补充材料
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在这个数据补充文件:
- 补充的方法——免疫荧光染色
细胞培养和辐照
细胞培养和博来霉素治疗
豚鼠暴露于香烟烟雾中
肺处理的形态学分析和免疫荧光染色 - 图S1—— Correlations γH2AX 疫 源地 的 数量 与 数字 之间 的 每个 细胞 磷酸化 53 BP1 疫 源地 类型 II 细胞 (A) H2AX 疫 源地 的 数量 和 数字 之间 的 每个 细胞 磷酸化 ATM 衬底 疫 源地 类型 II 细胞 (B). Circles = 无 症状 smokers;三角形=无症状吸烟者;广场=慢性阻塞性肺病患者。
- 图S2——X-irradiation肺微血管细胞导致双边带,细胞凋亡,细胞衰老,NFκB磷酸化,il - 6生产。正常的人类肺微血管细胞培养和10 Gy x射线辐照剂量。细胞被固定在3%多聚甲醛2小时后疣状γH2AX,磷酸化53 bp1,和主动caspase-3或48小时后为p16和磷酸化NFκB疣状。细胞培养上清液辐照后48小时收获,并通过ELISA il - 6浓度测量。(一)免疫荧光染色的代表图像X-irradiated细胞(IR)和unirradiated(续)。积极immunosignals红色荧光。细胞核与DAPI染色。(B-F)定量分析的免疫荧光染色的结果。在每个实验N = 4。(G)的ELISA结果的测量由X-ray-irradiated细胞的il - 6分泌量和unirradiated细胞。 N = 8 in each experiment.
- 图S3——与博来霉素诱导双边带治疗A549细胞,细胞凋亡,细胞衰老,NFκB磷酸化,il - 6生产。A549 细胞 接受 50 μg/ml 博 来 霉素 和 3% 多 聚 甲醛 中 固定 24 小时 后 在 准备 疣 状 γH2AX, 磷酸化 53 BP1, 和 活跃 caspase-3, 或 48 小时 后 为 p21 和 磷酸化 NFB. 疣 状细胞培养上清液后48小时内,通过ELISA il - 6的浓度测定。(一)代表的图像immunofluorescence-stained bleomycin-treated细胞(Bleo)和未经处理的细胞(续)。积极immunosignalsγH2AX、磷酸化53 bp1活跃caspase-3,和磷酸化NFκB形式的红色荧光,p21和绿色荧光的形式。细胞核与DAPI染色。(B-F)定量分析的免疫荧光染色的结果。在每个实验N = 4。(G)的ELISA结果的测量由bleomycin-treated细胞的il - 6分泌量和未经处理的细胞。在每个实验N = 8。
- 图S4——双边带发生在肺部与香烟烟雾诱发肺气肿豚鼠。显微照片(A)代表肺组织部分与苏木精和伊红染色(上部面板)和沾anti-γH2AX抗体(较低的面板)。插图是一个扩大γH2AX-positive细胞的显微照片。(B)的定量分析空域大小(Lm:意思是线性拦截)和γH2AX疫源地在肺泡壁细胞的数量。c =肺豚鼠暴露于香烟烟雾的10周(n = 5);空气=肺sham-exposed豚鼠(n = 8)。数据表示为�SEM手段。