文摘
本研究的目的是评估的安全性和对临床结果的影响和生物标志物炎症和组织损伤的中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂AZD9668(60毫克每日两次口服4周)在囊性纤维化。
这是一个随机、双盲、安慰剂对照研究。主要结果措施痰中性粒细胞计数,肺功能,24小时痰重量,BronkoTest®日记卡数据和与健康有关的生活质量(修订后的囊性纤维化生活质量调查问卷)。二级终端包括痰中性粒细胞弹性蛋白酶活性,炎症生物标记物在唾液和血液,尿液和血浆锁链素(一种弹性蛋白降解标记),AZD9668水平和安全参数(不良事件、常规血液学、生化、心电图和痰细菌学)。
56例患者随机,其中27收到AZD9668。没有影响对AZD9668痰中性粒细胞计数、中性粒细胞弹性蛋白酶活动,肺功能或临床结果,包括生活质量。AZD9668组中,有一个趋势减少痰炎症生物标记与白细胞介素- 6显著变化,咆哮和尿锁链素。组间不良事件的模式是类似的。
一致减少痰炎症生物标记被AZD9668组和减少尿锁链素表明AZD9668影响弹性蛋白由中性粒细胞弹性蛋白酶乳沟。
支气管扩张、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和囊性纤维化(CF)是炎症,injury-driven呼吸道条件与重大的未满足的需求。
CF气道阻塞的结果由脱水和增厚的分泌物和慢性支气管感染(1,2]。慢性感染与夸张的炎症反应有关,与高水平的促炎细胞因子白介素8 (IL)的航空公司和中性粒细胞浸润肺(3,4]。中性粒细胞在航空公司的存在,以及由此产生的高浓度的中性白细胞蛋白酶,表明他们是贡献者的发病机理与CF(相关的蛋白水解破坏肺1,3,4]。
中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)是一个关键的蛋白水解酶参与neutrophil-driven炎症性肺部疾病的发病和进展。这是促炎(5,6),刺激粘液生产过剩(7- - - - - -9),损害黏膜纤毛的间隙保持中性粒细胞炎症(1,3),直接导致肺组织损伤(10,11]。NE抑制剂的使用,如α1抗胰蛋白酶(α1——)CF患者4,12),因此一个合乎逻辑的方法来治疗这些条件和提供了潜在的解决当前未满足的医疗需求。
人类不AZD9668是口服抑制剂。临床前研究表明,它可逆地抑制了不活动,是高度有效的和有选择性的生化和细胞检测和显示效果在活的有机体内肺部炎症和退化的模型(13]。有利的药动学特征,允许口服,毒性的降低风险与目标酶由于其可逆的相互作用表明,AZD9668代表一个重大进步与以前的NE抑制剂(13]。因此,AZD9668开发作为一个可能的治疗代理有症状的治疗和疾病的修改在慢性阻塞性肺病,但也可能受益的CF和其他呼吸道疾病的特点是中性粒细胞炎症。
CF是孤儿疾病,有效和适当的评估可用的有限数量的新疗法的患者是很重要的。常用的措施包括临床疗效结果措施(生存、肺急性加重和住院治疗上),代理端点(用力呼气量在1 s (FEV1)在给定的时间点,或者FEV的速度下降1)和生物标志物2]。鉴于蛋白水解肺CF的破坏是一个关键的特性,也有需要相关的,可再生的受伤的标记/组织退化,使评估的新型治疗方法的有效性。
这signal-searching研究的目的是使一个初步评估AZD9668的疗效和安全性与在CF患者安慰剂,检查其影响炎症和组织损伤的生物标志物。
方法
研究设计
这是一个随机、双盲、安慰剂对照,与这些相应平行的组织、活动花絮期研究(NCT00757848)。的试车期4周后,患者被随机治疗28天AZD9668或匹配的安慰剂。
病人
男性和女性(绝经后或手术无菌)患者≥16岁,FEV CF的临床诊断1≥40%的预测值,实验值和肾功能正常(肾小球滤过率> 70毫升·分钟−1)都有资格。
