摘要gydF4y2Ba
在伴有多血管炎的肉芽肿病(Wegener’s) (GPA)中,抗中性粒细胞胞浆抗体的存在表明中性粒细胞是一个关键效应细胞。先前的研究报道了肺中中性粒细胞计数升高,尽管GPA肺中中性粒细胞趋化的决定因素尚不清楚。gydF4y2Ba
测定了27例GPA患者、20例特发性肺纤维化(IPF)疾病对照组和6例健康对照组的支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、髓过氧化物酶(MPO)和趋化因子。ELISA检测CXC趋化因子配体(CXCL)8、白细胞介素(IL)-1β、上皮中性粒细胞活化蛋白78、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子。采用下琼脂糖法检测BALF的中性粒细胞趋化潜能,使用特异性抗体检测CXCL8和IL-1β的作用。gydF4y2Ba
与健康对照组相比,GPA BALF中性粒细胞百分比增加,MPO、CXCL8和G-CSF浓度升高。与正常对照组相比,活跃(p=0.006)和缓解(p=0.077) GPA和IPF患者的中性粒细胞对BALF的趋化性增加。BALF诱导的趋化作用与GPA中BALF IL-1β (r=0.761, p=0.001)和CXCL8 (r=0.640, p=0.012)相关,并被抗CXCL8抑制(85%;p<0.001)和抗il -1β (69%;p < 0.001)。gydF4y2Ba
我们的研究证实中性粒细胞和促炎的肺泡环境在临床缓解中持续存在。CXCL8和IL-1β似乎在中性粒细胞对BALF的趋化反应中发挥重要作用。gydF4y2Ba
多血管炎(Wegener’s)肉芽肿病(GPA)是一种小血管、系统性血管炎,其免疫学特征是抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCAs),主要针对中性粒细胞丝氨酸蛋白酶(PR)-3,但也有髓过氧化物酶(MPO) [gydF4y2Ba1gydF4y2Ba].ANCAs的存在表明中性粒细胞是GPA发病的关键效应细胞。gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba, ANCAs激活已启动的中性粒细胞,导致增强的呼吸爆发和细胞因子释放[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba].anca相关血管炎的动物模型表明中性粒细胞在疾病的诱导中起直接作用[gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba)和一个gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba研究发现肾小球内活化的中性粒细胞与肾损伤的严重程度相关[gydF4y2Ba4gydF4y2Ba].gydF4y2Ba
GPA常累及肺部[gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba],其中一个系列显示,高达90%的患者在疾病病程的某个阶段会受到下呼吸道的影响[gydF4y2Ba7gydF4y2Ba].既往有报道称,活动性疾病期间GPA患者的支气管肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞水平升高[gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba].未检测的中性粒细胞炎症可导致组织损伤,见于其他慢性肺疾病,如支气管扩张[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba].实施以环磷酰胺为基础的治疗方案后提高生存率[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba使嗜中性粒细胞炎症对GPA肺的长期影响更为相关。GPA中与中性粒细胞向肺募集相关的机制和介质尚不清楚。gydF4y2Ba
细胞因子在中性粒细胞向炎症部位迁移中发挥重要的调节作用[gydF4y2Ba12gydF4y2Ba].通过促进肺泡腔内的趋化性,细胞因子浓度上调与急性肺损伤和肺纤维化相关的中性粒细胞增多有关[gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba].先前的小型研究表明中性粒细胞趋化因子水平升高[gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba],以及GPA活跃患者肾小球中CXC趋化因子配体(CXCL)8升高[gydF4y2Ba17gydF4y2Ba].肺内中性粒细胞趋化因子水平尚未确定,尽管有病例报告称CXCL8、白细胞介素(IL)-1β和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)升高[gydF4y2Ba18gydF4y2Ba].gydF4y2Ba
本研究的目的是确定急性和复发GPA期间中性粒细胞炎症的动态,它与BALF中性粒细胞趋化因子的关系,以及GPA BALF中功能重要的趋化因子。与特发性肺纤维化(IPF)和正常对照组进行比较。由于与IPF相关的肺中性粒细胞增多,我们招募了IPF患者作为疾病对照组。采用下琼脂糖法检测BALF的趋化潜能,并检测抗CXCL8和IL-1β的特异性抗体。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
