的有机体内alveoscopy。蓝色:弹性蛋白粉;红色:不抽烟的肺泡;绿色、粉红色、黄色:吸烟者肺泡;布莱克:抽香烟。盟:任意单位。
相比之下,图7 b⇑显示从远端获得的光谱过滤器的抽香烟相比在活的有机体内从几美元主动吸烟者肺泡自体荧光光谱。自体荧光光谱从主动吸烟者肺泡和熏烟焦油是相似的,除了最初的肺泡曲线弹性蛋白对应组件的一部分。
自发荧光信号的强度的一个重要变化是观察之间的话题与他们的年龄,最古老的个人表现最强的信号(r = 0.61, p = 0.0036;斯皮尔曼相关测试)。
近端支气管和肺泡的荧光强度值如表1所示⇑。而近端支气管荧光强度出现类似于吸烟和不吸烟的人,肺泡和支气管强度比率明显高于吸烟者被发现(p < 0.001, Mann-Whitney测试)。在主动吸烟者肺泡/支气管荧光比率也出现与肺泡巨噬细胞的数量每视野(r = 0.50, p < 0.001;斯皮尔曼的测试;图8 b⇓)。
纤维共焦荧光显微镜(FCFM)细胞成像在吸烟的人。一)在活的有机体内巨噬细胞牙槽炎FCFM成像。每天吸烟的数量与荧光观察巨噬细胞的数量每视野(r = 0.70, p < 0.0001;斯皮尔曼相关测试)。b)支气管肺泡/荧光强度比。肺泡荧光强度与巨噬细胞的强度出现牙槽炎(r = 0.50, p < 0.0001;斯皮尔曼相关测试)。c)大激活巨噬细胞在吸烟者。每天抽烟的数量之间的相关性和巨噬细胞的平均数量> 30μm /探讨肺泡区(r = 0.77, p = 0.0002;斯皮尔曼相关测试)。d)在活的有机体内巨噬细胞移动的FCFM成像。每天抽烟的数量出现在主题呈现移动肺泡巨噬细胞(MM;均值±sd16.5±4.35香烟·天−1)与固定巨噬细胞组相比(即时通讯;6.75±4.08香烟·天−1;p = 0.0019;Mann-Whitney测试)。数据意味着±sd。
表1⇑显示了主体间荧光变化的标准差(表示为肺泡和支气管荧光强度比)。荧光变化主动吸烟者与不吸烟的受试者相比,价格高与tobacco-induced巨噬细胞牙槽炎的强度(p < 0.001,费雪的方差比较测试)。
非吸烟实验对象的个体内变异出现低于inter-individual可变性(0.095与分别为0.17)。
讨论
通风和气体交换可以通过各种各样的改变(DPLD)、弥漫性肺实质疾病的诊断可以使用高分辨率计算机断层扫描和非成象接洽内镜程序16,17。
在许多情况下,诊断DPLD需要外科肺活检,从不同的叶与多个采样18- - - - - -21。这些程序并不缺乏发病率,通常不能重复在同一病人,尽管随着时间的推移,组织病理学变化的可能性22- - - - - -24。在这种背景下,发展一个在活的有机体内,微创肺外围显微成像方法极大的需要。
broncho-alveoscopy过程描述在目前的研究是第一次技术,可以获得实时、高分辨率、支气管和肺泡肺结构的微观结构图像在人类生活。
在当前一系列主题,它已经表明,这项技术是非常良好的耐受性,曝露在局部自然呼吸。由于缺少痛觉感受器的支气管胸膜下水平,探讨肺小叶的渗透通过远端细支气管壁是无痛的。此外,腺泡的成像与检测无关近端气道出血,与通常与transbronchial活检取样观察什么。这可以解释为小薄滋养血管的血流量的细支气管壁,低压的肺泡毛细血管,可以改变在调查的进展,以及探针尖端的光滑设计,可以取代extra-alveolar微血管无损伤。最后,没有观察到胸膜并发症,尽管多个肺段在内镜成像。因此,荧光broncho-alveoscopy似乎是一种微创手术,随着时间的推移可以重复同样的话题。
弹性蛋白网络获得的成像在活的有机体内技术似乎非常相似的观察是什么使用微妙的肺保护的方法和具体的弹性蛋白染色体外5- - - - - -7。在目前的研究中,可再生的图像包围肺泡开口的弹性纤维,增强肺泡管和肺泡边缘地区的围绕着extra-alveolar微血管。经过仔细选择的图像对应于最小压缩结构,发现肺泡开放大小正态分布在整个系列的主题,与平均值兼容使用无偏stereological方法观察到的是什么在体外25,26。在当前的在活的有机体内系列中,肺泡口直径的变化也占肺泡管尺寸的修改与呼吸。这或许可以解释这一事实小肺泡的嘴被观察到在B3和B7段,可能与降低通风这些片段的仰卧位。技术还允许小叶微血管的精确测量,出现同样的但不是正态分布在整个肺部,由于罕见的大血管的观察。这些结构的更多信息可以在未来通过使用静脉注射荧光素溶液,其分布动力学应该能够区分前毛细管的柱毛细管的小动脉血管。