排除标准包括任何可能干扰的non-CF-related肺病研究评估。
治疗
病人被随机(1:1)通过电脑生成的随机方案,AZD9668 60毫克b.i.d。或匹配的安慰剂。使用的剂量选择接近最大前健康志愿者研究AZD9668 [14]。标准CF疗法是持续的;口服糖皮质激素和抗生素non-prophylactic不允许在研究8和4周,分别在随机。
评估
主要终端:痰绝对中性粒细胞百分比计数;24小时痰重量;肺功能;BronkoTest®日记卡数据;和生活质量(QoL)的修订CF生命质量问卷(CFQ-R) [15]。
二级终端:痰不活动;痰炎症生物标记物;血液炎症生物标记物;尿锁链素;安全;和AZD9668浓度在等离子体和诱导痰。等离子体锁链素是一个探索的结果。
痰生物标志物,意味着两个诱导痰液样本获得的基线(访问1和2)与两个样本的均值在治疗的最后一周(访问3和4)(图1)。两个测量的平均值被用来减少生物标志物的估计的方差。
![图1 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/40/4/969/F1.medium.gif)
研究设计的流程图。
统计分析
嗜中性粒细胞计数和生物标志物数据ANCOVA是用来确定AZD9668的比率:安慰剂。基线数据(对数尺度)和国家不包括。对于其他功效的结果,ANCOVA被用来分析差异变化从基线到28天AZD9668和安慰剂之间,在治疗和国家固定因素和基线值的协变量。
这是一个探索性研究,样本大小不是基于获取电力检测特定的影响。假设1记录数据的标准偏差,这样减少了50%在痰中性粒细胞数量不会错过(80%)、样本大小40例每治疗组(20)被认为是足够的和双面的p值< 0.1显著。没有调整的多重性测试。
道德方面
研究协议和修改是一个独立的伦理委员会批准,符合赫尔辛基宣言和协调国际会议/良好的临床实践。所有的病人提供他们的知情同意。
方法论的进一步细节排除标准,禁止治疗,痰液取样、生物标志物分析和评估时间可以在网上找到补充材料。
结果
病人
第一个病人是参加10月30日,2008年,最后一个病人完成了研究8月4日,2009年。共有70名患者参与研究和56个随机治疗;29日收到安慰剂和27收到AZD9668 60毫克b.i.d。这些病人随机治疗,27(93%)安慰剂患者和24例(89%)AZD9668患者完成了研究。性格的病人所示图2。
![图2 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/40/4/969/F2.medium.gif)
患者的性格。#:包括一个病人登记两次;¶:一个病人没有剂量(安全分析组,n = 26),另一个病人没有post-dose疗效数据(功效分析组,n = 25);+:未能满足包含/排除标准;§:病人丙氨酸转氨酶升高。
所有患者在安慰剂组收到至少一个剂量的研究治疗和post-dose功效数据(安全性和有效性分析集,n = 29)。AZD9668组的一个病人没有收到任何研究药物后随机和被排除在安全性和有效性分析集。进一步AZD9668组的病人没有post-dose疗效数据和被排除在功效分析集。因此,AZD9668集团安全分析集26患者,疗效分析组25。
总的来说,这两个治疗组势均力敌的多数人口和病人特征(表1)。只有一个女在这项研究。FEV1较低,在筛选和随机接受AZD9668。
主要的结果变量
绝对和中性粒细胞百分比数
在治疗结束时,几何平均绝对中性粒细胞计数在安慰剂组低(11.13×106·g−1)比AZD9668组(14.10×106·g−1);然而,比组间没有统计学上显著不同:0.97 (90% CI 0.69 - -1.38;p = 0.891) (表2)。同样,之间没有统计上的显著差异AZD9668和安慰剂治疗嗜中性粒细胞百分比计数结束时;最小二乘均值差异1.25% (90% CI -2.53 - -5.04;p = 0.581) (表3)。个体患者数据变化的基线在中性粒细胞计数显示在网上补充图E1。
