抽象的gydF4y2Ba
尽管它们与黏膜防御相关,但在慢性阻塞性肺疾病(COPD)中,IgA的产生和肺b细胞的功能仍不清楚。gydF4y2Ba
我们评估了COPD(n = 28)肺的IgA合成,对照(n = 21)患者,并与之共同培养B细胞gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba-reconstited的气道上皮。gydF4y2Ba
在COPD肺组织中,IgA1合成增加,导致其在上皮下区积聚。gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba,COPD支气管上皮内上皮印迹正常的人B细胞,用于增加IgA(主要是IgA1)和成熟到CD38中的产生gydF4y2Ba+gydF4y2Ba浆细胞。这些作用与TACI(跨膜激活剂和CAML相互作用者)的上调有关,在静息条件下观察到这些作用,而在香烟提取物刺激下部分受到抑制。白介素(IL)-6和BAFF (b细胞激活因子)/APRIL(增殖诱导配体)分别在COPD上皮和肺组织中上调;通过靶向IL-6和阻断TACI可较低程度地抑制COPD支气管上皮的iga促进作用。gydF4y2Ba
这些数据表明,在COPD中,支气管上皮内上皮印记通过两个上皮/ B细胞轴的作用促进产生成熟到产生IGA的血浆细胞中的信号,即IL-6 / IL-6受体和Baff-Appil/ Taci途径,香烟烟雾部分抵消这种IGA促进效果。gydF4y2Ba
抽象的gydF4y2Ba
COPD上皮诱导产生IGA的血浆细胞的B细胞成熟gydF4y2Ba通过gydF4y2BaIL-6/IL-6R和baff4 /TACI通路gydF4y2Bahttp:///wly/d7br3.gydF4y2Ba
介绍gydF4y2Ba
慢性阻塞性肺病(COPD)代表全球的主要健康负担,随着发病率和死亡率增加。它是一种复杂的肺部障碍,其与呼吸道的异常免疫和结构反应,重复暴露于吸入毒素,通常是香烟烟雾。有人提出,慢性阻塞性肺病可能原本可能由气道上皮的异常编程来引起[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba].gydF4y2Ba
IGA是粘膜表面的主要一线防御机制,包括气道。它由二聚体IgA(DIGA)产生,其能够与聚合物免疫球蛋白受体(PIGR)结合,其将DIGA从基底外侧转化为上皮细胞的顶端杆。我们以前表明,严重COPD患者显示出的支气管PIGR表达减少[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba],且该缺陷与疾病严重程度和中性粒细胞炎症相关[gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba].还表明,IgA的这种受损的运输不仅可以导致粘膜免疫力受损,而且在龈上组织中的免疫复合物的形成[gydF4y2Ba5gydF4y2Ba].gydF4y2Ba
炎症和结构性成分都是易感吸烟者COPD发展的基础;这包括中性粒细胞、巨噬细胞和CD8的积累gydF4y2Ba+gydF4y2Bat细胞(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,以及支气管周围纤维化和上皮改变。最近,COPD中有支气管周围淋巴滤泡的描述[gydF4y2Ba8gydF4y2Ba],具有近端和远端气道的B细胞卵泡,特别是在患有严重疾病和肺气肿的患者中[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba].这些卵泡由B细胞,T细胞,树突细胞和卵泡树突细胞的特定布置组成[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba12gydF4y2Ba].已经提出,树突细胞,在COPD小型气道中增加的数量增加,在该疾病中形成血激基淋巴卵泡的形成是重要作用[gydF4y2Ba13gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba15gydF4y2Ba].b细胞在适应性免疫中也是关键角色,它不仅是产生免疫球蛋白的细胞,也是抗原提呈细胞。此外,b细胞是先天免疫和适应性免疫之间的桥梁,因为它们能够通过t依赖和t不依赖的途径转换和产生免疫球蛋白。尽管有这些证据,但仍不清楚b细胞功能,特别是IgA的产生是否在COPD中发生改变。gydF4y2Ba