招聘gydF4y2Ba
在2003年至2006年间,从伯明翰大学医院(伯明翰,英国)招募了26名GPA患者。如果根据当地指南认为支气管镜检查是安全的,则在入院时按顺序招募活动患者。缓解患者从血管炎诊所按常规门诊预约顺序登记。所有患者均符合美国风湿病学会标准和Chapel Hill共识声明GPA定义[gydF4y2Ba19gydF4y2Ba].使用伯明翰血管炎活动评分(BVAS)评估患者纳入时的疾病活动性,BVAS是一个有效的指标,包括一个加权项目列表,评估可归于活动性血管炎的活动[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba].缓解被定义为BVAS小于1分,活动患者的BVAS大于4分。在ANCA阴性且提示疾病复发的病例中,组织活检证实所有病例均存在活动性血管炎。血管炎损伤指数评估特定器官系统不可逆损伤的严重程度。gydF4y2Ba
IPF患者从一个间质性肺疾病诊所依次招募,并根据美国胸科学会/欧洲呼吸学会指南进行诊断。188bet官网地址从医院志愿者中招募无呼吸系统疾病的健康对照组。当地研究伦理委员会批准了这项研究,并获得了知情的书面同意(参考2003/166)。gydF4y2Ba
放射学gydF4y2Ba
所有GPA和IPF患者均行胸部高分辨率ct (HRCT)检查。扫描由对间质性肺疾病感兴趣的肺科医生(dr . r . Thickett)和放射科医生(P. Gair, University Hospital Birmingham)盲读,评估是否存在支气管扩张、纤维化、空洞、结节和肺气肿。在GPA肺部检查结果综述中提到的特征[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba].gydF4y2Ba
肺功能测试gydF4y2Ba
使用Jaeger Compact系统(Viasys Healthcare;Carefusion英国贝辛斯托克)。用单呼吸法测量肺对一氧化碳的转移能力。数据以预测%表示。gydF4y2Ba
支气管肺泡灌洗gydF4y2Ba
所有患者均按照国家指南进行支气管肺泡灌洗[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba].按照标准方法进行支气管镜检查。将0.9%无菌生理盐水180 mL(3支60 mL注射器)注入右侧肺叶中叶支气管,手动抽吸。BALF经粗纱布过滤,清除黏液碎片,500×离心gydF4y2BaggydF4y2Ba4°C保存6分钟。取下上清液,在-80°C下冷冻,用于后续分析。细胞颗粒在RPMI 1640培养基中重悬(Sigma-Aldrich, Poole, UK)。使用血球计进行细胞计数,并在细胞旋片染色(diffi - quick)后分析细胞差异。gydF4y2Ba
测量gydF4y2Ba
BALF IL-1β, CXCL8,上皮中性粒细胞激活蛋白(ENA)-78, G-CSF和粒细胞-巨噬细胞集群刺激因子(GM-CSF)水平根据制造商说明书使用ELISA (R&D Systems, Abingdon, UK)检测。这些试验的平均方差系数为8%(范围为6.6-9.6%)。MPO活性用比色底物测定法测定[gydF4y2Ba21gydF4y2Ba].gydF4y2Ba
Under-agarose趋化作用gydF4y2Ba
使用不连续Percoll®梯度从外周血中纯化正常中性粒细胞[gydF4y2Ba22gydF4y2Ba) (Sigma-Aldrich)。>98%的细胞纯度和活力被证实使用细胞旋。如前所述,使用琼脂糖下法测定BALF对对照中性粒细胞的趋化活性[gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba24gydF4y2Ba].所有中性粒细胞实验均采用同一供体对照。简而言之,琼脂糖板上有印迹孔,同心充满趋化配体,即中性粒细胞悬液(5×10gydF4y2Ba7gydF4y2Ba细胞·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)和适当的控制。平板孵育2 h,允许迁移,戊二醛固定,天青B染色。中性粒细胞向化学引诱剂和对照组迁移的最远点由两个个体测量,以毫米为单位,辅助分级的方格,对诊断或化学引诱剂不知情。趋化性是中性粒细胞向外趋化环迁移的极限,趋化性是中性粒细胞的激活和随后向内控环随机迁移的极限。净趋化性描述了两者之间的区别。在最初的BALF实验中,测量值是单独显示的,除此之外,数据是以净趋化性(单位为毫米)显示的。gydF4y2Ba
在所有趋化性实验中,阳性(10gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba添加M甲酰- met - leu - phe (fMLP))和阴性(0.9%生理盐水)化学引诱剂对照,重复>10%试验间变异率的试验。实验在每个测试条件下进行3个重复。gydF4y2Ba
在细胞因子阻断实验中,BALF与抗il8抗体共孵育20 min (1×10gydF4y2Ba−7gydF4y2BaM),抗il1 β抗体(2×10gydF4y2Ba−7gydF4y2BaM) (both R&D Systems)和CXC趋化因子受体(CXCR)2拮抗剂(SB225002;1×10gydF4y2Ba−8gydF4y2BaM).初步实验确定了最佳抑制剂浓度(数据未显示)。抗体对趋化性的影响被检测,以表明它们的作用不是由于非特异性结合(数据未显示)。gydF4y2Ba