痰液重量和肺功能
24小时分析痰体重,FEV1缓慢的肺活量,用力肺活量(FVC)、用力呼气流量的25 - 75% FVC和FEV1% pred组间无显著差异(在线补充表E1和无花果。E2)和肺功能没有差异变量测量(BronkoTest每天在家里®日记卡数据)(在线补充表E1)。
CF的症状和体征
治疗组之间没有显著差异,呼吸道症状评分或使用释放药物(在线补充表E1)。在研究过程中,所使用的抗生素/类固醇7例(24%)患者在安慰剂组和10 AZD9668组(40%)。伴随药物使用中总结在线补充材料。没有统计上显著的变化在个人CFQ-R类别除了“情感”(p < 0.05)和“吃”(p < 0.1),恶化记录AZD9668组(在线补充表E1)。
二次结果变量
痰不活动
几何平均基线不活动是在AZD9668高于安慰剂组。不活动结束时,治疗的比率显示增加(51%),安慰剂组和减少AZD9668组(5%)。有一个NE AZD9668组活动减少37%与安慰剂组(比0.63;90%可信区间0.30 - -1.31);然而,这不是统计学意义(p = 0.292) (表4)。个别病人从基线数据变化不活动在线补充图所示E3。
炎症生物标记
总的来说,有一个趋势减少所有的测量痰炎症生物标记除了白三烯B4(LTB4)(即。肿瘤坏死因子(TNF) -α,il - 6,引发,IL-1β,咆哮(监管在激活正常t细胞表达和分泌)和单核细胞化学引诱物蛋白1)AZD9668组和il - 6的变化显著(p < 0.01)和咆哮(p≤0.1) (图3;在线辅助表E2)。组之间没有显著差异的变化血液炎症生物标记(数据未显示)。
![图3 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/40/4/969/F3.medium.gif)
比例(90%置信区间)AZD9668安慰剂炎症生物标记物的诱导痰。肿瘤坏死因子:肿瘤坏死因子;IL:白介素;LTB:白三烯B;咆哮:调节激活后,正常t细胞表达和分泌;MCP:单核细胞化学引诱物蛋白质。¶:p = 0.006;#:p = 0.1与安慰剂。
安全
总的来说,14名(48%)患者治疗诱发的不良事件报告(AEs)在安慰剂组,而12 AZD9668组(46%)(在线补充表E3);总共54和32 AEs是安慰剂,AZD9668组,分别。
两个病人,在安慰剂组,报道严重AEs(肺恶化和肺炎)和安慰剂组中两个病人就停止了治疗由于AE(进行非心脏胸痛和肺炎)。没有死亡或其他重要AEs(在线补充表E3)。
一般来说,AE概要文件(通过首选项)治疗组之间的相似。最常报道的AE是头痛,被更多的病人报告AZD9668组比安慰剂组(在线补充表E3)。
没有临床组间显著差异在痰细菌学、血液学和临床化学参数、生命体征、心电图或物理考试。AZD9668组的一个病人显示肌酐增加磷酸激酶,丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸转氨酶和乳酸脱氢酶,峰值7天、28天的治疗。沉重的锻炼是暂时与最初的增加;然而,足够的信息可用来解释第二个增加至28天,这意味着关系研究药物不能排除。
AZD9668痰和等离子体
AZD9668浓度测量等离子体和痰上层清液样本证实AZD9668水平与支气管扩张患者的一项研究[16]。
讨论
治疗AZD9668 60毫克b.i.d。在28天没有症状,影响肺功能,痰中性粒细胞计数,CF患者痰液重量或痰不活动与安慰剂相比。然而,除了LTB4AZD9668治疗结果在一个一致的模式,减少痰炎症生物标记,这是统计上显著的il - 6和咆哮。AZD9668治疗也显著降低了自由和总尿锁链素,弹性蛋白降解的生物标志物。也有降低血浆锁链素AZD9668组,虽然不同与安慰剂不显著。AZD9668一般耐受性良好。