IgA的类转换重组被认为主要依赖于cd40,但最近的研究已经确定了主要由上皮细胞释放的细胞因子,这些细胞因子独立于t细胞调节IgA1和IgA2的产生[gydF4y2Ba16gydF4y2Ba].TACI(跨膜活化剂和CAML交流器)与肿瘤坏死因子家族的两个成员相互作用,即BAFF(B细胞活化因子)和4月(一种增殖诱导配体),并在课堂开关中发挥重要作用[gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]. 因此,研究表明,由肠上皮细胞产生的胸腺基质淋巴细胞生成素可诱导树突状细胞释放BAFF[gydF4y2Ba19gydF4y2Ba]. 四月[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba21gydF4y2Ba], TACI的另一配体[gydF4y2Ba22gydF4y2Ba],可以诱导T细胞/ CD40无关的IgA [gydF4y2Ba23gydF4y2Ba,gydF4y2Ba24gydF4y2Ba],支持IgA2子类切换[gydF4y2Ba21gydF4y2Ba].gydF4y2Ba
本研究的目的是通过使用肺组织和肺组织的综合方法来探索gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba-重组原代支气管上皮,COPD患者中IgA合成基础的上皮/B细胞相互作用是否发生改变,假设在调节B细胞产生IgA时上皮可能受损。由于COPD是一种以细菌感染为特征的吸烟相关疾病,我们评估了在静息状态下以及在脂多糖(LPS)或香烟烟雾提取物(CSE)刺激上皮细胞时,支气管上皮对B细胞的调节。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
患者和肺组织样品gydF4y2Ba
49例患者(28例COPD患者和21例对照组)因孤立性肿瘤而接受肺切除术(gydF4y2Ba表格1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
上皮/ b细胞文化gydF4y2Ba
原发性气道上皮细胞(AECs)来自28例有或无COPD患者的近端肺组织标本(表E1)。在极化的气液界面(ALI)条件下培养AECs,重建假层状粘液纤毛上皮[gydF4y2Ba25gydF4y2Ba].CD19gydF4y2Ba+gydF4y2Ba通过免疫磁性分选(MACS; Miltenyi Biotec,Bergisch Gladbach,德国)新鲜纯化B细胞来自健康献血者的外周血单核细胞[gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba]和共同培养(0.5×10gydF4y2Ba6gydF4y2Ba每孔),在基底外侧腔室放置AECs 13天(允许潜在的b细胞成熟并分化为浆细胞)。CSE是用肯塔基2R4F研究参考香烟(肯塔基大学农业参考香烟项目,列克星敦,肯塔基,美国)新鲜制备的。从三支香烟的烟雾通过10毫升PBS(称为100% CSE)与泵驱动器5006 (Heidolph, Schwabach,德国)以50循环每分钟。用LPS(1µg·mL)刺激细胞gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在共同文化的前2天内,CSE(5%)。gydF4y2Ba
埃莉莎gydF4y2Ba
使用山羊抗人(H)IgA多克隆抗体(在我们的实验室制成的ACP17)或小鼠抗HGG单克隆抗体(MAB)(I5885; Sigma,St Louis,Mo,USA)作为捕获抗体来评估免疫球蛋白合成。辣根过氧化物酶缀合的抗体用于检测(山羊抗HIGA A0295(Sigma)和兔抗HGG(6145-05;南生物技术,伯明翰,AL,USA))。对于IgA1和IgA2检测,分别使用小鼠MAb B3506或A9604,然后用绵羊抗小鼠(M)IgG-辣根过氧化物酶缀合物A6782(Sigma)。根据制造商的说明,由ELISA(R&D Systems,Abingdon,英国)确定转化生长因子(TGF)-β1,BAFF和4月水平。gydF4y2Ba
白细胞介素-6生物测定gydF4y2Ba
使用IL-6依赖性杂交瘤克隆(7TD1)测量培养上清液中的白细胞介素(IL)-6活性,如前所述[gydF4y2Ba28gydF4y2Ba].1 u·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2BaIL-6被定义为导致7TD1细胞半最大生长的浓度。gydF4y2Ba
流式细胞仪gydF4y2Ba
