文摘gydF4y2Ba
总血浆DNA可以是一个有前途的非侵入性的评估工具来监控细胞毒性治疗的影响来预测治疗效果处于初期阶段。gydF4y2Ba
血浆游离DNA水平量化前的第一,第二和第三周期的化疗晚期患者42 nonsmall细胞肺癌与对治疗的反应,所评估的计算机断层扫描后第三个化疗周期。gydF4y2Ba
显著降低血浆DNA水平,测量各种治疗前周期,缓解或稳定疾病患者被发现比与进展。高水平和降低血浆DNA水平不足化疗过程中表示贫穷的结果。预测治疗反应,不足26.9%的灵敏度达到100%使用等离子体特异性DNA水平之前第一个治疗周期。实现预测疾病进展的敏感性35.7%,特异性100%使用血浆DNA水平之前第一个治疗周期。gydF4y2Ba
监测血浆DNA水平化疗过程中可以确定患者可能表现出足够的治疗反应和疾病进展处于初期阶段。这可能有助于在赋予个性治疗,并可能导致肺癌晚期的更好的管理。gydF4y2Ba
肺癌是癌症死亡的主要原因。在印度和世界各地gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。虽然时间埋葬存活率较低(< 15%)已经改变了最小自1980年代中期以来,新的代理正在为了提高识别的结果。治疗晚期肺癌患者,除了一线化疗,二、三线化疗和靶向治疗药物有一些当前使用的治疗方案gydF4y2Ba2gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。然而,缺乏一个简单而有效的工具,预测早期治疗过程中治疗效果已经限制进步在改善这些患者的生存。尽管正电子发射断层扫描,单独或结合计算机断层扫描(CT),展示了一些潜在的治疗效果的评估gydF4y2Ba5gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,低敏感性,发现只有宏观变化,经过几个周期的细胞毒性治疗,辐射暴露的风险有限的效用监测治疗效果处于初期阶段。因此人们越来越需要更有效的诊断工具:1)预测病人的预后,2)监测疗程,3)检测对治疗的反应处于初期阶段。这将有助于在个体基础上优化疾病管理。生物标志物在循环是很有前途的候选人因为他们的动力学可以反映细胞毒性治疗的效果。与生物相关的优势是,他们考虑肿瘤的异质性以及活动质量。此外,连续的评估生物标记物在细胞毒性治疗可能有助于早期预测治疗效果。gydF4y2Ba
发现肿瘤能够减少DNA进入血液,可恢复血清和血浆和用作替代来源的肿瘤DNA,打开了新的诊断和预后gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。凋亡细胞死亡是游离DNA存在于血液循环的主要来源(cfDNA)。值得注意的是大多数细胞毒性治疗引起细胞死亡的凋亡,导致cfDNA的释放。的量化细胞死亡在肿瘤组织中通常只需要侵入性程序和评估异构病理生理过程的一部分,cfDNA动力学的分析可能是另一种细胞毒性监测治疗,因为它可以很容易地测量连续过程中疾病和治疗。gydF4y2Ba
保持这些观察焦点,本研究设计的目的是分析水平的功效cfDNA同质组监控一线化疗的晚期nonsmall细胞性肺癌(NSCLC)患者。主要目标是确定cfDNA水平是否能预测反应治疗或疾病进展(P)在晚期非小细胞肺癌的早期阶段。此外,cfDNA的效用在非小细胞肺癌患者生存预后因素评估。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
病人gydF4y2Ba
在这种前瞻性研究中,42新诊断和治疗晚期非小细胞肺癌患者进行评估。只有那些病人至少三个周期的化疗中学习。共有100个控件(良性肺疾病患者,包括32与慢性阻塞性肺病,26个肺结核,33个结节病,四个支气管扩张和五间质性肺病)也包括在内。所有患者进入门诊医学部门的全印度医学科学研究所(新德里,印度)在2006年- 2009年。对所有患者,诊断为肺癌组织学检查证实了活检和/或细胞学标本中获得fibreoptic支气管镜检查或计算机程序。预处理评估包括评估东部合作肿瘤组(ECOG)性能状态,摄影和胸部和上腹部CT扫描。如果有必要,CT或磁共振成像扫描的大脑和放射性核素骨扫描进行。所有的病人都上演了根据国际研究协会建议的肺癌(IASLC)非小细胞肺癌分期委员会gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。流行病学数据,包括人口结构、阶段,肿瘤大小和组织病理学的数据,和风险因素,包括吸烟和饮酒习惯,也被记录下来。