鉴于CF疾病,痰液的蛋白水解活性有重要的生物学标志物的兴趣表明气道炎症和肺组织损伤程度的CF。结构性损伤的生物标志物可以使早期干预和监测肺组织的能力变化的过程中。锁链素,交联弹性蛋白中氨基酸释放在痰矩阵退化和能被探测到,慢性阻塞性肺病患者的血液和尿液17- - - - - -20.),被认为是肺组织损伤的潜在生物标志物。我们的研究证明了一致减少尿和等离子锁链素在回应AZD9668治疗,是治疗代理的一些研究表明积极影响锁链素的水平,这表明AZD9668可能潜在疾病修饰neutrophil-driven疾病状态。ZD0892相关NE抑制剂也减少灌洗液的锁链素水平在一个烟雾诱发肺气肿豚鼠模型(11]。另一个CF患者痰液的研究测量了锁链素患者住院治疗的肺恶化,发现痰住院的第一个星期期间锁链素水平显著降低(p = 0.04) (21]。锁链素水平与血浆c反应蛋白的减少也呈正相关(p = 0.03),痰引发(p < 0.01)和唾液蛋白(p < 0.01)。在39 CF患者的一项研究中,Downeyet al。(22]显示尿锁链素水平和生存之间的负相关性,分析数据取自患者1年开始后的研究显示的水平明显高于尿锁链素相比,non-survivors幸存者(p < 0.0001)。也有证据表明,锁链素增加尿排泄的吸烟者和慢性阻塞性肺病患者(20.,23,24]。最近的一项研究从瑞典双胞胎注册评估锁链素和肺功能之间的关系25]。本研究发现,尿锁链素显著和FEV反向关联1,FVC和一氧化碳的扩散能力,并与残余体积呈正相关(RV)和RV /肺活量,并且与COPD受试者的相关性明显更强。
目前的研究还表明,AZD9668治疗导致一致的模式,减少痰炎症生物标记。没有治疗效果观察血浆炎症生物标记。血浆炎症标记物的结果都符合评估的评估COPD纵向识别预测替代终点(ECLIPSE)研究中,据报道弱关系在唾液和血液中性粒细胞测量和系统性的生物标志物26]。生物标志物分析NE抑制剂的研究也是具有挑战性的,因为适当的生物标记物抑制NE与临床相关的有意义的抗炎效果目前还不清楚。
缺乏AZD9668对中性粒细胞计数的影响,不活动和肺功能测量在当前的研究中观察到可能由于各种原因。我们的研究是一个短,signal-searching,原理研究,进行少量的病人,和与大型inter-individual变异导致大的置信区间。这项研究持续时间很可能太短,而不是动力调查AZD9668疾病修饰的影响。长之前研究的持续时间通常需要影响肺功能和生命质量等终端可以检测到。
先前的分析支气管扩张患者显示AZD9668在等离子体的存在和痰在预期的上层清液浓度(16],AZD9668测量浓度的血浆和痰在我们的研究中证实了暴露在药物相关水平,预测抑制NE。然而,一种可能性是,更高浓度的AZD9668必须达到足够的水平不钝化的航空公司。其他的可能性是AZD9668可能不会达到其网站的行动或被灭活在其网站的行动。众所周知,失活NE的内源性抑制剂,如α1——,会出现由于氧化剂在肺组织(27,28),尽管目前尚不清楚小分子药物在患者容易受到类似的失活过程。
另一个可能的原因缺乏的影响可能与目标特异性。AZD9668已被证明有选择地目标NE (13];然而,气道炎症和蛋白水解活性是由许多不同的机制和其他几个中性蛋白酶。例如,高水平的组织蛋白酶G和蛋白酶3已确定在支气管肺泡灌洗液的CF患者(29日,30.]。此外,嗜中性粒细胞矩阵metalloproteases胶原酶(MMP-8)和白明胶酶(MMP-9),发布在炎症条件下,中也发现了高浓度的支气管肺泡灌洗液的CF患者(31日,32]。如AZD9668所示在活的有机体内抗炎作用[13),可能会影响NE-independent抗炎途径减少炎症生物标记,以及减少锁链素的水平。