使用以下抗人mAb:荧光素异硫氰酸酯 - 缀合的CD19和CD38 mAb,以及同种型匹配的对照IgG(BD Pharmingen,San Jose,CA,USA);和联合粘蛋白(APC)/ CY7缀合的CD27和BAFF受体(BAFF-R)mAb,Phycoerythrin-Cronugated Taci mab和APC / Cy7-缀合的同种型匹配对照IgG(Biolegend,San Diego,CA,USA)。细胞(1-2×10gydF4y2Ba5gydF4y2Ba)用FcR-Blocking (Miltenyi Biotec)饱和15分钟,然后用荧光标记抗体孵育40分钟,用1.25%多聚甲醛固定。流式细胞术采用配备diva软件的FACSCantoII细胞仪(BD Biosciences, San Jose, CA, USA)进行。gydF4y2Ba
阻断实验gydF4y2Ba
CD19gydF4y2Ba+gydF4y2BaB细胞共培养(1×10)gydF4y2Ba6gydF4y2Ba在基底外侧腔室进行13天的COPD患者AECs。TACI-Fc,对照IgG-Fc (R&D Systems),小鼠抗hil -6(来自J. Van Snick实验室)和对照mIgG (eBioscience, Hatfield, UK)分别加入5µg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba单独或在共培养中的B细胞。在不同时间点(2,6,8和13天)收获培养上清液以测量IgA的产生,在培养基替代期间在这些不同时间点中加入中和试剂。gydF4y2Ba
RNA提取和实时荧光定量PCRgydF4y2Ba
通过使用ICYCLER IQ5 PCR Thermoccycler(Bio-Rad,Hercules,CA,USA)的实时定量(Q)PCR来量化TACI,BAFF和4月的表达水平,并将其标准化为gydF4y2BaRPS18gydF4y2Ba(核糖体蛋白S18)管家基因。通过使用ABI-PRISM-7900序列检测系统热循环仪(应用生物系统,CA,USA),通过QPCR测定IgA1和IgA2的表达水平,并将其标准化为gydF4y2BaRPS18gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
免疫组织化学gydF4y2Ba
主要抗体用作IgA1和IgA2 ELISA,其次是二次生物素化抗型(B8520; Sigma)。使用幻灯片扫描仪SCN400 SCN400扫描幻灯片(每位患者的一度不同的载玻片),并用纸巾软件(Leica Microsystems,Wetzlar,德国)量化耻骨染色。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
使用非参数测试分析组之间的差异,曼诺惠妮U-Test或Kruskal-Wallis试验,或者在指示时蠕动或弗里德曼测试。使用Spearman的秩法计算相关系数。p值<0.05被认为是统计学上的显着性。使用棱镜进行统计分析(Windows 5.00版; GraphPad,San Diego,CA,USA)。gydF4y2Ba
道德考虑因素gydF4y2Ba
所有患者均可通过我们当地道德委员会批准的研究议定书提供签署的知情同意,该议定书(参考文献#2007/19MARS / 58,包括血液样本的扩展)。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
患者特征gydF4y2Ba
肺组织从特征良好的COPD患者(n = 28)获得,与空气流量的各种严重程度,与没有这种疾病的吸烟者和非吸烟者(gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba肺功能正常)(n = 21)(gydF4y2Ba表格1gydF4y2Ba)。重构支气管上皮gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba来自28例有或无COPD患者的近端肺组织(每组n=14)(表E1)。gydF4y2Ba
肺组织中IgA1和IgA2的产生gydF4y2Ba
我们想知道IgA的表达是否受COPD受到影响,并进行QPCR从有或没有COPD的患者量化肺组织中的IgA1和IgA2 mRNA。gydF4y2Ba图1gydF4y2Ba一个和gydF4y2BabgydF4y2Ba表明,与对照非吸烟者相比,IGA2的IgA2(P = 0.02对于IgA2 mRNA水平的IgA2(P = 0.02的IgA2 mRNA水平的IgA2和P = 0.06的IgA2 mRNA水平没有显着增加,而没有观察到肺组织的IgA2 mRNA水平的显着增加,而没有观察到显着差异在对照吸烟者和COPD患者之间)。gydF4y2Ba
肺组织中的IgA1和IgA2积累gydF4y2Ba
然后我们评估了肺组织中的IgA蛋白含量(gydF4y2Ba无花果。1gydF4y2BaC-j)。IgA1和IgA2的免疫染色证明了上皮内(主要是顶端)染色,而在COPD患者中,观察到IgA的基础外侧积累(P = 0.02用于IgA1脑上皮染色的对照gydF4y2Ba与gydF4y2Ba慢性阻塞性肺病患者)。gydF4y2Ba