吸烟者被定义为一个人一生中吸烟> 20 pack-yrs比迪烟或支(bidi吸烟作为一个传统的印度产品是由印度烟草岁手裹着tembhurni叶,要点一端和其他与薄字符串绑定)。never-smoker被定义为一个人一生中不吸烟> 100比迪烟/支。吸烟久被计算为吸烟的产品持续时间(年)和包的平均数(gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba每天20 bidi /香烟等价物)吸烟。饮酒习惯定义基于以前的报告gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。饮酒被定义为饮酒的人至少每天一次≥6个月。酒精醉的数量每天消耗数量的产品(毫升)和酒精的百分比在产品(假设啤酒市场3%的份额,10%,棕榈汁为40%,剩下的酒精饮料)。印度和酒精会消耗的数量之和的酒精量相关的饮料,如上面指定的。在非小细胞肺癌患者,对治疗的反应分类根据世界卫生组织(世卫组织)的指导方针,完全缓解(CR)定义为竞争消失的肿瘤病变,部分缓解(PR)作为肿瘤减少≥50%,P作为肿瘤增加≥25%或新肿瘤的外观表现,和稳定的疾病(SD)作为肿瘤减少< 50%或增加< 25%gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。响应测量的放射学检查是独立和失明。伦理委员会批准的这项研究是全印度医学科学研究所,和书面知情同意是获得所有的病人。gydF4y2Ba
cfDNA水平的分析gydF4y2Ba
静脉血液收集无菌EDTA-coated瓶从所有受试者在基线(第一个化疗周期前确定基线cfDNA水平(BV1))。之前收集的血液也是第二个(用于BV2)和第三个周期的化疗(BV3)。在1 h,样本离心机(2500×gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟)和等离子体被整除,储存在-80°C,直到进一步分析。DNA从存储等离子体分数被隔离使用QIAamp DNA血液迷你包(美国试剂盒,瓦伦西亚,CA)按照制造商的指示。从等离子体分离和存储的时间执行血浆DNA提取和量化是< 6个月。此外,为了避免任何血浆DNA水平的变化,存储时间和温度保持类似的样品。孤立的DNA是储存在-20°C,直到进一步的使用。cfDNA是量化使用PicoGreen dsDNA工具包(分子探针,尤金,或者美国)根据制造商的指示。PicoGreen试剂是一个敏感的荧光核酸染色双链DNA的量化的解决方案。短暂,PicoGreen染料稀释1:200与TE缓冲(10毫米Tris-HCl, EDTA约1毫米;pH值7.5)。每个反应包含50μL稀释PicoGreen染料溶液+一个样本的DNA由50μL TE缓冲。 Each DNA sample was analysed in two duplicated dilution series. An ELISA plate containing these reagents was read in the Synergy HT Multi-Mode microplate reader (Bio-Tek, Winooski, VT, USA) at an emission wavelength of 520 nm and excitation wavelength of 480 nm. In order to minimise photobleaching effects, the time for fluorescence measurement was kept constant for all samples. Blank values were subtracted and replicates averaged for each sample. Standard curves were constructed by serial dilution of the lambda DNA stock provided by the manufacturer. Plasma DNA concentrations were determined from a standard curve. The people performing the plasma DNA quantification were blinded to the clinical outcome of the patients at the time of testing.