分析gydF4y2Ba
趋化性数据以平均值±表示gydF4y2BasegydF4y2Ba使用Tukey’s的方差分析进行疾病队列比较gydF4y2Ba事后gydF4y2Ba分析。所有其他数据都是非参数的,并以中位数(四分位范围(IQR))表示。IQR描述了低四分位数和高四分位数之间的差异。采用Kruskal-Wallis检验和Dunn检验进行组间比较,探讨疾病组间细胞计数和细胞因子的差异。趋化性与细胞因子的相关性采用Spearman秩检验。所有的统计分析使用SPSS版本15 (IBM,朴茨茅斯,英国)。p值≤0.05被认为有统计学意义。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
人口统计资料gydF4y2Ba
19例GPA患者BVAS大于4则被归类为活性。1例患者的BVAS为3,活检显示复发,并被纳入活性组。7名GPA患者被招募,并被认为在临床缓解。纳入20例IPF患者和6例正常对照组。肺功能检查和胸部HRCT证实,吸烟史和慢性肺损伤不能预测中性粒细胞计数(数据未显示)。血清学和HRCT结果所占的百分比显示在gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
中性粒细胞炎症和活化在GPA患者中持续存在gydF4y2Ba
活性组中位(IQR) BALF中性粒细胞计数较高(5.0 (27.0)%;P =0.007)和缓解(8.0 (60.9%)%;p=0.072) GPA患者与正常对照组相比(1.8(2.3)%)。IPF BALF中性粒细胞计数高于正常对照组(15.3 (26.8)%;p<0.001),但与积极(p=0.210)或缓解(p=0.855) GPA组(gydF4y2Ba图1一个gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
![图1 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/38/5/1081/F1.medium.gif)
a)支气管肺泡灌洗液中性粒细胞计数表示为总细胞的百分比;b)用比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性。数据以中位数(四分位数范围)表示。GPA:肉芽肿伴多血管炎(韦格纳氏);IPF:特发性肺纤维化。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba: p = 0.624;gydF4y2Ba¶gydF4y2Ba: p = 0.072;gydF4y2Ba+gydF4y2Ba: p = 0.007;gydF4y2Ba§gydF4y2Ba: p = 0.428;gydF4y2BaƒgydF4y2Ba: p = 0.022;* * *: p < 0.001。gydF4y2Ba
在积极和缓解GPA组中,中位(IQR)总细胞计数显著增加(108.0×10gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(159.0×10gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)和74.2×10gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(170.4×10gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)细胞·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)与正常对照组(3.8×10gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(49.9×10gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)细胞·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba;P =0.004, P =0.019)。IPF组的总细胞计数较高(123.0×10gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(237.0×10gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)细胞·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)比正常对照组(p=0.001),但两个GPA活动组之间没有差异。gydF4y2Ba