AEC/ b细胞体外共培养模型的建立gydF4y2Ba
在正常血液CD19共培养13天(允许潜在的b细胞成熟和分化为浆细胞)中,研究了COPD患者支气管上皮对b细胞IgA合成的影响gydF4y2Ba+gydF4y2Ba带有ALI-AECs的b细胞(图S1-A和gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
AECS对B细胞产生IgA生产的影响gydF4y2Ba
通过来自COPD患者的AECS共同培养,评估B细胞的IgA生产gydF4y2Ba与gydF4y2Ba对照组,并与IgG产生进行比较。卑鄙 ± gydF4y2BasdgydF4y2Ba浓度为9.7±5.0 ng·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2BaIgA(8.6±5.0 ng·mL .gydF4y2Ba−1gydF4y2BaIGA1和2.8±1.6 ng·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2BaIgA2)和5.5±3.6 ng·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2BaIgG。gydF4y2Ba图3.gydF4y2Ba一种-gydF4y2BacgydF4y2Ba显示了b细胞培养至第13天的IgA生成水平,无论是单独培养还是与AECs共培养,无论是来自对照组还是COPD患者。由于不同的b细胞供体产生的免疫球蛋白水平不同,为了比较AECs对b细胞免疫球蛋白产生的内在影响,数据被表达为单独b细胞正常化后IgA(以及IgG、IgA1和IgA2)产生的倍数变化(gydF4y2Ba无花果。3.gydF4y2Bad -gydF4y2BaggydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
IgG产生上调(∼与AEC共培养的B细胞与单独培养的B细胞相比增加了1.5倍)。无论AEC表型或培养条件(静息、LPS或CSE刺激)如何,均可观察到这种增加。相比之下,与COPD患者AEC共培养的B细胞中IgA生成增加,而与对照组相比没有增加(1.58)-gydF4y2Ba与gydF4y2Ba静息条件下增加1.26倍,静息条件下增加1.67-gydF4y2Ba与gydF4y2BaLPS刺激1.16倍,P = 0.0035和P = 0.0392分别)。当COPD患者分为两组严重程度时(轻度/中度gydF4y2Ba与gydF4y2Ba严重/非常严重),似乎IgA上调在严重/非常严重的组中更显着(图S1-B)。此外,不管有效或前者吸烟状态如何,在COPD中观察到该IGA上调效果(图S1-C)。gydF4y2Ba
CSE刺激后,对IgA的上调作用部分消失(1.28-gydF4y2Ba与gydF4y2Ba与来自COPD患者和对照患者的AECS共同培养的B细胞变化1.15倍。P = 0.2064)。值得注意的是,LPS和CSE没有直接影响B细胞的免疫球蛋白(图S2-A)。gydF4y2Ba
为了排除上皮细胞和B细胞之间人类白细胞抗原错配的影响,COPD患者和对照组的AEC与来自同一供体的B细胞共同培养。数据显示在gydF4y2Ba表2.gydF4y2Ba证实在COPD患者AECs中观察到IgA上调,而在对照组AECs中观察到IgA上调不显著。gydF4y2Ba
AEC/ b细胞共培养对iga诱导受体的影响gydF4y2Ba
为了探索来自COPD患者的AECS诱导IGA合成选择性诱导的机制,我们评估了分化标志物CD38和受体Baff-R和TACI的表达(分别结合BAFF,以及BAFF和4月)。与单独培养的B细胞相比,与来自COPD患者的AECS共同培养的B细胞上调节(〜2倍)对来自COPD患者的AECS(尤其培养的那些)(P = 0.0067)(p = 0.0067)(gydF4y2Ba无花果。4AgydF4y2Ba和gydF4y2BabgydF4y2Ba)。虽然LPS刺激没有效果,但CSE刺激抑制了AEC诱导CD38的能力gydF4y2Ba+gydF4y2Ba(图S3-A)。与baf - r相比,baf - r不受共培养的影响(除了对CSE刺激有轻微抑制),与b细胞与对照组AECs共培养相比,在b细胞与COPD患者AECs共培养中诱导TACI(约为3倍)(p=0.0071) (gydF4y2Ba无花果。4gydF4y2Ba氟)。LPS和CSE的刺激都抑制了这种作用(图S3-C),即使CSEgydF4y2Ba本身gydF4y2Ba能上调b细胞的TACI(图S2-B)。相比之下,LPS和CSE并不影响CD38和baffr的表达水平(图S2-B)。gydF4y2Ba