在目前的研究中,cfDNA水平比较患者P和那些显示缓解(R;CR + PR)和SD为了预测P(评估1)。此外,cfDNA水平R患者相比表现出P和SD为了预测对治疗的反应(2)评估不足。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
为了测试协会与整体生存的病人对治疗的反应,建立了kaplan - meier曲线和log-rank分析各种反应组。gydF4y2Ba
关于生化变量、BV1 BV2 BV3,以及它们之间的变化百分比(BV1-BV2和BV1-BV3),被认为是进行统计分析。克鲁斯卡尔-沃利斯测试用于测量的意义cfDNA水平在预测对治疗的反应。如果发现重要的一个gydF4y2Ba因果gydF4y2Ba分析比较任意两个之间的水平反应组(Bonferroni调整应用;p < 0.017)作为一个重要的价值由Wilcoxon rank-sum测试。弗里德曼的测试申请比较连续cfDNA水平在一组。多个比较进行使用gydF4y2Ba因果gydF4y2BaWilcoxon符号秩检验。此外,cfDNA水平评估的权力单变量区分:1)患者P和没有P (R + SD;评价1)和2)R和R患者(P + SD;评价2)Wilcoxon rank-sum测试。为了识别诊断生物标记不足的治疗效果和P,接受者操作特征(ROC)曲线下的曲线和相应的区域(auc)计算。此外,敏感性,阳性预测值、阴性预测值和截止值检测治疗效果不足和P计算特异性100%(95%可信区间(CI))。为了测试BV1的协会,BV2 BV3与患者的总体生存,建立kaplan - meier曲线和log-rank分析使用他们的中间值作为截止点。与非小细胞肺癌患者的总血浆DNA水平之间的比较和控制使用一个独立样本未配对t检验。的假定值< 0.05被认为是显著的。所有与SPSS统计分析软件对Windows (SPSS 9.1; Stata Corporation, College Station, TX, USA).
结果gydF4y2Ba
病人的特点gydF4y2Ba
42与非小细胞肺癌患者的年龄中位数是55.5年(范围33 - 78岁),和56.5年(范围35 - 86岁)在100年的控制。均值±gydF4y2BasdgydF4y2Ba血浆DNA水平分别为95.1±32.1 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在非小细胞肺癌患者和74.0±19.9 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在控制中,差异非常显著(p < 0.001)。与非小细胞肺癌患者的基线特征给出了gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba。短暂,23岁患者III期19四期疾病和疾病。大多数患者吸烟(85.7%)和鳞状细胞癌(73.8%)。的患者,20每收到紫杉醇+卡铂或顺铂+依托泊苷联合化疗,而两个接受吉西他滨联合卡铂至少三个周期。gydF4y2Ba
病人的相关性特征与生存gydF4y2Ba
进行调查的第三周期化疗后显示四个(9.5%)的42 NSCLC患者显示CR, 12(28.6%)公关,14 (33.3%)P和12 (28.6%)SD。公关结合这些患者CR形成R组(42的16个;38.1%)。平均随访时间为332.5天(范围173 - 864天)。平均生存时间是367天(95% CI 310.0 - -424.0天)。kaplan meier对整体的生存曲线显示显著不同患者之间生存R SD或P (P < 0.001),平均生存时间为528 (95% CI 430.7 - -625.3)、327年(95% CI 320.2 - -333.8)和322年(95% CI 298.3 - -345.6),分别。评价1,R SD患者与P组相比,观察整体存活率显著差异,平均生存时间为416 (95% CI 356.5 - -475.5)和322年(95% CI 298.3 - -345.6)天,分别为(P < 0.001)。同样,病人实现R显示更大的生存时间比P和SD(评估2),平均生存时间为528 (95% CI 430.7 - -625.3)和327年(95% CI 319.3 - -334.7)天,分别为(P < 0.001)。gydF4y2Ba
变量的单变量生存分析也检查,包括年龄、阶段,肿瘤因素,节点状态、性能状态,组织学,吸烟和烟草的习惯,和化疗方案(gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)。一个重要的趋势观察肿瘤的位置(p = 0.036)。肿瘤大小的无意义的趋势(p = 0.057)也被发现。然而,没有观察到其他预后因素之间的相关性和生存(gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