活性组中位(IQR) MPO活性增加(0.064 (0.403)U·mL)gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba;p<0.001)和缓解(0.122 (0.500)U·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba;p=0.022) GPA组与正常对照组比较(0.001 (0.003)U·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba) (gydF4y2Ba图1 bgydF4y2Ba).IPF BALF MPO活性(0.096 (0.244)U·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)较正常对照组升高(p<0.001),但与两个GPA活动组(gydF4y2Ba图1 bgydF4y2Ba).BALF中性粒细胞和MPO活性在活跃GPA组(r=0.484, p=0.005)和IPF组(r=0.563, p=0.002)相关,但在缓解GPA组(r=0.069, p=0.832)不相关。gydF4y2Ba
在GPA中,中性粒细胞计数、MPO和肺功能之间没有相关性,但BALF中性粒细胞计数与血清c反应蛋白相关(r=0.460, p=0.016)。gydF4y2Ba
BALF和血浆细胞因子水平gydF4y2Ba
与正常对照组相比,积极和缓解GPA患者和IPF患者的BALF CXCL8和ENA-78浓度均增加(gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba).各组间IL-1β、G-CSF和GM-CSF浓度无差异。gydF4y2Ba
与正常对照组相比,积极GPA组血浆ENA-78浓度升高,IL-1β、G-CSF和GM-CSF降低。与对照组相比,缓解组IL-1β浓度较低。与BALF相比,积极或缓解GPA患者的血浆CXCL8浓度与对照组无差异(gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba).IPF患者血浆CXCL8和ENA-78浓度高于对照组,但IL-1β、G-CSF和GM-CSF浓度较低。gydF4y2Ba
BALF对中性粒细胞趋化和趋化的影响gydF4y2Ba
中性粒细胞向BALF趋化的中位数(IQR)从活性(6.16 (3.67)mm;P =0.04)和缓解(8.43 (2.34)mm;p=0.003) GPA组和IPF患者(8.71 (3.71)mm;p=0.002)较正常BALF (6.5 (1.21) mm)增加。GPA组和IPF组之间的趋化性没有差异(p=0.451)。活动(6.8(1.53)分钟;P =0.041)和缓解(7.37 (2.23)mm;p=0.007) GPA, IPF BALF (7.62 (3.71) mm;p=0.04)与正常对照组BALF (5.62 (1.33) mm)相比,也表现出中性粒细胞趋化性增加。GPA (r=0.941, p<0.001)和IPF (r=0.968, p<0.001)的趋化性和趋化性密切相关。gydF4y2Ba
活性GPA BALF (1.33 (1.17) mm)和IPF BALF (1.50 (1.09) mm)的中位(IQR)净趋化性较正常对照组(0.33 (0.67)mm)升高(gydF4y2Ba图2gydF4y2Ba).GPA缓解BALF净趋化性(0.67 (1.25)mm)低于活性组,高于正常对照组,但两组间差异无统计学意义。GPA BALF的净趋化电位与测量的BALF中性粒细胞计数(r=0.567, p=0.004)和MPO活性(r=0.672, p=0.012)相关。IPF患者的BALF无此关系。无论是活性组还是缓解组,BALF的趋化潜能都与BALF的显著细菌培养无关(数据未显示)。gydF4y2Ba
中性粒细胞对支气管肺泡灌洗液(BALF)的趋化反应。琼脂糖下法用于测量正常中性粒细胞向BALF或生理盐水对照组迁移的距离。净趋化性描述了向趋化剂迁移和向控制迁移之间的差异。数据采用Tukey’s方差分析进行检验gydF4y2Ba事后gydF4y2Ba分析。对所有BALF样品进行趋化性测定。数据以平均值±表示gydF4y2Base。gydF4y2BafMLP: formyl-Met-Leu-Phe;GPA:肉芽肿伴多血管炎(韦格纳氏);IPF:特发性肺纤维化。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba: p = 0.546;gydF4y2Ba¶gydF4y2Ba: p = 0.161;gydF4y2Ba+gydF4y2Ba: p = 0.006;gydF4y2Ba§gydF4y2Ba: p = 0.077;gydF4y2BaƒgydF4y2Ba: p = 0.001。gydF4y2Ba
IL-1β和CXCL8在GPA balf诱导趋化中的作用研究gydF4y2Ba
BALF诱导的趋化程度与BALF CXCL8 (r=0.640, p=0.001)和IL-1β (r=0.761, p=0.001)相关,但与GM-CSF (r=0.171, p=0.413)、G-CSF (r=0.291, p=0.157)或ENA-78 (r=0.148, p=0.322)水平无关。基于这些结果,我们使用特异性抗体来探索CXCL8、IL-1β和CXCR2拮抗剂(SB225002)对GPA balf诱导的趋化作用的影响。gydF4y2Ba
对主动GPA BALF的趋化反应(n=9)(平均±gydF4y2BasegydF4y2Ba抗cxcl8抑制4.24±0.39 mm(1.5±0.24 mm;p=0.001),抗il -1β(1.26±0.22 mm;p<0.001)和CXCR2拮抗剂(0.98±0.25 mm;p = 0.001)。抗il -1β和抗cxcl8联合作用进一步抑制了对BALF的反应(0.39±0.15 mm;p = 0.001) (gydF4y2Ba图3gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