支气管上皮产生IgA诱导可溶性因子gydF4y2Ba
为了进一步探索来自COPD患者的AECS诱导IGA合成的选择性诱导的机制,我们研究了IGA诱导细胞因子TGF-β1,4月,BAFF和IL-6。对于TGF-β1没有观察到显着的变化(“总”,酸化后),4月和BAFF(除了COPD患者的AECS略微减少,与对照组相比,P = 0.02)(gydF4y2Ba图5AgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BacgydF4y2Ba和s4)。相比之下,来自COPD患者的AECS与来自对照的AECs相比,释放了含量的IL-6量,并且这种对CSE刺激的显着意义(P = 0.0435)(gydF4y2Ba图5 dgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BafgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
TACI及其配体BAFF和APRIL在肺组织中的表达gydF4y2Ba
由于TACI是COPD上皮(通过BAFF和/或APRIL)上调IgA的候选介质,我们进一步研究了这些分子在肺组织中的表达。两组间TACI mRNA水平无显著差异(与吸烟者和COPD患者相比,非吸烟者的TACI mRNA水平分别为p=0.13和p=0.19)(gydF4y2Ba图6gydF4y2Ba)。然而,TACI和IgA1 mRNA的表达水平显着相关(R.gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba= 0.44,p = 0.0012)(gydF4y2Ba图6 bgydF4y2Ba)。值得注意的是,这种相关性仍然很大(RgydF4y2Ba年代gydF4y2Ba=0.42, p=0.0027)。此外,与不吸烟者相比,吸烟者和COPD患者的BAFF和四月mRNA水平上调(BAFF和四月p=0.0089和p=0.0141) (gydF4y2Ba无花果。6gydF4y2Ba此外,BAFF水平与TACI和APRIL的水平密切相关(rgydF4y2Ba年代gydF4y2Ba=0.50, p=0.0002)gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba=0.75 (p<0.0001))(图S5)。gydF4y2Ba
IL-6/IL-6受体和baff4 /TACI通路在上皮性IgA上调中的作用gydF4y2Ba
基于我们的数据,TACI和IL-6都是介导COPD上皮诱导IgA合成上调的候选基因;然后我们通过使用TACI-Fc和抗il -6阻断抗体来研究它们对IgA诱导的贡献。IL-6的中和作用显著降低了b细胞与AECs共培养时产生的IgA (gydF4y2Ba无花果。7AgydF4y2Ba和gydF4y2BabgydF4y2Ba)。这种效果在所有时间点都很重要,但在共同培养的早期阶段更加明显。障碍塔可抑制,在较小程度上,诱导IgA生产(gydF4y2Ba无花果。7C.gydF4y2Ba和gydF4y2BadgydF4y2Ba). 这些数据进一步支持COPD上皮诱导B细胞IgA上调的概念gydF4y2Ba通过gydF4y2BaIL-6 / IL-6受体(IL-6R)和BAFF-APRIL / TACI途径;显示了在粘膜上皮和B细胞之间操作的机制的示意图,并显示了调节IGA系统gydF4y2Ba图8gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
本研究表明支气管上皮调节b细胞和肺中的体液免疫,表明慢性阻塞性肺病上皮标记b细胞与增加的IgA产生和成熟成浆细胞。IL-6在上皮调节中对IgA上调至关重要,COPD患者的支气管上皮分泌量增加。在COPD患者和吸烟者的肺组织中,baf - april /TACI通路也上调,并在较小程度上影响上皮/ b细胞/IgA轴。然而,我们也发现IgA在上皮下区域积聚,这表明合成的增加并不转化为分泌性IgA的增加。此外,CSE暴露于支气管上皮会抵消其促进iga的活性gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
我们的研究的关键发现是支气管上皮细胞和B细胞之间的肺部存在串扰。支气管上皮重构gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba当与来自正常供者的b细胞共培养时,来自COPD患者肺组织的b细胞能够促进IgA的产生,而IgG的产生与患者的表型无关。这一发现被肺组织的表达数据证实,在COPD中,IgA(尤其是IgA1)的活性合成增加。这与在肠道中发现的情况相反,在肠道中观察到优先的IgA2合成[gydF4y2Ba21gydF4y2Ba,gydF4y2Ba24gydF4y2Ba[但仍有待确定COPD肺中IgA合成的上调是否涉及切换到IgA和/或IgA开关的B /血浆细胞的激活或增殖。gydF4y2Ba