进一步的解释是,不损害细胞外基质在轮回的过程。一般认为,高浓度的NE导致蛋白水解蛋白质损伤矩阵。然而,随着弹性蛋白酶释放从流通到气道嗜中性粒细胞迁移期间,有可能是由于增加了启动的中性粒细胞释放更多的NE或中性粒细胞数量的增加将导致更多的东北。因此可能AZD9668活跃在细胞外基质比气道中NE浓度要大得多。这可能减少占锁链素浓度没有太大变化在气道中性粒细胞数量或不活动。另外,痰矩阵的复杂生物学可能扮演了一个角色inter-patient高可变性的痰化验。这种可变性,连同小样本大小,可以部分解释不活动下降的趋势但缺乏统计学意义。
我们的研究结果表明,AZD9668 CF患者是安全的和良好的耐受性,对痰炎症生物标记的影响一致,虽然对不活动或肺功能的影响。这些数据是类似于其他研究调查NE抑制剂。一个试点研究,调查人类吸入重组α的安全性和有效性1——(NE)的内源性抑制剂治疗CF,发现nebulised重组α1——安全,耐受性良好,但对绝对痰NE水平有限影响,活动,和其他炎症标记物(12]。另一个CF的II期临床试验显示没有α的影响1——在肺功能(FEV1),但也导致α的增加1——水平和减少自由活动,中性粒细胞数,铜绿假单胞菌集落形成单位,引发和TNF-α水平和完整的免疫球蛋白G (4]。
当前研究的结果暗示一个AZD9668效应在炎症性呼吸道疾病如CF neutrophil-driven组件。长期的研究包括更多的病人需要进一步调查的影响AZD9668中性粒细胞数量,不活动和肺功能,确认不抑制作为治疗方法的有效性。此外,这些结果指向锁链素作为一种生物标志物的潜在有用性肺组织的退化。
确认
我们感谢研究者和病人的参与这项研究。主要调查人员:t·普雷斯勒的席位(Rigshospitalet,哥本哈根,丹麦);m . Griese(德国慕尼黑路德维希马克西米利安大学);r·费舍尔(慕尼黑大学医院,德国慕尼黑);他走时。豪雅(Othmarschen公园儿童和青少年医学实践,汉堡,德国);h . Wirtz(莱比锡大学医院、莱比锡、德国);b . Bewig(石勒苏益格-荷尔斯泰因州大学医院,基尔,德国);h . Mazurek(肺结核和肺部疾病研究所,华沙,波兰);大肠Amelina (Roszdrav肺学研究所、俄罗斯); F. Karpati (Karolinska University Hospital, Stockholm, Sweden); L. Mared (Lund University Hospital, Lund, Sweden); A. Hollsing (Uppsala University Hospital, Uppsala, Sweden); A. Lindblad (Gothenburg Children's Hospital, Gothenburg, Sweden); M. Gilljam (Sahlgrenska University Hospital, Gothenburg, Sweden); S. Elborn (Belfast City Hospital, Belfast, UK); M. Walshaw (Liverpool Heart and Chest Hospital, Liverpool, UK).
医学写作提供的援助是诉穆尼奥斯完成医疗通信、马格斯菲特,英国。
脚注
可以从本文的补充材料www.www.qdcxjkg.com
临床试验
这项研究是在注册www.ClinicalTrials.gov标识号NCT00757848。
支持声明
这项研究是由阿斯利康。
感兴趣的语句
感兴趣的语句为所有作者的手稿和研究本身可以发现www.www.qdcxjkg.com/site/misc/statements.xhtml
- 收到了2011年11月8日。
- 接受2012年1月3日。
- ©2012人队