抗白细胞介素(IL)-1β和抗cxc趋化因子配体(CXCL)8对支气管肺泡灌洗液(BALF)诱导的趋化作用的影响抗il -1β抑制活性肉芽肿伴多血管炎(Wegener’s) (GPA) BALF的趋化作用(2×10gydF4y2Ba−7gydF4y2Baanti-CXCL8(10米)gydF4y2Ba−6gydF4y2BaM)和CXC趋化因子受体(CXCR)2拮抗剂(SB225002;1×10gydF4y2Ba−8gydF4y2BaM)(各实验p<0.001)。抗il -1β和抗cxcl8联合使用进一步抑制趋化反应。所有实验均在9个主动GPA BALF样本上进行,并在3个重复中重复。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba: p = 0.001;gydF4y2Ba¶gydF4y2Ba: p = 0.002。gydF4y2Ba
IL-1β和CXCL8对中性粒细胞趋化的影响gydF4y2Ba
IL-1β导致正常中性粒细胞趋化性呈剂量依赖性增加(20、200和2000 pg·mL)gydF4y2Ba−1gydF4y2BaIL-1β的趋化性分别为2.3、4.0和11.0 mm),抗IL-1β可使其趋化性降低至90% (2.5×10gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba米)(p < 0.001)。CXCL8引起了趋化性的剂量依赖性增加(10gydF4y2Ba−9gydF4y2Ba, 10gydF4y2Ba−8gydF4y2Ba, 10gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba和10gydF4y2Ba−6gydF4y2BaM的趋化性分别为0.7、3.7、5.7和9.3 mm),可被抗cxcl8抑制(2×10gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba米)(p < 0.001)。当IL-1β (200 pg·mL)时,有协同趋化反应gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)和CXCL8 (10gydF4y2Ba−7gydF4y2BaM)共培养(IL-1β 4.0 mm, CXCL8 5.7 mm, IL-1β + CXCL8 12.0 mm;方差分析p = 0.013)。抗体不影响fmlp刺激的趋化性(gydF4y2Ba图4gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
白细胞介素(IL)-1β和CXC趋化因子配体(CXCL)8及其特异性抗体对中性粒细胞趋化的影响。对IL-1β (200 pg·mL)有趋化反应gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)和CXCL8 (10gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba当IL-1β和CXCL8共孵育时,其趋化活性增强。IL-1β和CXCL8的作用被特异性抗体降低,而不影响甲酰- met - leu - phe (fMLP)刺激的趋化性。数据以平均值±表示gydF4y2BasegydF4y2Ba.* * *: p < 0.001。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
这项大型支气管镜研究证实了之前报告活跃GPA疾病期间BALF中性粒细胞增多的研究结果[gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]和一个小系列显示中性粒细胞在缓解期增加[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba].MPO水平升高表明中性粒细胞被激活。与正常对照组相比,积极和缓解期GPA患者的BALF浓度均升高CXCL8和ENA-78,但IL-1β、G-CSF和GM-CSF不升高。与正常对照组相比,GPA患者的BALF被发现刺激中性粒细胞趋化性,这被抗CXCL8和IL-1β抗体以及CXCR2拮抗剂所抑制。gydF4y2Ba
中性粒细胞的存在与GPA有特别的相关性,因为该疾病与ANCAs有很强的相关性[gydF4y2Ba25gydF4y2Ba].GPA中导致BALF中性粒细胞增多的分子机制尚不清楚。血管炎患者的白细胞扫描显示,GPA患者肺部中性粒细胞边缘增高[gydF4y2Ba26gydF4y2Ba].招募中性粒细胞到组织是一个多步骤的过程,部分由细胞因子指导。BALF中性粒细胞计数与CXCL8和IL-1β相关,这可能表明细胞因子在GPA中性粒细胞招募中的作用。这一发现得到了BALF实验的支持,该实验发现BALF诱导的趋化性被特异性抗体CXCL8和IL-1β所抑制。与这些抗体孵育产生的抑制程度表明,CXCL8和IL-1β是balf诱导趋化的主要细胞因子决定因素。gydF4y2Ba