B细胞向CD38的成熟gydF4y2Ba+gydF4y2Ba与COPD患者上皮细胞共培养后,免疫球蛋白分泌浆细胞和TACI表达增加。此外,TACI与COPD肺组织中IgA1合成相关,其中和作用轻微但显著降低了上皮/ b细胞共培养中IgA合成。先前的研究表明TACI和baffr都可以介导b细胞中的IgA转换[gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba].在肺中,上皮和树突细胞都将IgA诱导信号递送至B细胞[gydF4y2Ba29gydF4y2Ba[如BAFF和4月,这些依赖于局部积累和激活的依赖性方式有助于gydF4y2Ba例如gydF4y2Ba合成免疫球蛋白)的气道b细胞[gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba].在我们的COPD患者AEC培养中观察到BAFF产量下降的原因仍不清楚。我们推测TACI上调对BAFF产生细胞的负反馈回路效应,因为TACI可能间接调节BAFF水平,而在TACI中BAFF水平明显升高gydF4y2Ba−−/gydF4y2Ba老鼠(gydF4y2Ba31gydF4y2Ba,gydF4y2Ba32gydF4y2Ba].相比之下,我们的吸烟者和慢性阻塞性肺病患者的肺组织中BAFF的产生增加了,如先前报道的[gydF4y2Ba33gydF4y2Ba].我们表明,4月份也在吸烟者和COPD患者中上调。gydF4y2Ba
在IgA诱导因子中,IL-6在来自COPD患者的AECS的原发性培养中上调。在COPD中报告了IL-6的表达增加[gydF4y2Ba34gydF4y2Ba,gydF4y2Ba35gydF4y2Ba],已知增加IgA生产[gydF4y2Ba36gydF4y2Ba并调节肠道树突状细胞的促iga效应[gydF4y2Ba37gydF4y2Ba].有趣的是,IL-6的阻断显着抑制了COPD上皮细胞的IgA诱导。据报道,在腺苷介导损伤的小鼠模型中缺失IL-6减毒肺炎和纤维化[gydF4y2Ba38gydF4y2Ba),以及基因多态性(gydF4y2BaIL6.gydF4y2Ba-174g / c)与COPD的易感性有关[gydF4y2Ba39gydF4y2Ba].此外,有报道称,COPD患者外周血IL-6浓度升高,是鉴别COPD患者与非COPD吸烟者系统性炎症的可靠标志物[gydF4y2Ba40gydF4y2Ba,gydF4y2Ba41gydF4y2Ba].我们的数据表明,IL-6介导了COPD支气管上皮对b细胞的启动作用,以促进IgA合成。然而,IL-6是否也参与了COPD肺中b细胞的分化/成熟,以及COPD患者对b细胞的调节是否与本文使用的正常血液b细胞不同,尚不清楚。因此,我们发现积极吸烟COPD患者的血液b细胞在b细胞反应和免疫球蛋白转换方面与健康对照组不同[gydF4y2Ba42gydF4y2Ba].因此,除了通过气道上皮的异常调节之外,内在的变化也可能直接影响来自吸烟者和/或COPD患者的B细胞,这是本研究的重点。gydF4y2Ba
我们的数据表明,慢性阻塞性肺病患者肺中IgA合成的增加并不能转化为分泌水平的增加,因为观察到IgA在上皮下区域明显积聚。这一观察结果可能与慢性阻塞性肺病中报道的pIgR介导的IgA跨上皮转运减少有关[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba],并且可以中止IGA贩运呼吸道粘膜,并限制其在所谓的吸入病原体免疫排除的作用。另外,虽然gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba将上皮暴露于卷烟烟雾可以上调IL-6释放和TACI表达,它抵消了上皮对B细胞的IgA促进作用。gydF4y2Ba
吸烟对肺IgA系统的影响包括多种成分。在我们gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba在共培养系统中,COPD支气管上皮细胞暴露于CSE降低了其对b细胞的iga上调作用。相反,IgA1表达上调gydF4y2Ba原位gydF4y2Ba在COPD患者的肺活检中。此外,与非吸烟者相比,慢性阻塞性肺病患者以及“健康”吸烟者的肺活检中,IgA诱导因子BAFF和APRIL表达上调。这些结果表明,吸烟者和慢性阻塞性肺病患者反复/慢性吸烟后,B细胞产生的IgA被促进,而慢性阻塞性肺病气道上皮的“急性”暴露降低了其刺激IgA产生的能力。