评价cfDNA水平在不同反应组gydF4y2Ba
BV1, BV2 BV3量化在晚期非小细胞肺癌病人42。总的来说,观察cfDNA水平的显著差异在所有三组(R SD和P)。在任何两组相比,显著降低BV1, BV2和BV3观察患者的R或SD相比患者P (gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。然而,R患者区别患者只SD BV3 (gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。cfDNA水平降低患者的R SD或P在化疗期间患者,但增加(gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba;gydF4y2Ba图1gydF4y2Ba)。BV2患者的分数低于BV1各种组75.0 (R), 50.0 (NC)和35.7% (P),和较低的比BV1 BV3 100 (R), 25 (NC)和0.0% (P),分别。gydF4y2Ba
血浆游离DNA的分布(cfDNA)水平在各反应开始前的第一个(□),二(░)和三(▒)化疗周期。框表示中位数和四分位范围;垂直条的显示范围。gydF4y2Ba
的动力学cfDNA周期从1到2,周期1 - 3和周期2 - 3也评估相关的功效区分各种反应组(gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。显著降低cfDNA水平观察从循环周期1 - 3和2 - 3 R相比那些患者P (gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。cfDNA的动力学周期1 - 3和周期2 - 3能够区分患者R SD。然而,动力学cfDNA无法区分SD从这些患者P (gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
评价cfDNA水平预测P和对治疗的反应不足gydF4y2Ba
为了评估cfDNA水平在预测的有效性不足的应对与非小细胞肺癌患者的治疗和P, BV1, BV2 BV3比较在不同反应组。虽然预处理cfDNA水平(BV1)不能预测不足对治疗的反应(p < 0.09),他们能够预测p (p < 0.001;gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。此外,BV2和BV3能够预测对治疗的反应不足和p .此外,cfDNA水平的动力学周期1 - 2 (BV1-BV2),周期1 - 3 (BV1-BV3)和周期2 - 3 (BV2-BV3)是能够预测不足应对治疗(gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
化疗期间诊断的cfDNA水平预测治疗反应不足和PgydF4y2Ba
为了测试的潜力cfDNA水平作为预测生物标志物对治疗的反应不足,ROC曲线被绘制BV1 BV2 BV3。使用BV1不足对治疗的反应可以在绝对预测的敏感性为26.9%(100%)特异性(AUC 0.657;截止值121.1 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)。此外,BV2和BV3能够预测不足对治疗的反应的敏感性为50.0% (AUC 0.805;截止值105.8 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)和80.8% (AUC 0.954;截止值93.8 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),特异性分别为100%。gydF4y2Ba
BV1的相关性,BV2 BV3预测P也评估(gydF4y2Ba图2gydF4y2Ba)。从中华民国曲线,观察到,在所有的价值观,BV2最有效地识别患者P的敏感性71.4%,特异性100% (AUC 0.926;截止值115.6 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)。此外,BV1和BV3能够预测P的敏感性为35.7% (AUC 0.853;截止值132.5 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)和64.3% (AUC 0.952;截止值140.6 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),特异性分别为100%。gydF4y2Ba
![图2 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/36/4/885/F2.medium.gif)