一些技术问题应该解决对的解释远端肺FCFM成像。第一,因为的正交分支的小口径终端和呼吸细支气管在人类与探针的大小相比,定期绕过呼吸细支气管肺泡成像,发现只有两例在当前系列的观察肺泡芽分支的墙壁。这可能代表一个限制的研究远端膜和呼吸细支气管27。这个困难也许在将来会被解决通过使用薄探测器,如用于小动物成像的28。在过程中,探针必须进步通过细支气管壁和peribronchiolar结缔组织在稳定之前小核果。直接视图下肺泡管的轴线通常可以获得(见视频),大概是因为弹性结构的电阻探针级数较高的中心轴向纤维系统,胶原蛋白和弹性蛋白的浓度是最大的地方5。然而,肺泡管的图像从其他角度也可以观察到,很难解释,但可能提供其他重要信息,如可扩展性的程度的肺泡管沿轴。
其次,调查进展到小叶认为肺泡壁的破坏,紧随其后的是一个压缩影响抗导管结构。最小成像失真观察调查时应用的轴管,导致更多的细节在后台的可视化飞机比50-μm所谓的系统的焦深28。接近第一架飞机的重心向底板,这产生了越来越工作距离的假象,生成的三维光学效果。虽然压缩肺泡结构显得更为微妙的控制在活的有机体内,发现最好的结果可以通过轻轻拉回调查一旦肺泡成像获得和分析之前的最后一个图像联系就中断了。这种技术提供了可再生的成像和测量的肺泡结构。
第三,荧光缩微成像有一些优势和局限性,应该强调。与反射成像,荧光缩微成像没有干扰的反射和折射光在气液界面,因为背散射激发光探测系统过滤掉。这仅仅是产生一个小信号强度下降在气液界面,没有其他光学人工制品。在目前的研究中,这个属性允许泡沫状结构的可视化以及荧光细胞在液相的存在。这些观察表明,少量的液体探测器尖端调停,可能导致成像信号。这种液体界面的性质不能确定从目前的观察,但可能与少量的支气管粘膜液沿着在调查的进展,或覆盖肺泡壁的表面活性剂。
相反,FCFM专门记录信号来自荧光结构响应适当的激发波长。虽然在活的有机体内FCFM在不吸烟者只有成像外围和轴向结缔组织的弹性蛋白,文献的数据表明,这些信息可能有助于探索一些病理条件。肺泡弹性网络的定性和定量的修改已经证明体外在通常的间质性肺炎和肺气肿29日,30.。弹性蛋白的改变也被观察到肺腺癌,这对应于intratumoural疫源地的活跃与不良预后相关成纤维细胞增殖的肿瘤31日,32。因此,这项技术可能被证明是有用的在一个大的各种疾病,包括间质性肺疾病。
在这一系列的健康志愿者,唯一可检测细胞是肺泡巨噬细胞含有烟草焦油。这明显有区别的吸烟者与不吸烟者的基础上FCFM图像,并指出烟草焦油作为外源荧光团参与特定肺泡成像。在当前的研究结果表明,FCFM可以精确地评估早期腺泡的tobacco-induced变化,如巨噬细胞数量、规模和流动性,表明该技术可以应用于探索吸烟者的肺部疾病33。
观察到的腺泡结构的简化视图在活的有机体内在不吸烟的受试者与肺泡毛细血管网的详细的成像和荧光红细胞从固定获得人类肺样本。如此详细的成像已经被别人观察固定样本使用传统共焦荧光显微镜30.。当前作者的所知,这是有关修改组织荧光诱导的长期醛固定34,35。这个观察证实,内生荧光团的性质代表了FCFM成像的关键因素,超过系统的解析能力。未来演进的技术可行的利用各种波长的组合出现36,这可能使它可以形象同时几个肺连接网络的荧光团,如胶原蛋白和弹性蛋白的物种。此外,研究患者可以观察其他荧光细胞在健康受试者通常不可见的。
总之,荧光broncho-alveoscopy是一种微创、安全技术,可以在自发地进行呼吸。定义当前的研究代表了最初的一步在活的有机体内纤维共焦荧光显微镜正常的人类肺的肺泡成像。这个描述将是有用的为特定的研究纤维共焦荧光显微镜异常周边肺部疾病。等异常可以测试诊断指标和容易监控测试治疗干预的疗效。
支持声明
这项研究得到了法国Canceropole西北(法国里尔),法国卫生部(项目医院矫揉造作的倩碧2007;法国巴黎)和ADIR(法国鲁昂,)。本研究的独特的赞助商是鲁昂大学医院(鲁昂),设计了研究并进行了数据收集、分析和解释,和报告的写作,独立于任何商业实体。
感兴趣的语句
感兴趣的语句为l . Thiberville和研究本身可以发现www.www.qdcxjkg.com/misc/statements.dtl
确认
作者感谢大肠韦贝尔,m . Ochs解剖学研究所伯尔尼,瑞士,向他们提供一个保存完好的和固定的人类肺样本,以及对他们很有帮助的评论的解释在活的有机体内FCFM肺泡成像。鲁昂大学临床研究中心的帮助(法国鲁昂)非常感谢招聘健康志愿者。
脚注
可以从这个手稿补充材料www.www.qdcxjkg.com
- 收到了2008年6月3日。
- 接受2008年12月17日。
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