然而,对获得的数据的解释gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba和gydF4y2Ba原位gydF4y2Ba需要谨慎。首先,在我们的gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba系统中,AECs暴露一次并持续有限时间(48 h);目前还不清楚重复或长时间的接触是否会导致不同的反应。其次,研究IgA反应gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba在AECs和b细胞共培养时,其他参与者(gydF4y2Ba例如gydF4y2Ba树突状细胞可能涉及[gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba].第三,慢性阻塞性肺病肺中存在淋巴滤泡[gydF4y2Ba33gydF4y2Ba反过来也可以改变B细胞/免疫球蛋白对烟雾暴露的反应。众所周知,血清IgA,IgG和IgM的血清水平减少了吸烟者,与IgE相反[gydF4y2Ba43gydF4y2Ba].此外,香烟烟雾代表感染的重要危险因素,加剧了肺炎的反应,gydF4y2Ba嗜血杆菌流感gydF4y2Ba(COPD加重期间最常分离的细菌制剂)[gydF4y2Ba44gydF4y2Ba].我们认为,这些特征,至少部分是由烟雾诱导的肺IgA免疫机制改变造成的。gydF4y2Ba
完全,我们的研究结果表明,除了IGA的障碍障碍障碍之外还表明了[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba], COPD支气管上皮印迹b细胞以增加IgA的产生和成熟(CD38gydF4y2Ba+gydF4y2Ba)血浆细胞。我们确定了这一点,gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba上皮细胞IL-6/B细胞轴在促进IgA合成中起着中心作用,在较低程度上,BAFF-APRIL/TACI轴也起着中心作用。然而,我们在肺组织中的数据表明,这些IgA促进途径的激活不会导致通过IgA增加对肺的保护,因为它在上皮下区域积聚,可能是由于伴随的跨上皮转运受损。此外,香烟烟雾可能通过直接作用于上皮细胞而部分抵消IgA促进途径,这可能导致患有COPD的活跃吸烟者对呼吸道感染的易感性增加。gydF4y2Ba
因此,该研究突出了上皮细胞和B细胞之间的串扰,调节COPD中的IgA产生,以及在定义恢复正常肺IgA免疫力的策略之前,需要鉴定IgA在上皮中的IgA障碍的机制。gydF4y2Ba
致谢gydF4y2Ba
作者感谢:P. Thurion和M. Delos(病理学系,CHU Mont-Godinne, Yvoir, Belgium), C. fregilicka和C. Bouzin (IREC细胞成像平台,UCL, Brussels, Belgium),感谢他们在组织处理和免疫组化方面的帮助;布鲁塞尔圣卢克诊所(A. Poncelet)和伊瓦尔蒙特戈丁大学(P. Eucher)的胸外科;A. Robert (Institut de Recherche Santé et Société, Pôle d'épidémiologie et biostatistics, UCL)寻求统计分析的帮助;Y. Sibille(肺科,CHU Mont-Godinne)的建议和手稿的批判性审查;和P. Cheou (C. de Duve细胞病理学研究所和路德维希癌症研究所,UCL)帮助进行IL-6生物测定。gydF4y2Ba
脚注gydF4y2Ba
这篇文章的补充材料可从gydF4y2Bawww.qdcxjkg.com.gydF4y2Ba
支持声明:Maha Zohra Ladjemi是欧洲呼吸协会/ Marie Curie联合博士后研究奖学金(Gra188bet官网地址nt MC1592-2010)和第七框架计划2007-2013授予(协议呼吸,PCOFUND-GA-2008-229571)。Charles Pilette是Monds National de La Recherche Scientifique的博士后专家(Grant Frsm 3.4522.12和授权#1.R.016.14)和Welbio的调查员(CR-2012S-05)。gydF4y2Ba
利益冲突:无声明。gydF4y2Ba
- 已收到gydF4y2Ba2014年4月4日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2014年10月8日。gydF4y2Ba
- 版权所有©2015gydF4y2Ba
参考gydF4y2Ba
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