接受者操作特性曲线预测疾病进展的血浆游离DNA水平开始之前第一个(- - - - - - -;曲线下的面积(AUC) 0.853),第二个(- - - - - -;AUC 0.926)和第三(- - - - - - - - -;0.952 AUC)周期的化疗(········:参考线)。gydF4y2Ba
在非小细胞肺癌预后标记cfDNA水平gydF4y2Ba
cfDNA水平之间的相关性在各种治疗周期和生存时间调查42非小细胞肺癌病人化疗和为谁生存数据可用为止。cfDNA中位数水平截止值,患者分为高(高于或等于值)和低(低于中位数)-cfDNA组。之间没有相关性观察BV1和BV2和生存(gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba)。然而,BV3生存显著相关(gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
循环肿瘤DNA的存在在癌症患者的血清/血浆引发了极大的兴趣,因为传统的诊断测试往往是不完美的入侵,造成物流为串行肿瘤采样困难。侵害技术,如血液测试,是有吸引力的筛查、诊断、预后、监测神秘P,识别潜在的治疗目标和监测肿瘤的反应。随着实验室技术的发展,它已成为可能的隔离和量化cfDNA容易血浆/血清和其他体液,如清洗液体(来自各种器官),尿液和腹水gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。随着发现cfDNA来源于肿瘤gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,这种分析可能反映了在人体生理和病理过程,从而使他们发展的一个非常有趣的目标有用的临床分析。等进一步分析可能是商业上可行的由于他们的容易获得市场和成本效益比较更昂贵的成像工具。gydF4y2Ba
第一个证据支持癌症患者血浆DNA的tumoural起源提供了在1980年代末gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。然而,最后证明肿瘤可以摆脱DNA进入循环来自两项研究发现致癌N -gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba等离子体的突变患者骨髓增生异常综合症和急性髓系白血病gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,和K -gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba突变胰腺腺癌患者的血浆和血清gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,分别。从那时起,许多组织已经研究了循环DNA的定量和定性方面癌症,虽然利用各种方法的敏感性和特异性显示巨大的变化gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。明显高于非小细胞肺癌患者的血浆DNA水平被发现比控制各种良性肺疾病。这表明存在cfDNA等离子的增加肺癌患者可能是由于细胞凋亡,坏死,肿瘤细胞裂解或肿瘤细胞的过度周转率。此外,发现在人类肿瘤小鼠轴承和接受化疗或手术建议cfDNA可用于监测治疗的效果gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。在人类肿瘤小鼠轴承,明显瞬态的水平上升人类cfDNA(肿瘤特异DNA)化疗或手术后立即发生,其次是快速减少gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。这些观察表明,等离子体的动力学肿瘤特异的DNA可能反映肿瘤负担,gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba快速治疗后细胞死亡可能释放肿瘤细胞DNA进入循环,减少肿瘤退化。这些研究表明cfDNA可能发挥潜在作用的分析监测癌症治疗的功效。gydF4y2Ba
cfDNA水平在目前的研究中,这一趋势分析在三个不同的跨度为晚期非小细胞肺癌患者接受一线以铂为基础的化疗是治疗与响应。可比BV1和BV2 R SD患者被发现。然而,当患者相比,P, R或SD显示显著降低患者BV1-BV3。类似的结果也被报道为血清核小体水平(cfDNA与组蛋白蛋白质)测量各种与非小细胞肺癌患者的化疗周期之前gydF4y2Ba18gydF4y2Ba和小细胞肺癌(SCLC)gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。化疗过程中,减少cfDNA水平观察患者R,而增加患者的SD或p水平有一个缺乏出版工作的效用cfDNA作为肺癌的监控工具接受化疗。在先前的研究中,明显降低患者血清DNA水平观察SD和R;然而,血浆DNA浓度保持不变gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。在相同的研究中,P有显著提高患者血浆DNA的浓度,观察类似于当下。