与正常对照组相比,GPA和IPF患者血浆CXCL8水平升高,尽管其水平比BALF低10倍,提示局部肺生成。CXCL8已知具有强大的趋化活性,并在IPF患者肺部中性粒细胞积聚中发挥重要作用[gydF4y2Ba27gydF4y2Ba]及成人呼吸窘迫综合症[gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,持续中性粒细胞增多与死亡率有关。CXCL8能够增加中性粒细胞黏附性并上调细胞间黏附分子-1表达,可能促进边缘化[gydF4y2Ba16gydF4y2Ba].除了中性粒细胞募集,CXCL8还有其他与GPA相关的机制,ANCAs直接刺激单核细胞和中性粒细胞释放CXCL8 [gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba29gydF4y2Ba].CXCL8和其他细胞因子,包括肿瘤坏死因子-α,进一步刺激PR3转位到细胞表面,增加ANCA结合的可能性[gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba31gydF4y2Ba].CXCL8通过CXCR1和CXCR2受体发挥作用[gydF4y2Ba32gydF4y2Ba,gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,我们的实验表明CXCR2受体在balf诱导的趋化作用中发挥作用。gydF4y2Ba
虽然CXCL8作为一种中性粒细胞趋化剂的作用已经确定,但IL-β的作用仍存在争议,尽管它已经确定了对中性粒细胞粘附的作用[gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba34gydF4y2Ba],诱导大量细胞产生已知的中性粒细胞趋化剂,包括CXCL8 [gydF4y2Ba35gydF4y2Ba].ENA-78是一种有效的中性粒细胞趋化剂,已发现在炎症条件下上调,如类风湿关节炎[gydF4y2Ba36gydF4y2Ba,但尽管我们发现GPA BALF水平升高,但与BALF中性粒细胞增多无显著关系。造血因子调节骨髓中中性粒细胞的产生和成熟。这项研究显示G-CSF水平增加,G-CSF是一种趋化因子,对中性粒细胞的增殖和激活具有作用[gydF4y2Ba37gydF4y2Ba, GPA BALF。GM-CSF能够刺激骨髓前体增殖并分化为中性粒细胞细胞系[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba].GM-CSF,而不是G-CSF,能够上调中性粒细胞上PR3的表达,因此,与GPA病理有特定的相关性[gydF4y2Ba38gydF4y2Ba];然而,在我们的GPA队列中,浓度没有显著升高。IPF患者BALF中中性粒细胞趋化因子也升高,但仅在GPA患者中CXCL8和IL-1β与BALF中性粒细胞计数有关。gydF4y2Ba
慢性阻塞性气道疾病和支气管扩张最容易理解持续性中性粒细胞炎症和非对抗蛋白酶作用的后果[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba],其特征已在IPF和GPA队列中报告[gydF4y2Ba7gydF4y2Ba].先前曾有报道称活性GPA中MPO活性升高[gydF4y2Ba39gydF4y2Ba];这项研究证实了这些发现,并进一步表明,MPO活性在临床缓解期间保持升高。这是否反映了继发于疾病活动或慢性肺损伤和感染的持续中性粒细胞活化尚不清楚。我们以前报道过病原体通常从GPA和IPF BALF中生长[gydF4y2Ba40gydF4y2Ba];然而,细菌生长与较高的中性粒细胞计数或BALF趋化潜能无关。gydF4y2Ba
这项研究有许多局限性。首先,琼脂糖下法不能充分反映人肺的复杂性。然而,中性粒细胞趋化程度与BALF中中性粒细胞计数百分比和MPO水平相关,支持我们的假设,该模型在一定程度上反映了gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba动力学。此外,在不同时间点进行的琼脂糖下实验之间有显著的变异性,如图所示。由于这个原因,每组实验都在同一天进行,每个样本和对照以三次重复进行。其次,不能必然推断未经稀释的上皮内衬液(ELF)会产生与BALF相似的结果。重复这些实验,使用不同的方法来评估直接取样的ELF的趋化性,并评估其他细胞因子和细胞因子受体,将使这项研究得以推进。此外,检查组织样本可以确定这些趋化因子是否也在间质中升高。最后,急性患者的中位BVAS低于其他研究的预期[gydF4y2Ba7gydF4y2Ba].我们的解释是,一些患者有呼吸受限的GPA, BVAS(侧重于肾脏疾病)对单器官肺疾病的评分不高。gydF4y2Ba
总之,本研究提供了进一步的证据,中性粒细胞炎症是疾病活动期间和缓解期间GPA肺的关键表现。我们证明了肺泡细胞因子浓度的升高,并有证据表明CXCL8和IL-1β可能为中性粒细胞趋化提供持续的刺激。细胞因子在中性粒细胞趋化反应中的作用机制值得进一步研究,因为导致中性粒细胞激活和招募的靶向途径可能提供替代治疗选择。gydF4y2Ba
脚注gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2010年10月14日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2011年3月4日。gydF4y2Ba
- ©2011人队gydF4y2Ba
参考文献gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba
- ↵gydF4y2Ba