治疗后血浆DNA水平的下降也被观察到gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。等离子体DNA浓度也被观察到在肺癌患者手术后显著下降gydF4y2Ba22gydF4y2Ba。研究直肠癌患者接受放化疗,平均治疗前和治疗结束后血浆DNA水平在急救员和nonresponders可比gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。然而,治疗结束时,反应显示循环DNA水平进一步下降,而在nonresponders,循环DNA明显增加。这些发现表明,监测的水平cfDNA细胞毒性治疗可能有助于在预测过程中对治疗的反应。有必要告诉大家,目前的研究处理只有数量有限的非小细胞肺癌患者,验证这些比较的差异化反应各个群体的需要进行更大的样本量。gydF4y2Ba
目前的结果与cfDNA按照假设,在急救员,任何由于细胞毒性治疗肿瘤质量下降导致的肿瘤标记物水平大幅度降低。相反,有轻微的减少或增加标记水平nonresponders由于治疗不足的反应。应该注意的是,有相当数量的死亡细胞化疗期间,因此将cfDNA释放到循环反应和nonresponders。cfDNA水平的显著差异观察反应者和nonresponders之间不仅可以反映肿瘤负荷的变化由于细胞毒性治疗而且也影响cfDNA的水平的因素,如:1)活动的dnagydF4y2Ba24gydF4y2Ba,2)cfDNA间隙从循环的效率gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba26gydF4y2Ba3)巨噬细胞数量和功能gydF4y2Ba27gydF4y2Ba4)活动,核扩散和流动率的残余肿瘤质量,5)不正常的DNA修复机制、6)肿瘤组织的血液供应,促进cfDNA的过渡进入血液循环。gydF4y2Ba
之间的显著差异在总体生存时间观察病人进入R SD或p .患者相比无变化患者在疾病状态,gydF4y2Ba即。gydF4y2BaSD,他们是那些在肿瘤减少不足分为R或肿瘤生长的增加不足以被认为是p .因此,将有用的发现病人要:1)应对治疗,或2)疾病进展到一个更高级的阶段处于初期阶段。对这两个群体,有必要关注生物标记已经可以开始之前的第一个或第二个疗程。这可以帮助你更好的管理预测以来,这些病人对治疗的反应不足或P处于初期阶段可以用来加强治疗或改变治疗计划。因此,两个不同cfDNA水平的评价各种治疗前循环进行了为了解决临床问题。gydF4y2Ba
预测P(评估1;R + SDgydF4y2Ba与gydF4y2BaP),观察到预处理cfDNA水平能够预测P, SCLC的观察,与先前的研究gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。进一步,BV2预测P与最大的敏感性(71.4%)100%的特异性。这是远高于使用血清的敏感性29%,特异性100%核小体测量8天的第一个化疗周期和CYFRA 21-1(细胞角蛋白19片段)测量周期开始前2gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。是指出,由于特异性是绝对的,没有反应的伤害通过修改治疗方案在早期使用这个信息。SCLC患者,在先前的研究达到了30 - 40%的敏感性为95%使用血清特异性预测P核小体的水平之前,第二个和第三个周期的化疗,分别gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
预测不足应对治疗(评估2;RgydF4y2Ba与gydF4y2BaSD + P),观察到,除了BV1 cfDNA水平在不同化疗周期能够预测治疗反应不足,SCLC的观察也报道之前gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。应该注意的是,预测不足的治疗功效,生物标记不应分类反应nonresponders因为这将导致戒烟成功的治疗。考虑到这个,可以预测不足对治疗的反应的敏感性为26.9,特异性50.0%至100%使用BV1和BV2,分别。一遍,分数比灵敏度通过测量血清核小体在非小细胞肺癌化疗的第二周期前(31.4%,特异性90%)gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,以及SCLC(23.5%,特异性95%)患者gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
等离子体水平之间的相关性cfDNA测量各种治疗周期和生存时间之前也分析,以分析其效用作为非小细胞肺癌患者生存预后标记。BV3和生存之间的相关性观察;gydF4y2Ba即。gydF4y2BacfDNA水平较低的患者存活更长时间。现有的数据预处理cfDNA水平肺癌的预后相关性很少和冲突gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba。一些研究表明相关性血浆DNA浓度升高和穷人生存gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba,而其他人,包括现在的工作,没有gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。可能的解释生存数据的差异可能是病人选择的变化,结合非小细胞肺癌和小细胞肺癌gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba和/或不同的DNA隔离和量化方法。自非小细胞肺癌和小细胞肺癌不同生物学、治疗和预后,只有NSCLC患者纳入本研究。gydF4y2Ba
本研究的局限之一就是等离子体DNA水平量化使用荧光技术PicoGreen方法。DNA定量,定量实时PCR (qPCR)方法被认为是黄金标准,因为它可以检测一个大范围的少量的核酸。同时,qPCR的特点是高精度和高灵敏度。然而,它需要特定的自动化系统和仍然昂贵,从而限制其商业应用。此外,使用各种gene-specific引物或探针序列和可用性的大量实时PCR设备需要qPCR反应条件的优化,这妨碍了从不同的实验室数据的比较gydF4y2Ba32gydF4y2Ba。其他技术,如放射免疫检定法和普通台式紫外分光光度计法不能检测DNA浓度低于纳克水平。PicoGreen方法演示了一个异常高的检测极限,pg·25毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba,完美的线性1000 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba,使测试适合循环DNA分析。此外,一个强大和积极的相关性一直观察PicoGreen化验和qPCR之间gydF4y2Ba33gydF4y2Ba。进一步,一个简单的统一协议和微型板块分析格式使PicoGreen测定快速、有效和廉价的工具,用于高通量cfDNA量化,特别是对于连续评估筛查,诊断或预后的目的。gydF4y2Ba
最近的一项研究表明整个血浆的储存时间的影响和纯化DNA水平的血浆DNA量化肺癌患者和年龄组使用实时pcr分析gydF4y2Ba34gydF4y2Ba。在这研究中,血浆DNA水平下降速度平均每年∼30%的两个样本的等离子体和孤立的DNA被评估为每个病人平均差距两者之间的41个月的评估。作者得出的结论是,必须注意在执行大规模前瞻性研究和回顾性研究存储血浆样品或纯化的DNA。在目前的研究中,从等离子体分离的时间和存储性能的等离子体DNA提取和量化是< 6个月为了避免任何这样的时间变化。此外,血浆样品分析使用一个类似的存储时间和存储温度,以确保相关问题时间退化cfDNA可以避免gydF4y2Ba34gydF4y2Ba。很明显,未来将取决于应用程序的分析结果的重现性和可靠性,两者都需要优化和各种pre-analytical等价和分析因素。gydF4y2Ba
总之,小样本大小是当前研究的局限性;然而,我们认为结果是承诺足以鼓励进一步研究这方面的癌症疗法。目前的研究表明,监测cfDNA水平细胞毒性治疗过程中可以预测早期治疗反应和p .只有有限的信息关于cfDNA NSCLC患者的预测价值。因此更多的外部,需要多中心和大型前瞻性验证研究为了证实当前的相关性发现早期治疗反应和预后的估计。此外,其他更具体的标识和更加精准的血清或plasma-based生物标志物,用于结合cfDNA,将进一步改善目前的成像工具的诊断能力表明早期的治疗效果。这种分析也可能潜在的在中间终端监测肿瘤复发和功效的化学预防和治疗试验。这种分析也可以使用在目前的临床实践,在努力治疗病人根据自己的表皮生长因子受体突变状态gydF4y2Ba35gydF4y2Ba或在二线治疗晚期非小细胞肺癌的药物doxetaxel,培美曲塞或埃罗替尼gydF4y2Ba36gydF4y2Ba。这将是有趣的,看看cfDNA执行在这个新的治疗设置。gydF4y2Ba
脚注gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
这项研究是由印度医学研究理事会(印度新德里)。美国Kumar在收到科学与工业研究理事会(印度新德里)高级研究奖学金。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2009年11月25日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2010年2月5日。gydF4y2Ba
- ©2010人队gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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- ↵gydF4y2Ba
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